平码五不中公式规律
  • / 6
  • 下载费用:30 金币  

一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌的培育方法.pdf

关 键 ?#21097;?/dt>
一种 用于 水体 复合 培育 方法
  专利查询网所有资源均是用户自行上传分享,仅供网友学习交流,未经上传用户书面授权,请勿作他用。
摘要
申请专利号:

CN201410136717.9

申请日:

2014.04.04

公开号:

CN103911332A

公开日:

2014.07.09

当前法律状态:

授权

有效性:

有权

法?#19978;?#24773;: 授权|||实质审查的生效IPC(主分类):C12N 1/20申请日:20140404|||公开
IPC分类号: C12N1/20; C02F3/34; C12R1/085(2006.01)N; C12R1/01(2006.01)N; C12R1/38(2006.01)N; C12R1/125(2006.01)N 主分类号: C12N1/20
申请人: 范敏
发明人: 范敏; 王勤
地址: 200135 上海市浦东新区羽山路100弄4-301
优?#28909;ǎ?/td>
专利代理机构: 上海申新律师事务所 31272 代理人: 刘懿
PDF完整版下载: PDF下载
法律状态
申请(专利)号:

CN201410136717.9

授权公告号:

||||||

法律状态公告日:

2016.01.20|||2014.08.06|||2014.07.09

法律状态类型:

授权|||实质审查的生效|||公开

摘要

本发明公开了一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌的培育方法,包括(1)菌种样品采集,(2)扩增培养,(3)筛选驯化菌种和(4)纯化菌种?#20154;?#20010;步骤,本发明首先在市政污水厂的活性污泥和黑臭水体底泥里筛选出具有脱氮除磷的土著微生物,用黑臭水体的污水作为主要的碳源与能量,再加入其他菌种生长所需的营养元素,通过驯化得到?#37259;?#26412;土环?#25345;?#30340;具有脱氮除磷的复合菌。本发明培养出的菌种具有增殖快,对黑臭水体的脱氮除磷效果明显等特点,使用本发明得到的复合菌处理黑臭水体既避免了使用化学净水剂的二次污染,也不需要担心菌种的安全性,处理效率也远高于种植水生植物。

权利要求书

权利要求书
1.  一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌的培育方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)菌种样品采集:分别采集市政污水处理厂的活性污泥与黑臭水体的底泥,放入恒温箱中待用,温度为28℃~35℃;
(2)扩增培养:在好氧条件下,向两种污泥样?#20998;?#20998;别加入液体培养基进行恒稳培养,温度为28℃~35℃,培养时间为2~3天;
(3)筛选驯化菌种:将两种污泥混合液按照1~3:1混合加入筛选驯化培养基中,在28℃~35℃温度下好氧振荡,2~3天为一个驯化周期,需要5-8个驯化周期;每个驯化周期结束后,取5-10mL培养液接种到新鲜的筛选驯化培养基中;
(4)纯化菌种:将筛选好的菌种接种到活化富集培养基中,在28℃~35℃温度,培养2-3天,离心处理,再用磷酸盐缓冲液清洗,再离心制成菌种悬浮液。

2.  根据权利要求1所述的用于黑臭水体脱氮除磷复合菌的培育方法,其特征在于,步骤(2)所述的液体培养基的配置比例为:1000mL培养基中加入K2HPO40.0-1.5g、MgSO4·7H2O1-3g、牛肉膏1-3g、(NH4)2SO41-2g、NaH2PO4·3H2O1-2g、尿素0.2-0.3g、FeSO4·7H2O0.002-0.003g、MnSO4·7H2O0.003-0.004g、ZnSO4·7H2O0.003-0.004g、CoSO4·7H2O0.001-0.002g、葡萄糖15-16g,调PH值为7.0,并高压灭菌。

3.  根据权利要求1所述的用于黑臭水体脱氮除磷复合菌的培育方法,其特征在于,步骤(3)所述的筛选驯化培养基的配置比例为:1000mL培养基中 加入黑臭水体的污水50-100g、K2HPO41.5-2.5g、NaH2PO4·3H2O1-2g、MgSO4·7H2O3-4g、、NH4Cl2-3g、维生素B10.1-0.2g,调PH值为7.0,并高压灭菌。

4.  根据权利要求1所述的用于黑臭水体脱氮除磷复合菌的培育方法,其特征在于,步骤(4)所述的活化富集培养基的配置比例为:1000mL培养基中加入NH4Cl2-3g,牛肉膏5-6g、、葡萄糖15-16g、琼脂15-16g,调PH值为7.0,并高压灭菌。

说明书

说明书一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌的培育方法
技术领域
本发明涉及微生物菌种培养技术领域,具体涉及一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌的培育方法。
背景技术。
在我国的城市内河,封闭水体,小流域都存在严重的水体富营养化污染,黑臭,异味,甚至?#23545;?#36196;潮,在水体安全和人体健康方面造成了巨大的损害。氮、磷等营养物质过剩是引发水体黑臭富营养化的根本原因,当水体中N浓度>0.2mg/L,P浓度>0.02mg/L?#26412;?#23384;在发生富营养化的可能性。由于我国城市管网规划的不全面,造成许多的城市内河都受到生活污水排放的影响变成臭水?#25285;?#22833;去自净能力。而生活污水是氮、磷等营养物质的最大排放源,因此如何解决黑臭水体的氮磷是生态修复城市内河,封闭水体,小流域的核心问题。目前使用的较多的有投加化学净水剂,外加菌种以及种植水生植物等方法。投加化学净水?#37327;?#20197;快速的?#26723;?#27700;体里的磷含量,但是产生无机沉淀物,导致底泥状态恶化,产生二次污染,而且对氮没有作用;外加菌种,可以增加水体里脱氮除磷微生物的数量,但存在外来菌种对水体的适应和外来物种长期安全性的风险,而?#39029;?#26412;较高,每平米水体外加菌种的费用在1-2元;种植具有解氮聚磷的水生植物,可以吸收利用水体中的氮磷,但是生长周期较长,并且需要及时收割,人工费用较高,作用有限。
鉴于上述问题,有必要培养一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌培育方法来解决上述问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌培育方法,以期有效解决黑臭水体中氮磷过剩的问题。
本发明的技术方案为:
一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌的培育方法,包括以下步骤:
(1)菌种样品采集:分别采集市政污水处理厂的活性污泥与黑臭水体的底泥,放入恒温箱中待用,温度为28℃~35℃;
(2)扩增培养:在好氧条件下,向两种污泥样?#20998;?#20998;别加入液体培养基进行恒稳培养,温度为28℃~35℃,培养时间为2~3天;
(3)筛选驯化菌种:将两种污泥混合液按照1~3:1混合加入筛选驯化培养基中,在28℃~35℃温度下好氧振荡,2~3天为一个驯化周期,需要5-8个驯化周期;每个驯化周期结束后,取5-10mL培养液接种到新鲜的筛选驯化培养基中;
(4)纯化菌种:将筛选好的菌种接种到活化富集培养基中,在28℃~35℃温度,培养2-3天,用高速离心机离心处理,再用磷酸盐缓冲液清洗,再离心制成菌种悬浮液。
步骤(2)所述的液体培养基的配置比例为:1000mL培养基中加入K2HPO40.0-1.5g、MgSO4·7H2O1-3g、牛肉膏1-3g、(NH4)2SO41-2g、NaH2PO4·3H2O1-2g、尿素0.2-0.3g、FeSO4·7H2O0.002-0.003g、MnSO4·7H2O0.003-0.004g、ZnSO4·7 H2O0.003-0.004g、CoSO4·7H2O0.001-0.002g、葡萄糖15-16g,调PH值为7.0,并高压灭菌。
步骤(3)所述的筛选驯化培养基的配置比例为:1000mL培养基中加入黑臭水体的污水50-100g、K2HPO41.5-2.5g、NaH2PO4·3H2O1-2g、MgSO4·7H2O3-4g、、NH4Cl2-3g、维生素B10.1-0.2g,调PH值为7.0,并高压灭菌。
步骤(4)所述的活化富集培养基的配置比例为:1000mL培养基中加入NH4Cl2-3g,牛肉膏5-6g、葡萄糖15-16g、琼脂15-16g,调PH值为7.0,并高压灭菌。
经鉴定,所得菌种包含以?#28388;?#31181;微生物:蜡状芽孢杆菌、脱氮副球菌、施氏假单胞菌、枯草芽孢杆菌。
本发明首先在市政污水厂的活性污泥和黑臭水体底泥里筛选出具有脱氮除磷的土著微生物,用黑臭水体的污水作为主要的碳源与能量,再加入其他菌种生长所需的营养元素,通过驯化得到?#37259;?#26412;土环?#25345;?#30340;具有脱氮除磷的复合菌。本发明培养出的菌种具有增殖快,对黑臭水体的脱氮除磷效果明显等特点,使用本发明得到的复合菌处理黑臭水体既避免了使用化学净水剂的二次污染,也不需要担心菌种的安全性,处理效率也远高于种植水生植物。
附图说明
图1为本发明的用于黑臭水体脱氮除磷复合菌培育方法的流程图。
具体实施方式
实施例:
本发明所述的用于黑臭水体脱氮除磷复合菌培育方法的流程图请参阅图1,具体实施步骤如下:
(1)菌种样品采集:分别用无菌取样瓶采集南京一市政污水处理厂的活性污泥与城市一黑臭内河的底泥各1000mL,放入恒温箱中待用,温度为28℃~35℃。
(2)扩增培养?#21512;?#20004;种污泥样?#20998;?#20998;别按照10g/L的比例加入液体培养基,并进行曝气恒温培养,温度为28℃~35℃,培养时间为2-3天。其中液体培养基的成分为:1000mL培养基中加入K2HPO41.5g、MgSO4·7H2O1g、牛肉膏1g、(NH4)2SO41g、NaH2PO4·3H2O1g、尿素0.2g、FeSO4·7H2O0.002g、MnSO4·7H2O0.003g、ZnSO4·7H2O0.003g、CoSO4·7H2O0.001g、葡萄糖15g,调PH值为7.0,并高压灭菌。
(3)筛选驯化菌种:将两种污泥混合液按照1:1比例共取5mL混合,加入1000mL筛选驯化培养基,在28℃~35℃温度下好氧振荡,2天为一个驯化周期,?#27493;?#34892;6个驯化周期。每个驯化周期结束后,取5mL培养液接种到新鲜的1000mL筛选驯化培养基中。其中筛选驯化培养基成分为:1000mL培养基中加入黑臭水体的污水100g、K2HPO41.5g、NaH2PO4·3H2O1.0g、MgSO4·7H2O3.0g、、NH4Cl2g、维生素B10.1g,调PH值为7.0,并高压灭菌。
(4)纯化菌种:将筛选好的菌种5mL接种到1000mL活化富集培养基中,在28℃~35℃温度,培养2天,用高速离心机(8000r/min)离心处理10min,再用磷酸盐缓冲液清洗,再离心10min制成菌种悬浮液。其中活化富集培养基成分为1000mL培养基中加入NH4Cl2g,牛肉膏5g、、葡萄糖15g、琼脂15g,调PH值为7.0,并高压灭菌。
(5)菌种鉴定:用MIDI脂肪酸鉴定?#20302;程?#20379;的萃取、鉴定方法鉴定纯化出的菌落。鉴定出的菌种包含以?#28388;?#31181;微生物,?#26469;?#32534;号为:A蜡状芽孢杆菌B脱氮副球菌C施氏假单胞菌D枯草芽孢杆菌。
A蜡状芽孢杆菌落为乳白色,不规则形状,革兰?#20808;?#33394;为阳性;B脱氮副球菌,乳黄色,菌株个体呈椭圆形,革兰?#20808;?#33394;为阴性;C施氏假单胞菌落为黄色,直或微弯的杆菌状,革兰?#20808;?#33394;为阴性;D枯草芽孢杆菌落为微黄色,椭圆到柱状,革兰?#20808;?#33394;阳性。四种菌在培养基中存活的比例为:A蜡状芽孢杆菌38%,B脱氮副球菌35%,C施氏假单胞菌18%,D枯草芽孢杆菌9%。将得到的复合菌悬?#28023;?#22312;28-35℃温度下加入液体培养基,培养2天,好氧处理取自黑臭河水里的污水,实验发现,按照1%的投加量,8-16个小时的好氧处理?#31579;?#25928;去除污水中的悬浮物(SS),CODcr,氨氮和总磷(TP)。如表1,通过16个小时的处理,可?#28304;?#21040;地表水四类标准的要求。
表1

上述实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等效变化和修饰同样落入本发明权利要求所限定的范围。

关于本文
本文标题:一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌的培育方法.pdf
链接地址:http://www.pqiex.tw/p-6115808.html
关于我们 - 网站声明 - 网?#38236;?#22270; - 资源地图 - 友情链接 - 网站客服 - 联系我们

[email protected] 2017-2018 zhuanlichaxun.net网站版权所有
经营许可证编号:粤ICP备17046363号-1 
 


收起
展开
平码五不中公式规律 股票融资是什么意思 怎么炒股 成都股票配资 五粮液股票行情分析 股票分析师靠什么赚钱 黄金股票 股票指数基金什么意思 股票融资的类型 000420股票行情 飞乐音响股票