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激酶抑制剂的组合及其用途.pdf

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激酶 抑制剂 组合 及其 用途
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摘要
申请专利号:

CN201280066886.9

申请日:

2012.11.12

公开号:

CN104204804A

公开日:

2014.12.10

当前法律状态:

授权

有效性:

有权

法?#19978;?#24773;: 授权|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 33/574申请日:20121112|||公开
IPC分类号: G01N33/574 主分类号: G01N33/574
申请人: 因特利凯有限责任公司
发明人: 卡塔洋·杰森; 昕·郭; 任平达; C·罗梅尔; 刘异
地址: 美国加利福尼亚州
优?#28909;ǎ?/td> 2011.11.11 US 61/558,928
专利代理机构: 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 代理人: 王思琪;郑霞
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法律状态
申请(专利)号:

CN201280066886.9

授权公告号:

||||||

法律状态公告日:

2016.09.28|||2015.01.07|||2014.12.10

法律状态类型:

授权|||实质审查的生效|||公开

摘要

本发明提供一种用于治疗受试者中与PI3-激酶α和/或受体酪氨酸激酶(RTK)相关的疾病状况的方法。另一方面,本发明提供一种用于治疗受试者中与PI3-激酶α和/或RTK相关的疾病状况的方法。在又一方面,阐述了一种抑制细胞中Akt(S473)的磷酸化的方法。

权利要求书

权利要求书
1.  一种用于治疗受试者中与PI3-激酶α和/或受体酪氨酸激酶(RTK)相关的疾病状况的方法,其包括同时地或相继地向所述受试者施用治疗有效量的PI3-激酶α抑制剂和RTK抑制剂的组合,其中所述PI3-激酶α抑制剂展示出通过体外激酶试验确定的、相对于一?#21482;?#22810;种I型磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-激酶)对PI3-激酶α的选择性抑制,其中所述一?#21482;?#22810;种I型PI3-激酶选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ。

2.  如权利要求1所述的方法,其中所述组合包含协同有效治疗量的PI3-激酶α抑制剂和RTK抑制剂,其中所述PI3-激酶α抑制剂和/或所述RTK抑制剂以亚治疗量存在。

3.  如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述与PI3-激酶α和/或RTK相关的疾病状况选自肿瘤病状、自身免疫性疾病、炎性疾病、?#23435;?#21270;疾病和肾脏疾病。

4.  如权利要求3所述的方法,其中所述肿瘤病状选自NSCLC、头颈部鳞状细胞癌、胰腺癌、乳腺癌和卵巢癌、肾细胞癌、前列腺癌、神经内分泌癌、胃癌、膀胱癌、结肠癌和子宫内膜癌。

5.  一种抑制细胞中Akt的磷酸化的方法,其包括使细胞与有效量的PI3-激酶α抑制剂和受体酪氨酸激酶(RTK)抑制剂接触,如通过基于细胞的试验或体外激酶试验所确定的,所述受体酪氨酸激酶(RTK)抑制剂相对于一?#21482;?#22810;种I型磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-激酶)选择性地抑制I类RTK的活性,其中所述PI3-激酶α抑制剂展示出通过体外激酶试验确定的、相对于一?#21482;?#22810;种I型磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-激酶)对PI3-激酶α的选择性抑制,其中所述一?#21482;?#22810;种I型PI3-激酶选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ。

6.  如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述PI3-激酶α抑制剂相对于由PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ组成的所有其他I型磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-激酶)选择性地抑制PI3-激酶α。

7.  如前述权利要求中任一项所述的方法,其中如在体外激酶试验中 所确定的,所述PI3-激酶α抑制剂以约100nM或更低的IC50值抑制PI3-激酶α。

8.  如前述权利要求中任一项所述的方法,其中如在体外激酶试验中所确定的,所述PI3-激酶α抑制剂以约50nM或更低的IC50值抑制PI3-激酶α。

9.  如前述权利要求中任一项所述的方法,其中如在体外激酶试验中所确定的,所述PI3-激酶α抑制剂以约20nM或更低的IC50值抑制PI3-激酶α。

10.  如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述PI3-激酶α抑制剂选择性地抑制PI3-激酶?#31890;?#20854;IC50值比其针对选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的所有其他I型PI3-激酶的IC50?#26723;?#33267;少5倍。

11.  如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述PI3-激酶α抑制剂以小于约200nM的IC50值选择性地抑制PI3-激酶?#31890;?#24182;且所述IC50值比其针对选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的所有其他I型PI3-激酶的IC50?#26723;?#33267;少5倍。

12.  如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述RTK抑制剂结合并直接抑制HER2或EGFR。

13.  如前述权利要求中任一项所述的方法,其中如在体外试验,例如体外激酶试验中所确定的,所述RTK抑制剂以约100nM或更低的IC50值抑制HER2或EGFR。

14.  如前述权利要求中任一项所述的方法,其中如在体外试验,例如体外激酶试验中所确定的,所述RTK抑制剂以约50nM或更低的IC50值抑制HER2或EGFR。

15.  如前述权利要求中任一项所述的方法,其中如在体外试验,例如体外激酶试验中所确定的,所述RTK抑制剂以约20nM或更低的IC50值抑制HER2或EGFR。

16.  如前述权利要求中任一项所述的方法,其中如在体外试验,例如体外激酶试验中所确定的,所述RTK抑制剂以约50nM或更低的IC50值抑制HER2或EGFR,并且所述RTK抑制剂针对选自PI3-激酶α、PI3- 激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的一?#21482;?#22810;种I型PI3-激酶基本上无活性。

17.  如前述权利要求中任一项所述的方法,其中如在体外试验,例如体外激酶试验中所确定的,所述RTK抑制剂以约100nM或更低的IC50值抑制HER2和EGFR两者,并且所述IC50值比其针对选自PI3-激酶α、PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的所有I型PI3-激酶的IC50值至少低5倍。

18.  如权利要求1-17中任一项所述的方法,其中所述RTK抑制剂选择性抑制HER2和EGFR。

19.  如权利要求18所述的方法,其中所述RTK抑制剂是拉帕替尼或其类似物。

20.  如权利要求1-17中任一项所述的方法,其中所述RTK抑制剂选择性抑制HER2。

21.  如权利要求20所述的方法,其中所述RTK抑制剂为曲妥珠单抗或其类似物或生物相似物。

22.  如权利要求1-17中任一项所述的方法,其中所述RTK抑制剂选择性抑制EGFR。

23.  如权利要求22所述的方法,其中所述RTK抑制剂?#21069;?#32599;替尼、吉非替尼、凡他尼布或它们的类似物。

24.  如权利要求1-17中任一项所述的方法,其中所述PI3-激酶α抑制剂为下式的化合物:

或其药学上可接受的盐,其中:
W1'为N、NR3'或CR3';W2'为N、NR4'、CR4'或C=O;W3'为N、NR5'或CR5';W4'为N,其中没有超过两个N原子且没有超过两个C=O基团相邻;
W5'为N;
W6'为N或CR8';
Wa'和Wb'独立地为N或CR9';
Wc'和Wd'中的一个为N,而另一个为O、NR10'或S;
R1'和R2'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;
R3'和R4'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;或者R3'和R4'一起形成环状部分;
R5'、R6'、R7'和R8'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;
R9'为氢、烷基或卤代;且
R10'为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分。

25.  如权利要求24所述的方法,其中所述PI3-激酶α抑制剂为下式的化合物:

或其药学上可接受的盐,其中:
W1为N、NR3或CR3;W2为N、NR4、CR4或C=O;W3为N、NR5或CR5;W4为N或NR6,其中没有超过两个N原子且没有超过两个C=O基团相邻;
W5为N或NR7;
W6为N或CR8;
Wa和Wb独立地为N或CR9;
Wc和Wd中的一个是N,另一个是O、NR10或S;
R1和R2独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;
R3和R4独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;或者R3和R4一起形成环状部分;
R5、R6、R7和R8独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;
R9为烷基或卤代;且
R10为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分。

26.  如权利要求25所述的方法,其中所述PI3-激酶α抑制剂是下式的化合物


27.  如权利要求26所述的方法,其中W2为CR4,且R4为芳基、杂芳基、杂环烷基或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分。

28.  如权利要求27所述的方法,其中R4进一步被烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″所取代,其中R′和R″与氮一起形成环状部分。

29.  如权利要求1-17、19和21中任一项所述的方法,其中所述PI3-激酶α抑制剂是下式的化合物:

或其药学上可接受的盐,其中:
X为O或S或N;
W1'为S、N、NR3'或CR3',W2'为N或CR4',W3'为S、N或CR5',W4'为N或C,且W7'为N或C,其中没有超过两个N原子且没有超过两个C=O基团相邻;
W5'为N或CR7';
W6'为N或CR8';
R1'和R2'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;
R3'和R4'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;或者R3'和R4'一起形成环状部分;且
R5'、R7'和R8'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分。

30.  如权利要求28所述的方法,其中所述PI3-激酶α抑制剂是下式的化合物:

其中
W1为S、N、NR3或CR3;W2为N或CR4;W3为S、N或CR5;W4为N或C,其中没有超过两个N原子且没有超过两个C=O基团相邻;
W5为N或CR7;
W6为N或CR8;
R1和R2独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、 酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;
R3和R4独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;或者R3和R4一起形成环状部分;且
R5、R7和R8独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分。

31.  如权利要求29所述的方法,其中所述化合物具有下式:

或其药学上可接受的盐,其中W1为S、N、NR3或CR3。

32.  如权利要求30所述的方法,其中W1为?#24314;CC(O)N(R)2的酰胺基,其中所述(R)2基团一起形成4元、5元、6元或7元环。

33.  如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述PI3-激酶α抑制剂和/或所述RTK抑制剂经肠胃外、口服、腹膜内、静脉内、动脉内、经皮、肌肉内、经脂质体、经由通过导管或支架局部递送、皮下、脂肪内或鞘内施用。

34.  如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述PI3-激酶α抑制剂和/或所述RTK抑制剂在同一制剂中共同施用?#20102;?#36848;受试者。

35.  如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述PI3-激酶α抑制剂和/或所述RTK抑制剂在不同的制剂中共同施用?#20102;?#36848;受试者。

36.  一种药物组合物,其包含一定量的PI3-激酶α抑制剂和一定量 的RTK抑制剂的组合,其中所述组合在有此需要的受试者中提供协同治疗效果。

37.  如权利要求36所述的药物组合物,其配制为口服剂型。

38.  如权利要求36所述的药物组合物,其中所述量中的至少一个以亚治疗量施用。

39.  如权利要求36所述的药物组合物,其配制为片剂或胶囊。

40.  如权利要求36所述的药物组合物,其中所述PI3-激酶α抑制剂和所述RTK抑制剂包装成单独的片剂。

41.  如权利要求36所述的药物组合物,其中所述PI3-激酶α抑制剂和所述RTK抑制剂配制为单一口服剂型。

42.  一?#22336;?#27861;,包括:(a)确定受试者中与由PI3-激酶?#20004;?#23548;的疾病状况相关的PI3-激酶α突变的存在;和(b)向所述受试者施用如权利要求36所述的药物组合物。

43.  如权利要求42所述的方法,其中所述突变在编码PI3-激酶α的核苷酸序列中。

44.  如权利要求42所述的方法,其中所述突变在PI3-激酶α的氨基酸序列中。

45.  如权利要求1-34所述的方法,其中所述受试者或细胞包含编码PI3-激酶α的核苷酸序列中的突变,该突变与由PI3-激酶?#20004;?#23548;的疾病状况相关。

46.  如权利要求1-11所述的方法,其中所述PI3-激酶α抑制剂以比其针对PI3-激酶γ或PI3-激酶δ的IC50?#26723;?#33267;少5倍的IC50值选择性抑制PI3-激酶α和PI3-激酶?#38534;?BR>
47.  如权利要求1-11所述的方法,其中所述PI3-激酶α抑制剂以比其针对PI3-激酶γ或PI3-激酶δ的IC50?#26723;?#33267;少50倍的IC50值选择性抑制PI3-激酶α和PI3-激酶?#38534;?BR>
48.  如权利要求1-11所述的方法,其中所述PI3-激酶α抑制剂以比其针对PI3-激酶γ或PI3-激酶δ的IC50?#26723;?#33267;少50倍的IC50值选择性抑制PI3-激酶α。

说明书

说明书激酶抑制剂的组合及其用途
相关申请的交叉引用
本申请要求2011年11月11日提交的名称为“Combination of Kinase Inhibitors and Uses Thereof”的美国临时专利申请号61/558,928的优?#28909;ǎ?#35813;临时申请出于所有目的通过引用整体并入本文。
背景?#38469;?
激酶信号传导途径在许多生物过程中发挥着核心作用。已发现在信号转导途径的各个组成部分中的缺陷引起大量的疾病,包括多种形式的癌症、炎性疾病、代谢紊乱、血管和神经元疾病(Gaestel等人,Current Medicinal Chemistry(2007)14:2214-2234)。近年来,与致癌信号传导途径有关的激酶已在治疗包括多种类型癌症在内的多种疾病方面成为重要的药物靶标。
受体酪氨酸激酶(RTK)是对多种多肽生长因子、细胞因子和激素具有高亲和力的一组细胞表面受体。RTK信号传导在诸如细胞生长、细胞存活、增殖、发育和?#21482;?#31561;过程中发挥作用。RTK信号传导的破坏可导致糖尿病及相关并发症、神经?#20302;?#30142;病如阿尔茨海默病、癌症、关节炎、炎性疾病如急性冠脉综合征,和自身免疫性疾病如多发性硬化。
已经基于同源性鉴定了大约20种不同类别的RTK,包括EGF受体家族(也称作ErbB家族)、胰?#26680;?#21463;体家族、PDGF受体家族、FGF受体家族、VEGF受体家族、HGF受体家族、Trk受体家族、Eph受体家族、AXL受体家族、LTK受体家族、TIE受体家族、ROR受体家族、DDR受体家族、RET受体家族、KLG受体家族、RYK受体家族和MuSK受体家族。RTK包含N端细胞外区域、包含催化激酶结构域的C端细胞内区域和跨膜结构域。N端区域包含配体结合区域。在结合至其配体之后,RTK变得具有催化活性并且可以自身磷酸化并激活下游信号分 子,包括PI3K和Ras。一些RTK作为单一的单体,而其他RTK形成二聚体或在配体结合后二聚化。
通常在疾病中失调的细胞功能中涉及的另一组激酶是磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-激酶或PI3K)家族的酶。这些脂质激酶将磷脂酰肌醇(PtdIns)的肌醇环的3-位羟基磷酸化,从而激活与诸如细胞生长、增殖、?#21482;?#36816;动性、存活和细胞内运输等过程相关的信号级联。这些涉及PI3K的过程的破坏会导致许多疾病,包括癌症、变应性接触性皮炎、类风湿关节炎、骨关节炎、炎性肠病、慢性阻塞性肺病、银?#30142; ?#22810;发性硬化症、哮喘、与糖尿病并发症有关的病症以及心血管?#20302;?#30340;炎性并发症如急性冠脉综合征。
PI3K家族包含15种具有不同的底物特异性、表达模式和调节模式的激酶。I类PI3K(p110α、p110?#38534;110δ和p110γ)通常被酪氨酸激酶或G蛋?#30528;剂?#21463;体激活从而产生磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸(PIP3),PIP3作用于下游效应物,如在Akt/PDK1途径中的效应物、mTOR、Tec家族激酶和Rho家族GTP酶。
I型PI3K的α同种型与多种人类癌症有关。已经证明,在内皮细胞迁移的控制中,血管发生选择性地需要PI3K的α同种型。(Graupera等人,Nature2008;453;662-6)。据认为,编码PI3Kα的基因中的突变或导致PI3Kα上调的突变发生于许多人类癌症如肺癌、胃癌、子宫内膜癌、卵巢癌、膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、脑癌和皮肤癌中。通常,编码PI3Kα的基因中的突变是在螺旋和激酶结构域中的几个热点内聚集的点突变,如E542K、E545K和H1047R。已经证明,许多这样的突变是致癌的功能获得性突变。虽然其他的PI3K同种型如PI3Kδ或PI3Kγ主要在造血细胞中表达,但是PI3Kα与PI3Kβ为组成型表达的。
尤其是,I类PI3K的δ同种型与许多疾病和生物过程有关。PI3Kδ主要在造血细胞中表达,这些细胞包括白细胞,如T-细胞、树突细胞、嗜中性粒细胞、肥大细胞、B细胞?#36884;奘上?#32990;。PI3Kδ整体地参与哺乳动物的免疫?#20302;?#21151;能,如T细胞功能、B细胞活化、肥大细胞活化、树突细胞的功能和嗜中性粒细胞的活性。由于其在免疫?#20302;?#21151;能中不可或 缺的作用,在与不希望的免疫?#20174;?#22914;变态?#20174;Α?#28814;性疾病、炎症介导的血管发生、类风湿关节炎、自身免疫性疾病如狼疮、哮喘、肺气肿和其他呼吸?#20302;?#30142;病有关的许多疾病中也涉及到PI3Kδ。在免疫?#20302;?#21151;能中涉及到的其他I类PI3K包括PI3Kγ,其在白细胞信号传导中发挥着作用,并与炎症、类风湿关节炎和诸如狼疮的自身免疫性疾病有关。
PI3Kβ主要与多种类型的癌症有关,包括PTEN-阴性癌症(Edgar等人,Cancer Research(2010)70(3):1164-1172)和过量表达HER2的癌症如乳腺癌和卵巢癌。
发明内容
由于RTK和PI3K的多样化的重要功能,以低特异性结合并抑制一系列激酶同种型?#36879;?#21512;物的药物会引起有害的副作用。例如,PI3K β的过度抑制可引起不希望的?#28304;?#35874;途径的作用和胰?#26680;?#20449;号传导的破坏。或者,PI3K δ和/或PI3K γ的过度抑制可破坏或?#26723;?#20813;疫功能。本公开内容提供了一种有效靶向疾病相关途径,同时限制不希望的副作用的备选方法。
因此,本发明提供了一种用于治疗受试者中与PI3-激酶α和/或受体酪氨酸激酶(RTK)相关的疾病状况的方法,包括同时或相继地向所述受试者施用治疗有效量的PI3-激酶α抑制剂和RTK抑制剂的组合,其中该PI3-激酶α抑制剂展示出通过体外激酶试验确定的、相对于一?#21482;?#22810;种I型磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-激酶)对PI3-激酶α的选择性抑制,其中该一?#21482;?#22810;种I型PI3-激酶选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ。一方面,该组合包含治疗有效量的PI3-激酶α抑制剂和治疗有效量的RTK抑制剂。另一方面,该组合包含协同有效治疗量的PI3-激酶α抑制剂和RTK抑制剂,其中该PI3-激酶α抑制剂和/或RTK抑制剂以亚治疗量存在。
在一些实施方案中,与PI3-激酶α和/或RTK相关的疾病状况可包括但不限于肿瘤病状、自身免疫性疾病、炎性疾病、?#23435;?#21270;疾病和肾病。例如,该肿瘤病状选自NSCLC、头颈部鳞状细胞癌、胰腺癌、乳腺 癌和卵巢癌、肾细胞癌、前列腺癌、神经内分泌癌和子宫内膜癌。
本发明进一步提供了一种抑制细胞中Akt(S473)的磷酸化的方法,包括使细胞与有效量的PI3-激酶α抑制剂和受体酪氨酸激酶(RTK)抑制剂接触,如通过基于细胞的试验或体外激酶试验所确定的,该受体酪氨酸激酶(RTK)抑制剂相对于一?#21482;?#22810;种I型磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-激酶)选择性抑制I类RTK的活性,其中该PI3-激酶α抑制剂展示出通过体外激酶试验确定的、相对于一?#21482;?#22810;种I型磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-激酶)对PI3-激酶α的选择性抑制,其中该一?#21482;?#22810;种I型PI3-激酶选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ。在一些实施方案中,该PI3-激酶α抑制剂相对于由PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ组成的所有其他I型磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-激酶)选择性抑制PI3-激酶α。
例如,如在体外激酶试验中所确定的,在本发明方法中使用的PI3-激酶α抑制剂可以约500nM或更低、400nM或更低、300nM或更低、200nM或更低、100nM或更低、50nM或更低、30nM或更低、20nM或更低、10nM或更低、1nM或更低的IC50值抑制PI3-激酶α。在另一种情况下,PI3-激酶α抑制剂选择性抑制PI3-激酶?#31890;?#20854;IC50值比其针对选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的一种、两种、三?#21482;?#25152;有其他I型PI3-激酶的IC50?#26723;?#33267;少2、5、10、50、100、1000倍。在一些实施方案中,PI3-激酶α抑制剂以小于约200nM的IC50值选择性抑制PI3-激酶?#31890;?#19988;所述IC50值比其针对选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的所有其他I型PI3-激酶的IC50?#26723;?#33267;少2、5或10倍。
在一些实施方案中,PI3-激酶α抑制剂以比其针对PI3-激酶γ或PI3-激酶δ的IC50?#26723;?#33267;少5倍的IC50值选择性抑制PI3-激酶α和/或PI3-激酶?#38534;?#22312;其他实施方案中,PI3-激酶α抑制剂以比其针对PI3-激酶γ或PI3-激酶δ的IC50?#26723;?#33267;少50倍的IC50值选择性抑制PI3-激酶α和/或PI3-激酶?#38534;?#22312;其他实施方案中,PI3-激酶α抑制剂以比其针对PI3-激酶γ或PI3-激酶δ的IC50?#26723;?#33267;少50倍的IC50值选择性抑制PI3-激酶α。
在一些实施方案中,RTK抑制剂结合并直接抑制HER2或EGFR。 例如,如在体外激酶试验中所确定的,本发明方法中使用的RTK抑制剂可以约500nM或更低、400nM或更低、300nM或更低、200nM或更低、100nM或更低、50nM或更低、30nM或更低、20nM或更低、10nM或更低、1nM或更低的IC50值抑制HER2或EGFR。在一些实施方案中,如在体外激酶试验中所确定的,RTK抑制剂以约50nM或更低的IC50值选择性抑制HER2或EGFR,并且该RTK抑制剂对一?#21482;?#22810;种选自PI3-激酶α、PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的I型PI3-激酶基本上无活性。在另一实施方案中,如在体外激酶试验中所确定的,RTK抑制剂以约20nM或更低的IC50值抑制靶RTK,并且RTK抑制剂对一?#21482;?#22810;种选自PI3-激酶α、PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的I型PI3-激酶基本上无活性。或者,如在体外激酶试验中所确定的,RTK抑制剂以约100nM或更低的IC50值抑制靶RTK,并且该IC50值比其针对选自PI3-激酶α、PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的所有I型PI3-激酶低2、5或10倍。
在一些实施方案中,RTK抑制剂选择性抑制HER2、EGFR或HER2和EGFR两者。RTK抑制剂可以是拉帕替尼、曲妥珠单抗、埃罗替尼、吉非替尼、凡他尼布或其类似物。
在一些实施方案中,PI3-激酶α抑制剂是下式的化合物:

或其药学上可接受的盐,其中:
W1'为N、NR3'或CR3';W2'为N、NR4'、CR4'或C=O;W3'为N、NR5'或CR5';W4'为N,其中没有超过两个N原子且没有超过两个C=O基团相邻;
W5'为N;
W6'为N或CR8';
Wa'和Wb'独立地为N或CR9';
Wc'和Wd'中的一个为N,而另一个为O、NR10'或S;
R1'和R2'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;
R3'和R4'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;或者R3'和R4'一起形成环状部分;
R5'、R6'、R7'和R8'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;
R9'为氢、烷基或卤代;且
R10'为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分。
在其他实施方案中,PI3-激酶α抑制剂为下式的化合物:

或其药学上可接受的盐,其中:
X为O或S或N;
W1'为S、N、NR3'或CR3',W2'为N或CR4',W3'为S、N或CR5',W4'为N或C,且W7'为N或C,其中没有超过两个N原子且没有超过两个C=O基团相邻;
W5'为N或CR7';
W6'为N或CR8';
R1'和R2'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;
R3'和R4'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;或者R3'和R4'一起形成环状部分;且
R5'、R7'和R8'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分。
对于本发明的任何方法,PI3-激酶α抑制剂和/或RTK抑制剂经肠胃外、口服、腹膜内、静脉内、动脉内、经皮、肌肉内、经脂质体、经由导管或支架局部递送、皮下、脂肪内(intraadiposally)或鞘内施用。在一些实施方案中,PI3-激酶α抑制剂和/或RTK抑制剂在同一制剂中共同施用至受试者。在其他实施方案中,PI3-激酶α抑制剂和/或RTK抑制剂在不同制剂中共同施用至受试者。
本发明?#22266;?#20379;了一种药物组合物,其包含一定量的PI3-激酶α抑 制剂和一定量的RTK抑制剂的组合,其中所述组合在有此需要的受试者中提供协同治疗效果。例如,该药物组合物配制为口服剂量。在一些实施方案中,这些量中的至少一个以亚治疗量施用。在一些实施方案中,药物组合物配制成片剂或胶囊。例如,PI3-激酶α抑制剂和RTK抑制剂包装成单独的片剂。在其他实施方案中,PI3-激酶α抑制剂和RTK抑制剂配制成单一口服剂型。
本发明?#22266;?#20379;了一?#22336;?#27861;,其包括:(a)确定受试者中与由PI3-激酶?#20004;?#23548;的疾病状况相关的PI3-激酶α突变的存在;和(b)向所述受试者施用本发明的药物组合物。例如,该突变可以在编码PI3-激酶α的核苷酸序列中。示例性的突变可包括但不限于缺失、插入、平移(translation),其可导?#21348;?#30721;PI3-激酶α的核酸序列的点突变、移码和/或平移。在另一实例中,该突变在PI3-激酶α的氨基酸序列中。
在本发明任何方法的一些实施方案中,受试者或细胞包含与由PI3-激酶?#20004;?#23548;的疾病状况相关的编码PI3-激酶α的核苷酸序列中的突变。
援引并入
本说明书中提到的所有出版物、专利和专利申请均通过引用而以相同程度并入本文,犹如特别地?#19994;?#29420;地指出每个单独的出版物、专利和专利申请通过引用而并入。
附图说明
本发明的新特征在随附的权利要求中具体阐述。通过参?#23478;?#19979;对在其中利用到本发明原理的示例说明性实施方案加以阐述的详细描述?#36879;?#22270;,将会获得对本发明的特征和优点更好的理解,在附图中:
图1为在人类癌症中激活的多种不同信号传导途径的示意图。
图2为显示在临床前乳腺癌模型中用PI3-激酶α抑制剂(化合物A)和EGFR抑制剂(拉帕替尼或曲妥珠单抗)联合治疗?#36816;?#23567;肿瘤体积的协同效应的图。
图3为显示化合物A和拉帕替尼联合治疗在下调Akt、S6和4EBP1磷酸化以及增加凋亡方面的协同效应的Western印迹。
图4为显示化合物A和拉帕替尼联合治疗对激酶活性和凋亡诱导方面的协同效应的图。
图5为显示全-PI3K抑制剂,而不是化合物A,在体内阻断B细胞功能的图。小鼠用TNP-Ficoll免疫并用1)载体;2)70mg/kg GDC0941;3)30mg/kg化合物A;4)60mg/kg化合物A;或5)120mg/kg化合物A处理7天。抗体的产生被测量为相对于经载体处理的对照组的百分比。
图6在左图中示出了显示使用70mg/kg全-PI3K抑制剂和60mg/kg化合物A,乳腺癌模型的肿瘤重量减少的图,并在右图中示出了对于70mg/kg全-PI3K抑制剂相比60mg/kg化合物A,小鼠脾脏中MZB细胞的存在量减少的图。
图7?#38469;?#20102;在各种人类癌症中PI3Kα突变的频率。
图8为显示在具有升高的PI3Kα活性的细胞系中,化合物A对PI3K途径的抑制的Western印迹。左列示出了来?#28304;?#26377;PIK3CA突变的MDA-MB-361乳腺癌细胞的数据。中间列示出了来?#28304;?#26377;PIK3CA突变的MDA-MB-453乳腺癌细胞的数据。右列示出了来?#28304;?#26377;HER2突变的SKBr3乳腺癌细胞的数据。
图9示出了A)显示化合物A对Akt在丝氨酸473处磷酸化的抑制的Western印迹;和B)在PTEN突变细胞系中化合物A对Akt在丝氨酸473处磷酸化的抑制的?#26723;汀?
图10为显示化合物A优先抑制带有PI3Kα突变的肿瘤细胞的增殖的图表。
发明详述
本发明的几个方面参考用于说明的示例应用描述如下。应?#32654;?#35299;,为了提供对本发明的全面理解,阐述了大量具体细节、关系和方法。然而,相关领域普通?#38469;?#20154;员将会容易地认识到,可在没有一项或多项所述具体细节的情况下,或使用其他方法来实施本发明。本发明不受所述 的动作或事件顺序的限制,因为一些动作可以不同顺序发生和/或与其他动作或事件同时发生。此外,不是全部所述的动作或事件?#38469;鞘?#26045;本发明的方法所需的。
本文使用的术语仅是为了描述特定实施方?#31119;?#32780;并?#19988;?#22312;限制本发明。如本文使用的单数形式“一种?#34180;ⅰ?#19968;个”及“该?#24065;?#24847;在包括复数形式,除非上下文明确另有指明。此外,就术语“包括?#34180;ⅰ?#21253;含?#34180;ⅰ?#20855;有?#34180;ⅰ?#21547;有”或其变化形式在发明详述和/或权利要求中使用来说,这些术语意在以与术语“包含”类似的方式涵盖在内。
术语“?#32908;?#25110;“大?#32908;?#26159;指在本领域普通?#38469;?#20154;员测定的特定值的可接受误差?#27573;?#20869;,其将部分?#35272;?#20110;该值是如何测量或确定的,即测量?#20302;?#30340;局限性。例如,根据本领域中的?#23548;霸肌?#21487;指在1个或大于1个标?#30142;?#20043;内。或者,“?#32908;?#21487;指给定值的多达20%,优选地多达10%,更优选地多达5%,以及更优选地多达1%的?#27573;А?#25110;者,尤其是对于生物?#20302;?#25110;过程,该术语可指在一个值的数量级之内,优选地在5倍以内,更优选地在2倍以内。当特定值在本申请和权利要求中描述时,除非另有说明,应假设术语“?#32908;币?#25351;在特定值的可接受误差?#27573;?#20869;。
如本文使用的术语“治疗(treatment)?#34180;ⅰ?#27835;疗(treating)?#34180;ⅰ?#32531;解”和?#26696;?#21892;”可互换使用。这些术语是指用于获得有益的或预期的效果(包括但不限于治疗益处和/或预?#37226;?#22788;)的方法。治疗益处意指根除或改善所治疗的基础病症。此外,治疗益处?#37096;?#36890;过根除或改善与基础病症相关的一?#21482;?#22810;种生理症状而实?#37073;?#20174;而在患者中观察到改善,即使?#27809;?#32773;可能仍然受到该基础病症的折磨。对于预?#37226;?#22788;,可将组合物施?#37238;?#22788;于特定疾病发展风险中的患者,或报告?#24605;?#30149;的一?#21482;?#22810;种生理症状的患者,即使可能尚未作出对该疾病的诊断。
如本文使用的术语“肿瘤病状”是指具有诸如不受控制的增殖、无限增殖性、转移潜能、快速生长和增殖速率、紊乱的致癌信号传导和某些特有的形态特征等异常生长特征的细胞的存在。这包括以下细胞的异常生长:(1)通过表达突变的酪氨酸激酶或过度表达受体酪氨酸激酶而增殖的肿瘤细胞(肿瘤);(2)发生异常酪氨酸激酶激活的其他增殖性疾病的 良性和恶性细胞;(3)通过受体酪氨酸激酶而增殖的任何肿瘤;(4)通过异常丝氨酸/苏氨酸激酶激活而增殖的任何肿瘤;和(5)发生异常丝氨酸/苏氨酸激酶激活的其他增殖性疾病的良性和恶性细胞。
术语“有效量”或“治疗有效量”是指足以实现如以下定义的预期应用(包括但不限于疾病治疗)的本文所述抑制剂的量。治疗有效量可根据预期应用(体外或体内),或正在接受治疗的受试者和疾病状况,例如受试者的体重和年龄、疾病状况的?#29616;?#31243;度、给药方式等而变化,其可以由本领域普通?#38469;?#20154;?#27604;?#26131;地确定。该术语也适用于将在靶细胞中诱导特定响应(例如,增殖的减少或?#26800;?#30333;活性的下调)的剂量。具体的剂量将根据所选择的特定化合物、将要遵循的给药方案、是否与其他化合物联合施用、施用时机、所施用的组织以及运载它的物理递送?#20302;?#32780;变化。
药剂或?#21697;?#30340;“亚治疗量”为小于该药剂或?#21697;?#30340;有效量的量,但是当与有效量或亚治疗量的另一药剂或?#21697;?#32852;用时,会由于例如在产生的有效效果或?#26723;?#30340;副作用中的协同作用而产生医师所期望的结果。
药剂或?#21697;?#30340;“协同有效治疗量”是这样的量,当与有效量或亚治疗量的另一药剂或?#21697;?#32852;用时,其产生比两种药剂或?#21697;?#21333;独使用?#22791;?#22909;的效果。在一些实施方案中,协同有效治疗量的药剂或?#21697;?#22312;联合使用时产生比两种药剂或?#21697;?#20013;的每一种单独使用时的叠?#26377;?#24212;更好的效果。
如本文所用的“药剂”或“生物活性剂”是指生物学、药学或化学化合物或其他部分。非限制性实例包括简单或复杂的有机分子或无机分子、肽、蛋白质、寡核苷酸、抗体、抗体衍生物、抗体片段、维生素衍生物、碳水化合物、毒素或化学治疗化合物。可以合成各?#21482;?#21512;物,例如,小分子和?#36884;?#29289;(例如,寡肽和寡核苷酸)以及基于各种核心结构的合成的有机化合物。此外,各种天然来源?#37096;?#20197;提供化合物以供筛选,如植物或动物提取物?#21462;?#29087;练的?#38469;?#20154;员可以容易地认识到,对本发明的药剂的结构性质没有限制。
如本文所用的术语“激动剂”是指具有通过抑制?#26800;?#30333;的活性或表达而引发或增强?#26800;?#30333;的生物学功能的能力的化合物。因此,术语“激动 剂”是在靶多肽的生物学作用的背景下定义的。虽然本文优选的激动剂与靶标特异性地相互作用(例如,结合),但通过与靶多肽是其成员的信号转导途径的其他成员相互作用而引发或增强靶多肽的生物活性的化合物也明确包括在该定义中。
术语“拮抗剂”和“抑制剂”可互换使用,且它们是指具有通过抑制?#26800;?#30333;的活性或表达而抑制?#26800;?#30333;的生物学功能的能力的化合物。因此,术语“拮抗剂”和“抑制剂”是在?#26800;?#30333;的生物学作用的背景下定义的。虽然本文优选的拮抗剂与靶标特异性地相互作用(例如,结合),但通过与?#26800;鞍资?#20854;成员的信号转导途径的其他成员相互作用而抑制?#26800;?#30333;的生物活性的化合物也明确包括在该定义中。由拮抗剂抑制的优选的生物活性与肿瘤的发展、生长或扩散或在自身免疫性疾病中显现的不期望的免疫应答相关。抑制剂可包括但不限于多肽、抗体、小分子、碳水化合物、核酸?#36879;?#31181;药物。RTK抑制剂是指受体酪氨酸激酶的任意组合的抑制剂,该受体酪氨酸激酶包括但不限于单一的RTK、一类RTK或其任意组合。“靶RTK”是指被RTK抑制剂抑制的RTK。
“抗癌剂?#34180;ⅰ?#25239;肿瘤剂”或“化学治疗剂”是指任何在肿瘤病状的治疗中有用的药剂。一类抗癌剂包括化学治疗剂。“化学治疗”是指通过各?#22336;?#27861;,包括静脉内、口服、肌肉内、腹膜内、膀胱内、皮下、经皮、经口腔或吸入方式或?#36816;?#21058;的形式,对癌症患者施用一?#21482;?#22810;?#21482;?#23398;治疗药物和/或其他药剂。
术语“细胞增殖”是指细胞数目由于分裂而发生改变的现象。该术语还包括这样的细胞生长,通过这种细胞生长,细胞的形态发生与增殖信号一致的变化(例如,尺寸增大)。
术语“共同施用?#34180;ⅰ?#32852;合施用”及其语法等同表达包括对动物施用两?#21482;?#26356;多种药剂,使得这两种药剂和/或它们的代谢物同时存在于动物内。共同施用包括在分开的组合物中同时施用、在分开的组合物中在不同时间施用,或在存在这两种药剂的组合物中施用。共同施用的药剂可以在同一制剂中。共同施用的药剂?#37096;?#20197;在不同的制剂中。
如本文所用的“治疗效果”包括如上所述的治疗益处和/或预?#37226;?处。预防效果包括延缓或消除疾病或病状的出?#37073;?#24310;缓或消除疾病或病状的症状的发作,减慢、停止或逆转疾病或病状的进展,或其任意组合。
术语“药学上可接受的盐”是指由本领域公知的多种有机和无机的抗衡?#33009;友?#29983;的盐。药学上可接受的酸加成盐可以利用无机酸和有机酸形成。可由其衍生出盐的无机酸包括,例如,盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸?#21462;?#21487;由其衍生出盐的有机酸包括,例如,乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、?#19968;?#37240;、对甲苯磺酸、水杨酸?#21462;?#33647;学上可接受的碱加成盐可利用无机碱和有机碱形成。可由其衍生出盐的无机碱包括,例如,钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰、铝?#21462;?#21487;由其衍生出盐的有机碱包括,例如,伯胺、仲胺和叔胺、包括天然存在的取代胺在内的取代胺、环胺、碱性?#33009;?#20132;换树脂等,特别是例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺和乙?#21450;貳?#22312;一些实施方案中,药学上可接受的碱加成盐选自铵、钾、钠、钙和镁盐。
“药学上可接受的载体”或“药学上可接受的赋形剂”包括任何及所有溶剂、分散介质、涂料、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂?#21462;?#36825;些介质和药剂在药物活性物质中的应用在本领域中是众所周知的。除了任何常规介质或试剂与活性成分不相容的情况以外,考虑将其用于本发明的治疗组合物中。补充的活性成分?#37096;?#24341;入组合物中。
“信号转?#32908;?#26159;这样一个过程,在?#20284;?#38388;,刺激性或抑制性信号被传送?#26009;?#32990;内以引起细胞内?#20174;Α?#20449;号转导途径的调节物是指调节属于同一特定信号转导途径的一?#21482;?#22810;种细胞蛋白质的活性的化合物。调节物可增大(激动剂)或抑制(拮抗剂)信号分子的活性。
术语“选择性抑制”或“选择性地抑制”当应用于生物活性剂时,是指与脱靶(off-target)信号传导活性相比,药剂通过与靶标的直接或交互相互作用而选择性地?#26723;?#38774;标信号传导活性的能力。
“受试者”是指动物,例如哺乳动物,例如人。本文所述的方法在人类治疗、临床前和兽?#25509;?#29992;中都可能是有用的。在一些实施方案中,受试者是哺乳动物,而在一些实施方案中,受试者是人。
术语“体内”是指发生于受试者体内的事件。
术语“体外”是指发生于受试者体外的事件。例如,体外试验包括任何在受试者体外运行的试验。体外试验包括基于细胞的试验,其中采用活细胞或死细胞。体外试验还包括其中未采用完整细胞的无细胞试验。
当在本文中针对诸如分子量的物理性质或诸如化学式的化学性质使用?#27573;?#26102;,旨在包括?#27573;?#30340;所有组合及子组合和其中特定的实施方案。当术语“?#32908;?#25351;数?#21482;?#25968;值?#27573;?#26102;,意指所提及的数?#21482;?#25968;值?#27573;?#20026;在实验变异性内(或在统计实验误差之内)的近似值,且因此该数?#21482;?#25968;值?#27573;?#21487;在例如所述数?#21482;?#25968;值?#27573;?#30340;1%至15%之间变化。术语“包含”(和相关的术语,如“包含”或“含有”或“具有”或“包括”)包括由所述特征“组成”或“基本上由其组成”的那些实施方?#31119;?#20363;如,物质、组合物、方法或过程等的任意组合的实施方案。
以?#28388;?#20889;和术语在全文中具有所示的含义:PI3K=磷脂酰肌醇3-激酶;PI=磷脂酰肌醇;RTK=受体酪氨酸激酶;EGFR=表皮生长因子受体;HER2=人表皮生长因子受体2。
除非另有说明,化合物名称部分的连接位于所述部分的最?#20063;唷?#21363;,取代基的名称以末端部?#21046;鶚迹?#20197;任何连接部分继续,且以连接部分终止。例如,杂芳基硫代C1-4烷基具有通过硫代基的硫与C1-4烷基相连的杂芳基,该C1-4烷基与带有该取代基的化学物种相连。?#24065;?#20363;如“-L-C1-10烷基-C3-8环烷基”的通式表示时,这种情况不适用。在这种情况下,末端基团为连接在连接部分C1-10烷基上的C3-8环烷基基团,连接部分C1-10烷基连接在元件L上,L本身连接在带有该取代基的化学物种上。
“烷基”是指直链或支?#21050;?#38142;基团,其仅由碳原子和氢原子组成,不含不饱和性,具有1至10个碳原子(例如,C1-C10烷基)。当其出现在本文中时,诸如“1至10”的数值?#27573;?#26159;指在?#37238;?#23450;?#27573;?#20869;的每个整数;例如,“1至10个碳原子”是指该烷基可以由1个碳原子、2个碳原子、3碳原子等一直到10个碳原子(并包括10个碳原子)组成,虽然本定义也涵盖其中没有指定数值?#27573;?#30340;术语“烷基”的存在。在一些实施方案中, 其为C1-C4烷基。典型的烷基包括,但绝不限于,甲基、?#19968;?#19993;基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、己基、庚基(septyl)、辛基、壬基、癸基?#21462;?#28919;基通过单键连接到?#26757;肿?#30340;其余部分,例如,甲基(Me)、?#19968;?Et)、正丙基、1-甲基?#19968;?异丙基)、正丁基、正戊基、1,1-二甲基?#19968;?叔丁基)、3-甲基己基、2-甲基己基?#21462;?#38500;非在本说明书中另有特别说明,烷基任选地被一个或多个取代基取代,该取代基独立地为?#21644;?#22522;、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、羟基、卤代、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-OC(O)N(Ra)2、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(NRa)N(Ra)2、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)或PO3(Ra)2,其中每个Ra独立地为氢、烷基、氟烷基、碳环基、碳环基烷基、芳基、芳烷基、杂环烷基、杂环烷基烷基、杂芳基或杂芳基烷基。
术语“卤代”或“卤素”是指氟、?#21462;?#28340;或碘。
术语“卤代烷基”是指被一个或多个卤代基团取代的烷基,例如,氯甲基、2-溴甲基、3-碘丙基、三氟甲基、全氟丙基、8-?#28909;?#22522;?#21462;?
“酰基”是指(烷基)-C(O)-、(芳基)-C(O)-、(杂芳基)-C(O)-、(杂烷基)-C(O)-和(杂环烷基)-C(O)-基团,其中该基团通过羰基官能?#24085;又?#27597;体结构。在一些实施方案中,其为C1-C10的酰基,是指酰氧基的烷基、芳基、杂芳基或杂环烷基部分的链或环原子加上酰基的羰基碳的总数,即3个其他环或链原子加上羰基。如果R基团是杂芳基或杂环烷基,杂环或链原子?#24067;?#31639;在链或环原子的总数内。除非在本说明书中另有特别说明,酰氧基的“R”任选地被一个或多个取代基取代,该取代基独立地为?#21644;?#22522;、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、羟基、卤代、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-OC(O)N(Ra)2、-C(O) N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)C(O)N(Ra)2、N(Ra)C(NRa)N(Ra)2、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)或PO3(Ra)2,其中每个Ra独立地为氢、烷基、氟烷基、碳环基、碳环基烷基、芳基、芳烷基、杂环烷基、杂环烷基烷基、杂芳基或杂芳基烷基。
“环烷基”是?#38468;?#21253;含碳和氢的单环或多环基团,并且可以是饱和的或部分不饱和的。环烷基包括具有3至10个环原子的基团(即,C2-C10环烷基)。每当其在本文中出现时,诸如“3至10”的数值?#27573;?#26159;指在?#37238;?#23450;?#27573;?#20869;的每个整数;例如,“3至10个碳原子?#24065;?#21619;着?#27809;?#28919;基可由3个碳原子等一直到10个碳原子(并包括10个碳原子)组成。在一些实施方案中,其为C3-C8环烷基。在一些实施方案中,其为C3-C5环烷基。环烷基的示例性实例包括,但不限于下列部分:环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环?#21512;?#22522;、环庚基(cycloseptyl)、环辛基、环壬基、环癸基、降冰片基?#21462;?#38500;非在本说明书中另有特别说明,环烷基任选地被一个或多个取代基取代,该取代基独立地为?#21644;?#22522;、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、羟基、卤代、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-OC(O)N(Ra)2、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)C(O)N(Ra)2、N(Ra)C(NRa)N(Ra)2、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)或PO3(Ra)2,其中每个Ra独立地为氢、烷基、氟烷基、碳环基、碳环基烷基、芳基、芳烷基、杂环烷基、杂环烷基烷基、杂芳基或杂芳基烷基。
术语“C1-10烷基-C3-8环烷基”用来描述连?#21448;?#21547;有3-8个碳的环烷基连接基团上的含有1-10个碳原子的支链或直链烷基,例如2-甲基环丙基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“双环烷基”是指由具有两个或更多个共用原子的两个未取代或取代的环烷基部分组成的结构。如果环烷基部分恰好有两个共用原子,则它们被称为“稠合的?#34180;?#23454;例包括但不限于双环[3.1.0]己基、全氢 萘基?#21462;?#22914;果环烷基部分具有超过两个共用原子,则它们被称为“桥接的?#34180;?#23454;例包括但不限于双环[3.2.1]庚基(“降冰片基”)、双环[2.2.2]辛基?#21462;?
如本文使用的术语“杂原子”或“环杂原子?#24065;?#25351;包括氧(O)、氮(N)、硫(S)、磷(P)和硅(Si)。
“杂烷基?#34180;ⅰ?#26434;烯基”和“杂炔基”包括任选取代的烷基、烯基和炔基,且其具有一个或多个选自除?#23478;?#22806;的原子(例如,氧、氮、硫、磷或其组合)的骨架链原子。可以给出数值?#27573;В?#20363;如,C1-C4杂烷基,它是指总的链长,在本例中为4个原子长。例如,-CH2OCH2CH3基团被称为“C4”杂烷基,其在原子链长度描述中包括杂原子中心。可通过在杂烷基链中的杂原子或?#21058;又粮梅肿?#30340;其余部分。杂烷基可被一个或多个取代基取代,该取代基独立地为?#21644;?#22522;、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、羟基、卤代、氰基、硝基、氧代、硫基(thioxo)、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)或PO3(Ra)2,其中每个Ra独立地为氢、烷基、氟烷基、碳环基、碳环基烷基、芳基、芳烷基、杂环烷基、杂环烷基烷基、杂芳基或杂芳基烷基。
术语“杂烷基芳基”是指连?#21448;?#33459;基的如上定义的杂烷基基团,且可以在端点连接或通过杂烷基的支链部分连接,例如苄氧基甲基部分。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂烷基杂芳基”同样是指连?#21448;?#26434;芳基部分的杂烷基,例如乙氧基甲基吡啶基。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂烷基-杂环基”是指连?#21448;?#26434;环基的如上定义的杂烷基,例如4(3-?#21271;?#22522;)-N-哌嗪基。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂烷基-C3-8环烷基”是指连?#21448;?#21547;有3-8个碳的环状烷基的如上定义的杂烷基,例如1-氨丁基-4-环己基。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂双环烷基”是指未取代的或取代的双环烷基结构,其中至 少一个碳原子被独立地选自氧、氮和硫的杂原子所代替。
术语“杂螺烷基”是指未取代的或取代的螺烷基结构,其中至少一个碳原子被独立地选自氧、氮和硫的杂原子所代替。
“烯烃”部分是指由至少两个碳原子和至少一个碳-碳双键组成的基团,而“炔烃”部分是指由至少两个碳原子和至少一个碳-碳叁键组成的基团。饱和或不饱和的烷基部分均可以是支?#30784;?#30452;链或环状的。
“烯基”是?#38468;?#30001;碳原子和氢原子组成的直链或支?#21050;?#38142;基团,其含有至少一个双键,并具有2至10个碳原子(即,C2-C10烯基)。每当其在本文中出现时,诸如“2至10”的数值?#27573;?#26159;指在?#37238;?#23450;?#27573;?#20869;的每个整数;例如,“2至10个碳原子?#24065;?#21619;着该烯基可以由2个碳原子、3个碳原子等一直到10个碳原子(并包括10个碳原子)组成。在某些实施方案中,烯基包含2至8个碳原子。在其他实施方案中,烯基包含2至5个碳原子(例如,C2-C5烯基)。烯基通过单键连接到?#26757;肿?#30340;其余部分,例如,?#25105;一?即,乙烯基)、丙-1-烯基(即,烯丙基)、丁-1-烯基、戊-1-烯基、戊-1,4-二烯基?#21462;?#38500;非在本说明书中另有特别说明,烯基任选地被一个或多个取代基取代,该取代基独立地为?#21644;?#22522;、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、羟基、卤代、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-OC(O)N(Ra)2、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)C(O)N(Ra)2、N(Ra)C(NRa)N(Ra)2、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)或PO3(Ra)2,其中每个Ra独立地为氢、烷基、氟烷基、碳环基、碳环基烷基、芳基、芳烷基、杂环烷基、杂环烷基烷基、杂芳基或杂芳基烷基。
术语“C2-10烯基-杂烷基”是指具有连?#21448;?#26434;烷基连接基团的烯基部分的基团,该烯基部分含有2-10个碳原子且为支链或直链,例如,烯丙氧基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“C2-10炔基-杂烷基”是指具有连?#21448;?#26434;烷基连接基团的炔基部分的基团,该炔基部分是未取代的或取代的、含有2-10个碳原子且为支 链或直链,例如,4-丁-1-炔氧基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“卤代烯基“是指被一个或多个卤代基团取代的烯基。
除非另有说明,术语“环烯基“是指任选地被烷基、羟基和卤素取代的、具有1个或2个烯键的环状脂肪族3-8元?#26041;?#26500;,如甲基环丙烯基、三氟甲基环丙烯基、环戊烯基、环?#21512;?#22522;、1,4-环己二烯基?#21462;?
“炔基”是?#38468;?#30001;碳和氢原子组成的直链或支?#21050;?#38142;基团,其含有至少一个叁键,具有2至10个碳原子(即,C2-C10炔基)。每当其在本文中出现时,诸如“2至10”的数值?#27573;?#26159;指在?#37238;?#23450;?#27573;?#20869;的每个整数;例如,“2至10个碳原子?#24065;?#21619;着该炔基可由2个碳原子、3个碳原子等一直到10个碳原子(并包括10个碳原子)组成。在某些实施方案中,炔基包含2至8个碳原子。在其他实施方案中,烯基具有2至5个碳原子(例如,C2-C5炔基)。炔基通过单键连接到?#26757;肿?#30340;其余部分,例如,?#33008;?#22522;、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基?#21462;?#38500;非在本说明书中另有特别说明,炔基任选地被一个或多个取代基取代,该取代基独立地为?#21644;?#22522;、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、羟基、卤代、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-OC(O)N(Ra)2、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)C(O)N(Ra)2、N(Ra)C(NRa)N(Ra)2、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)或PO3(Ra)2,其中每个Ra独立地为氢、烷基、氟烷基、碳环基、碳环基烷基、芳基、芳烷基、杂环烷基、杂环烷基烷基、杂芳基或杂芳基烷基。
术语C2-10炔基-C3-8环烷基是指含有连?#21448;?#21547;有3-8个碳的环烷基连接基团上的、含有2-10个碳的支链或直链炔基的基团,例如3-丙-3-炔基-环戊-1-基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“卤代炔基”是指被一个或多个独立的卤素基团所取代的炔基。
“氨基”或“胺”是指-N(Ra)2基团,其中每个Ra独立地为氢、烷基、氟烷基、碳环基、碳环基烷基、芳基、芳烷基、杂环烷基、杂环烷基烷基、杂芳基或杂芳基烷基,除非在本说明书中另有特别说明。当-N(Ra)2基团具有2个非氢的Ra时,它们可以与氮原子一起形成4元环、5元环、6元环或7元环。例如,-N(Ra)2意指包括但不限于,1-?#37327;?#28919;基和4-吗啉基。除非在本说明书中另有特别说明,氨基任选地被一个或多个取代基取代,该取代基独立地为?#21644;?#22522;、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、羟基、卤代、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-OC(O)N(Ra)2、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)C(O)N(Ra)2、N(Ra)C(NRa)N(Ra)2、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)或PO3(Ra)2,其中每个Ra独立地为氢、烷基、氟烷基、碳环基、碳环基烷基、芳基、芳烷基、杂环烷基、杂环烷基烷基、杂芳基或杂芳基烷基,且这些部分中的每一个均可任选地如本文所述取代。
“酰胺”或“酰氨基”是指具有式-C(O)N(R)2或-NHC(O)R的化学部分,其中R选自氢、烷基、环烷基、芳基、杂芳基(通过环碳键合)和?#21448;?#29615;(通过环碳键合),其中每个部分本身可任选地被取代。在一些实施方案中,其为C1-C4酰氨基或酰胺基团,其在该基团的碳总数中包括酰胺的羰基。酰?#20998;?N(R)2上的R2'可以任选地与其所连接的氮一起形成4元环、5元环、6元环或7元环。除非在本说明书中另有特别说明,酰氨基可任选地被本文针对烷基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环烷基所述的一个或多个取代基独立地取代。酰胺可以是连接到式(I)的化合物上从而形成前药的氨基酸或肽分子。可以对本文所述的化合物上的任何胺、羟基或羧基侧链进行酰胺化。制备此类酰胺的过程和特定的基团是本领域?#38469;?#20154;员公知的,并可以容易地在参考文献来源中?#19994;劍?#22914;Greene和Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis,第3版,John Wiley & Sons,New York,N.Y.,1999,其通过引用整体并入本文。
“芳香基”或“芳基”是指具有6至10个环原子的芳香基团(例如,C6-C10芳香基或C6-C10芳基),其含有至少一个具有?#26597;瞀械?#23376;体系的环,?#27809;?#20026;碳环(例如,苯基、芴基和萘基)。由取代的苯衍生物形成并在环原子上具有自由价的二价基团被命名为取代的亚苯基。通过从具有自由价的碳原子上除去一个氢原子,而?#29992;?#31216;以“基”结尾的单价多环烃基衍生而来的二价基团,通过在相应的单价基团的名称前加上“亚?#20493;?#21629;名,例如,具有两个连接点的萘基被称为亚萘基。每当其在本文中出现时,诸如“6至10”的数值?#27573;?#26159;指在?#37238;?#23450;?#27573;?#20869;的每个整数;例如,“6至10个环原子?#24065;?#21619;着?#26757;?#22522;可由6个环原子、7个环原子等一直到10个环原子(并包括10个环原子)组成。该术语包括单环或稠环多环(即,共用相邻环原子对的环)基团。除非在本说明书中另有特别说明,芳基部分任选地被一个或多个取代基取代,该取代基独立地为?#21644;?#22522;、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、羟基、卤代、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-OC(O)N(Ra)2、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)C(O)N(Ra)2、N(Ra)C(NRa)N(Ra)2、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)或PO3(Ra)2,其中每个Ra独立地为氢、烷基、氟烷基、碳环基、碳环基烷基、芳基、芳烷基、杂环烷基、杂环烷基烷基、杂芳基或杂芳基烷基。
“杂芳基?#20445;?#25110;可替代地,“杂芳香基?#20445;?#26159;指5至18元的芳香基团(例如,C5-C13杂芳基),其包括一个或多个选自氮、氧和硫的环杂原子,并且其可以是单环、双环、三环或四环环系。每当其在本文中出现时,诸如“5至18”的数值?#27573;?#26159;指在?#37238;?#23450;?#27573;?#20869;的每个整数;例如,“5至18个环原子?#24065;?#21619;着该杂芳基可以由5个环原子、6个环原子等一直到18个环原子(并包括18个环原子)组成。通过从具有自由价的原子上除去一个氢原子,而?#29992;?#31216;以“基”结尾的单价杂芳基基团衍生而来的二价基团,通过在相应的单价基团的名称前加上“亚”来命名,例如,具有两个 连接点的吡啶基被称为亚吡啶基。含N的“杂芳香基”或“杂芳基”部分是指其中?#27809;?#30340;至少一个骨架原子是氮原子的芳香基团。多环杂芳基可以是稠合或非稠合的。杂芳基中的杂原子任选地被氧化。一个或多个氮原子(如果存在的话)任选地被季铵化。杂芳基通过环的任意原子连接到?#26757;肿?#30340;其余部分。杂芳基的实例包括但不限于,氮杂环庚基、吖啶基、苯并咪唑基、苯并吲哚基、1,3-苯并二氧杂环戊烯基、苯并呋喃基、苯并噁唑基、苯并[d]噻唑基、苯并噻二唑基、苯并[b][1,4]二氧杂环庚基、苯并[b][1,4]噁嗪基、1,4-苯并二噁烷基、苯并萘并呋喃基、苯并噁唑基、苯并二氧杂环戊烯基、苯并二噁烯基(benzodioxinyl)、苯并噁唑基、苯并吡喃基、苯并吡喃酮基、苯并呋喃基、苯并呋喃酮基、苯并呋咱基、苯并噻唑基、苯并噻吩基(benzothienyl)(苯并噻吩基(benzothiophenyl))、苯并噻吩并[3,2-d]嘧啶基、苯并三唑基、苯并[4,6]咪唑并[1,2-a]吡啶基、咔唑基、噌啉基、环戊并[d]嘧啶基、6,7-二氢-5H-环戊并[4,5]噻吩并[2,3-d]嘧啶基、5,6-二氢苯并[h]喹唑啉基、5,6-二氢苯并[h]噌啉基、6,7-二氢-5H-苯并[6,7]环庚并[1,2-c]哒嗪基、二苯并呋喃基、二苯并噻吩基、呋喃基、呋咱基、呋喃酮基、呋喃并[3,2-c]吡啶基、5,6,7,8,9,10-六氢环辛并[d]嘧啶基、5,6,7,8,9,10-六氢环辛并[d]哒嗪基、5,6,7,8,9,10-六氢环辛并[d]吡啶基、异噻唑基、咪唑基、吲唑基、吲哚基、吲唑基、异吲哚基、二氢吲哚基、异二氢吲哚基、异喹啉基、吲嗪基、异噁唑基、5,8-亚甲基-5,6,7,8-四氢喹唑啉基、1,5-萘啶基、1,6-萘啶酮基、噁二唑基、2-氧氮杂环庚基、噁唑基、?#36153;?#20057;烷基、5,6,6a,7,8,9,10,10a-八氢苯并[h]喹唑啉基、1-苯基-1H-?#37327;?#22522;、?#33039;?#22522;、?#33039;?#21994;基、吩噁嗪基、酞嗪基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、?#37327;?#22522;、吡唑基、吡唑并[3,4-d]嘧啶基、吡啶基、吡啶并[3,2-d]嘧啶基、吡啶并[3,4-d]嘧啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、?#37327;?#22522;、喹唑啉基、喹?#39640;?#22522;、喹啉基、异喹啉基、四氢喹啉基、5,6,7,8-四氢喹唑啉基、5,6,7,8-四氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-d]嘧啶基、6,7,8,9-四氢-5H-环庚并[4,5]噻吩并[2,3-d]嘧啶基、5,6,7,8-四氢吡啶并[4,5-c]哒嗪基、噻唑基、噻二唑基、硫杂吡喃基、三唑基、四唑基、三嗪基、噻吩并[2,3-d]嘧啶基、噻吩并[3,2-d]嘧啶基、噻吩并[2,3-c]吡啶基和噻吩基 (thiophenyl)(即噻吩基(thienyl))。除非在本说明书中另有特别说明,杂芳基部分任选地被一个或多个取代基取代,该取代基独立地为?#21644;?#22522;、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、羟基、卤代、氰基、硝基、氧代、硫代、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)或PO3(Ra)2,其中每个Ra独立地为氢、烷基、氟烷基、碳环基、碳环基烷基、芳基、芳烷基、杂环烷基、杂环烷基烷基、杂芳基或杂芳基烷基。
术语“芳基-烷基?#34180;ⅰ?#33459;基烷基”和“芳烷基”用来描述这样的基团:其中烷基链可以是与芳基-烷基部分的如上定义的末端芳基形成连接部分的支链或直?#30784;?#33459;基-烷基基团的实例包括但不限于,任选取代的苄基、苯?#19968;?#33519;丙基和苯丁基,如4-?#28342;?#22522;、2,4-二溴苄基、2-甲基苄基、2-(3-氟苯基)?#19968;?-(4-甲基苯基)?#19968;?-(4-(三氟甲基)苯基)?#19968;?-(2-甲氧基苯基)?#19968;?-(3-硝基苯基)?#19968;?-(2,4-二?#32570;?#22522;)?#19968;?-(3,5-二甲氧基苯基)?#19968;?-苯基丙基、3-(3-?#32570;?#22522;)丙基、3-(2-甲基苯基)丙基、3-(4-甲氧基苯基)丙基、3-(4-(三氟甲基)苯基)丙基、3-(2,4-二?#32570;?#22522;)丙基、4-苯基丁基、4-(4-?#32570;?#22522;)丁基、4-(2-甲基苯基)丁基、4-(2,4-二?#32570;?#22522;)丁基、4-(2-甲氧基苯基)丁基和10-苯基癸基。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
本文使用的术语“C1-10烷基芳基”是指含有1-10个碳原子的如上定义的支链或非支链烷基,其中芳基代替了烷基上的一个氢,例如,3-苯基丙基。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“C2-10烷基单环芳基”是指含有连?#21448;?#21482;有一个环的芳基连接基团上的末端烷基的基团,该末端烷基为支链或直链且含有2-10个原子。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“C1-10烷基双环芳基”是指含有连?#21448;了?#29615;芳基连接基团上的末端烷基的基团,该末端烷基为支链或直链且含有2-10个原子,例如2-(1-萘基)-?#19968;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“芳基-环烷基”和“芳基环烷基”用来描述其中末端芳基连?#21448;?#29615;烷基上的基团,例如苯基环戊基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂芳基-C3-8环烷基”和“杂芳基C3-8环烷基”用来描述其中末端杂芳基连?#21448;?#21547;有3-8个碳的环烷基上的基团,例如吡啶-2-基-环戊基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂芳基-杂烷基”是指其中末端杂芳基连?#21448;?#26434;烷基连接基团上的基团,例如,吡啶-2-基亚甲基氧基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“芳基-烯基?#34180;ⅰ?#33459;基烯基”和“芳烯基”用来描述这样的基团:其中烯基链可以是与如上定义的末端芳基部分形成芳烯基部分的连接部分的支链或直链,例如苯乙烯基(2-苯基乙烯基)、苯丙烯基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“芳基-C2-10烯基?#24065;?#25351;其中烯基部分含有2-10个碳原子的如上所述的芳基烯基,例如,苯乙烯基(2-苯基乙烯基)?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“C2-10烯基-芳基”用来描述这样的基团:其中含有2-10个碳原子且可为支链或直链的末端烯基连?#21448;?#33459;基部分上,?#26757;?#22522;部分构?#19978;?#22522;-芳基部分的连接部分,例如,3-丙烯基-萘-1-基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“芳基-炔基?#34180;ⅰ?#33459;基炔基”和“芳炔基”用来描述这样的基团:其中炔基链可以是与如上定义的末端芳基部分形成芳基-炔基部分的连接部分的支链或直链,例如3-苯基-1-丙炔基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“芳基-C2-10炔基?#24065;?#25351;其中炔基部分含有2-10个碳的如上所述的芳基炔基,例如3-苯基-1-丙炔基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“C2-10炔基-芳基?#24065;?#25351;含有连?#21448;?#22914;上定义的芳基连接基团上的如上定义的炔基部分的基团,其中炔基部分含有2-10个碳,例如3- 丙炔基-萘-1-基。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“芳基-氧基?#34180;ⅰ?#33459;基氧基”和“芳氧基”用来描述连?#21448;?#36830;?#26377;?#27687;原子上的末端芳基。典型的芳基-氧基包括苯氧基、3,4-二?#32570;?#27687;基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“芳基-氧烷基?#34180;ⅰ?#33459;基氧烷基”和“芳氧烷基”用来描述其中烷基被末端芳基-氧基所取代的基团,例如五氟苯氧甲基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“C1-10烷氧基-C1-10烷基”是指这样的基团:其中含有1-10个碳原子和在支链或直链内的氧原子的烷氧基连?#21448;?#21547;有1-10个碳原子的支链或直链的烷基连接基团上,例如甲氧丙基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“C1-10烷氧基-C2-10烯基”是指这样的基团:其中含有1-10个碳原子和在支链或直链内的氧原子的烷氧基连?#21448;?#21547;有1-10个碳原子的支链或直链的烯基连接基团上,例如3-甲氧丁-2-烯-1-基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“C1-10烷氧基-C2-10炔基”是指这样的基团:其中含有1-10个碳原子和在支链或直链内的氧原子的烷氧基连?#21448;?#21547;有1-10个碳原子的支链或直链的炔基连接基团上,例如3-甲氧丁-2-炔-1-基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂环烯基”是指未取代的或取代的环烯基结构,其中至少一个碳原子被选自氧、氮和硫的杂原子所代替。
术语“杂芳基-氧基?#34180;ⅰ?#26434;芳基-氧基?#34180;ⅰ?#26434;芳基氧基?#34180;ⅰ?#26434;芳基氧基?#34180;ⅰ?#26434;芳氧基(hetaroxy)”和“杂芳氧基(heteroaroxy)”用来描述连?#21448;?#36830;?#26377;?#27687;原子上的未取代或取代的末端杂芳基。典型的杂芳基-氧基基团包括4,6-二甲氧基嘧啶-2-基氧基?#21462;?
术语“杂芳基烷基?#34180;ⅰ?#26434;芳基烷基?#34180;ⅰ?#26434;芳基-烷基?#34180;ⅰ?#26434;芳基-烷基?#34180;ⅰ?#26434;芳烷基(hetaralkyl)”和“杂芳烷基(heteroaralkyl)”用来描述这样的基团:其中烷基链可以是与如上所述的末端杂芳基部分形成杂芳基烷基部分的连接部分的支链或直链,例如3-呋喃甲基、噻?#32422;?#22522;、糠基?#21462;?该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂芳基-C1-10烷基”用来描述其中烷基含有1-10个碳原子的如上所述的杂芳基烷基。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“C1-10烷基-杂芳基”用来描述连?#21448;?#22914;上所述的杂芳基上的烷基,其中该烷基含有1-10个碳原子。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂芳基烯基?#34180;ⅰ?#26434;芳基烯基?#34180;ⅰ?#26434;芳基-烯基?#34180;ⅰ?#26434;芳基-烯基?#34180;ⅰ?#26434;芳烯基(hetaralkenyl)”和“杂芳烯基(heteroaralkenyl)”用来描述这样的杂芳基烯基基团:其中烯基链可以是与如上定义的末端杂芳基部分形成杂芳基烯基部分的连接部分的支链或直链,例如3-(4-吡啶基)-1-丙烯基。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂芳基-C2-10烯基”用来描述其中烯基含有2-10个碳原子的如上所述的基团。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“C2-10烯基-杂芳基”用来描述含有连?#21448;?#26434;芳基连接基团上的烯基的基团,该烯基为支链或直链的且含有2-10个碳原子,例如2-苯乙烯基-4-吡啶基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂芳基炔基?#34180;ⅰ?#26434;芳基炔基?#34180;ⅰ?#26434;芳基-炔基?#34180;ⅰ?#26434;芳基-炔基?#34180;ⅰ?#26434;芳炔基(hetaralkynyl)”和“杂芳炔基(heteroaralkynyl)”用来描述这样的基团:其中炔基链可以是与如上定义的杂芳基部分形成杂芳基炔基部分的连接部分的支链或直链,例如4-(2-噻吩基)-1-丁炔基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂芳基-C2-10炔基”用来描述其中炔基含有2-10个碳原子的如上所述的杂芳基炔基。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“C2-10炔基-杂芳基”用来描述含有连?#21448;?#26434;芳基连接基团上的炔基的基团,该炔基含有2-10个碳原子且为支链或直链,例如,4(丁-1-炔基)噻吩-2-基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂环基”是指含有独立地选自氮、氧和硫的1、2、3或4个杂原子的4、5、6或7元环。4元环具有0个双键,5元环具有0-2个双键,且6元和7元环具有0-3个双键。术语“杂环基?#24065;?#21253;括双环基团, 其中杂环基的环与另一单环杂环基或4至7元芳香或非芳香碳环稠合。杂环基可通过该基团中的任何碳原子或氮原子连?#21448;?#27597;体分子部分上。
“杂环烷基”是指包含2至12个碳原子和1至6个选自氮、氧和硫的杂原子的稳定的3元至18元非芳香环基团。每当其在本文中出现时,诸如“3至18”的数值?#27573;?#26159;指在?#37238;?#23450;?#27573;?#20869;的每个整数;例如,“3至18个环原子?#24065;?#21619;着该杂环烷基可由3个环原子、4个环原子等一直到18个环原子(并包括18个环原子)组成。在一些实施方案中,其为C5-C10杂环烷基。在一些实施方案中,其为C4-C10杂环烷基。在一些实施方案中,其为C3-C10杂环烷基。除非在本说明书中另有特别说明,杂环烷基是单环、双环、三环或四环环系,其可包括稠合的或桥接的环系。杂环烷基中的杂原子可任选地被氧化。一个或多个氮原子(如果存在的话)任选地被季铵化。杂环烷基部分地或完全地饱和。杂环烷基可通过环的任意原子连接到?#26757;肿?#30340;其余部分。这样的杂环烷基基团的实例包括但不限于二噁烷基、噻吩基[1,3]二噻烷基、十氢异喹啉基、咪唑啉基、咪唑烷基、异噻唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代?#37327;?#28919;基、噁唑烷基、哌啶基、哌嗪基、4-哌啶酮基、?#37327;?#28919;基、吡唑烷基、奎宁环基、噻唑烷基、四氢呋喃基、三噻烷基、四氢吡喃基、硫代吗啉基、硫杂吗啉基、1-氧代硫代吗啉基以及1,1-二氧代硫代吗啉基。除非在本说明书中另有特别说明,杂环烷基部分任选地被一个或多个取代基取代,该取代基独立地为?#21644;?#22522;、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、羟基、卤代、氰基、硝基、氧代、硫代、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)或PO3(Ra)2,其中每个Ra独立地为氢、烷基、氟烷基、碳环基、碳环基烷基、芳基、芳烷基、杂环烷基、杂芳基或杂芳基烷基。
“杂环烷基?#34987;?#21253;括双环环系,其中一个非芳香环,通常有3至7 个环原子,除1-3个独立地选自氧、硫和氮的杂原子以外还含有至少2个碳原子,以及包含至少一个上述杂原子的组合;且另一个环,通常有3至7个环原子,任选地包含1-3个独立地选自氧、硫和氮的杂原子且不是芳香族的。
术语“杂环基烷基(heterocyclylalkyl)?#34180;ⅰ?#26434;环基-烷基(heterocyclyl-alkyl)?#34180;ⅰ?#26434;环基烷基(hetcyclylalkyl)”和“杂环基-烷基(hetcyclyl-alkyl)”用来描述这样的基团:其中烷基链可以是与如上定义的末端杂环基部分形成杂环基烷基部分的连接部分的支链或直链,例如3-哌啶基甲基?#21462;?#26415;语“亚杂环烷基”是指杂环烷基的二价衍生物。
术语“C1-10烷基-杂环基”是指其中烷基部分含有1-10个碳原子的如上定义的基团。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂环基-C1-10烷基”是指含有连?#21448;?#28919;基连接基团上的末端杂环基的基团,该烷基含有1-10个碳且为支链或直链,例如,4-吗啉基?#19968;取?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂环基烯基(heterocyclylalkenyl)?#34180;ⅰ?#26434;环基-烯基(heterocyclyl-alkenyl)?#34180;ⅰ?#26434;环基烯基(hetcyclylalkenyl)”和“杂环基-烯基(hetcyclyl-alkenyl)”用来描述这样的基团:其中烯基链可以是与如上定义的末端杂环基部分形成杂环基烯基部分的连接部分的支链或直链,例如2-吗啉基-1-丙烯基?#21462;?#26415;语“亚杂环烯基”是指杂环基烯基的二价衍生物。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂环基-C2-10烯基”是指其中烯基含有2-10个碳原子且为支链或直链的如上定义的基团,例如,4-(N-哌嗪基)-丁-2-烯-1-基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂环基炔基(heterocyclylalkynyl)?#34180;ⅰ?#26434;环基-炔基(heterocyclyl-alkynyl)?#34180;ⅰ?#26434;环基炔基(hetcyclylalkynyl)”和“杂环基-炔基(hetcyclyl-alkynyl)”用来描述这样的基团:其中炔基链可以是与如上定义的末端杂环基部分形成杂环基炔基部分的连接部分的支链或直链,例如2-?#37327;?#28919;基-1-丁炔基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂环基-C2-10炔基”是指其中炔基含有2-10个碳原子且为支 链或直链的如上所述的基团,例如,4-(N-哌嗪基)-丁-2-炔-1-基?#21462;?
术语“芳基-杂环基”是指含有连?#21448;?#26434;环连接基团的末端芳基的基团,例如,N4-(4-苯基)-哌嗪基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂芳基-杂环基”是指含有连?#21448;?#26434;环连接基团的末端杂芳基的基团,例如,N4-(4-吡啶基)-哌嗪基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“羧基烷基”是指连?#21448;?#22914;上定义的支链或直链烷基的末端羧基(-COOH)基团。
术语“羧基烯基”是指连?#21448;?#22914;上定义的支链或直链烯基的末端羧基(-COOH)基团。
术语“羧基炔基”是指连?#21448;?#22914;上定义的支链或直链炔基的末端羧基(-COOH)基团。
术语“羧基环烷基”是指连?#21448;?#22914;上定义的环状脂肪?#26041;?#26500;的末端羧基(-COOH)基团。
术语“羧基环烯基”是指连?#21448;?#22914;上定义的具有烯键的环状脂肪?#26041;?#26500;的末端羧基(-COOH)基团。
术语“环烷基烷基”和“环烷基-烷基”是指连?#21448;?#28919;基的如上定义的末端环烷基,例如,环丙基甲基、环己基?#19968;取?#35813;部分的任一部分是未取代的或取代的。
术语“环烷基烯基”和“环烷基-烯基”是指连?#21448;料?#22522;的如上定义的末端环烷基,例如环己基乙烯基、环庚基烯丙基?#21462;?#35813;部分的任一部分是未取代的或取代的。
术语“环烷基炔基”和“环烷基-炔基”是指连?#21448;?#28820;基的如上定义的末端环烷基,例如环丙基炔丙基、4-环戊基-2-丁炔基?#21462;?#35813;部分的任一部分是未取代的或取代的。
术语“环烯基烷基”和“环烯基-烷基”是指连?#21448;?#28919;基的如上定义的末端环烯基,例如2-(环戊烯-1-基)?#19968;取?#35813;部分的任一部分是未取代的或取代的。
术语“环烯基烯基”和“环烯基-烯基”是指连?#21448;料?#22522;的如上定义的末端环烯基,例如1-(环?#21512;?3-基)烯丙基?#21462;?
术语“环烯基炔基”和“环烯基-炔基”是指连?#21448;?#28820;基的如上定义的末端环烯基,例如1-(环?#21512;?3-基)炔丙基?#21462;?#35813;部分的任一部分是未取代的或取代的。
术语“烷氧基”是指-O-烷基基团,包括通过氧连接到母体结构的1至8个碳原子的直?#30784;?#25903;?#30784;?#29615;状结构及其组合。实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、环丙氧基、环己氧基?#21462;!暗图?#28919;氧基”是指含有1至6个碳的烷氧基。在一些实施方案中,C1-C4烷基是包括1至4个碳原子的直链和支链烷基的烷基。
术语“卤代烷氧基”是指被一个或多个卤代基团取代的烷氧基,例如氯甲氧基、三氟甲氧基、二氟甲氧基、全氟异丁氧基?#21462;?
术语“烷氧基烷氧基烷基”是指被烷氧基部分取代的烷基,该烷氧基部分又被第二烷氧基部分所取代,例如甲氧基甲氧基甲基、异丙氧基甲氧基?#19968;取?#35813;部分被其他取代基取代或不被其他取代基取代。
术语“烷硫基”包括连?#21448;?#36830;?#26377;?#30827;原子的支链和直链烷基,例如甲硫基?#21462;?
术语“烷氧基烷基”是指被烷氧基取代的烷基,例如,异丙氧基甲基?#21462;?#35813;部分的任一部分是未取代的或取代的。
术语“烷氧基烯基”是指被烷氧基取代的烯基,例如3-甲氧基烯丙基?#21462;?#35813;部分的任一部分是未取代的或取代的。
术语“烷氧基炔基”是指被烷氧基取代的炔基,例如3-甲氧基炔丙基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“C2-10烯基C3-8环烷基”是指被3至8元环烷基取代的如上定义的烯基,例如,4-(环丙基)-2-丁烯基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“C2-10炔基C3-8环烷基”是指被3至8元环烷基取代的如上定义的炔基,例如,4-(环丙基)-2-丁炔基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂环基-C1-10烷基”是指被如上定义的具有1-10个碳的烷基取代的如上定义的杂环基,例如,4-(N-甲基)-哌嗪基?#21462;?#35813;部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂环基-C2-10烯基”是指被如上定义的具有2-10个碳的烯基取代的如上定义的杂环基,例如,4-(N-烯丙基)哌嗪基?#21462;?#20063;包括其中杂环基团在碳原子上被烯基取代的部分。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“杂环基-C2-10炔基”是指被如上定义的具有2-10个碳的炔基取代的如上定义的杂环基团,例如,4-(N-炔丙基)哌嗪基?#21462;?#20063;包括其中杂环基在碳原子上被炔基取代的部分。该部分的任一部分为未取代的或取代的。
术语“氧代”是指与碳原子?#36816;?#38190;连接的氧。本领域?#38469;?#20154;员理解,“氧代”需要来自与氧连接的原子的第二个键。因此,可以理解,氧代不能被取代到芳基或杂芳基环上,除非它作为互变异构体构成芳香体系的一部分。
术语?#26263;途?#29289;”是指低分子量的聚合物,其数均分子量通常小于约5000g/mol,并且其聚合度(每条链的单体单元的平均数)大于1且通常等于或少于约50。
“磺酰胺基”或“磺酰氨基”是指–S(=O)2-NR'R'基团,其中每个R'独立地选自氢、烷基、环烷基、芳基、杂芳基(通过环碳键合)和?#21448;?#29615;基(通过环碳键合)。在–S(=O)2-NR'R'基团的-NR'R'中的R'基团可以与它所连接的氮一起形成4元环、5元环、6元环或7元环。磺酰氨基任选地被一个或多个分别针对烷基、环烷基、芳基、杂芳基所描述的取代基所取代。
所述的化合物可含有一个或多个非对称中心且可因此产生非对映体和光学异构体。本发明包括所有这些可能的非对映体及其外消旋混合物、它们的基本上纯的拆分对映体、所有可能的几何异构体及其药学上可接受的盐。化合物在某些位置处可能没有显示确定的立体化学。本发明包括公开的化合物的所有立体异构体及其药学上可接受的盐。此外, 也包括立体异构体的混合物以及分离的特定立体异构体。在用来制备这些化合物的合成过程中,或在使用本领域?#38469;?#20154;?#24065;?#30693;的外消旋化或差向异构化中,这些过程的产物可为立体异构体的混合物。
本发明包括本发明抑制剂的所有方式的旋转异构体和构象限制状态。
针对烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基单价和二价衍生基团(包括通常被称作亚烷基、烯基、亚杂烷基、杂烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的那些基团)的取代基可以是选自但不限于下面各?#21482;?#22242;中的一?#21482;?#22810;?#37073;和?#22522;、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、-OR'、=O、=NR'、=N-OR'、-NR'R?#34180;?SR'、-卤素、-SiR'R”R”'、-OC(O)R'、-C(O)R'、-CO2R'、-C(O)NR'R?#34180;?OC(O)NR'R?#34180;?NR”C(O)R'、-NR'-C(O)NR”R”'、-NR”C(O)OR'、-NR-C(NR'R”)=NR'“、-S(O)R'、-S(O)2R'、-S(O)2NR'R?#34180;?NRSO2R'、-CN和–NO2,数值?#27573;?#20174;0到(2m'+1),其中m'为这些基团中的碳原子总数。R'、R?#34180;”'和R?#34180;?#21508;自优选地独立地指氢,取代的或未取代的杂烷基,取代的或未取代的环烷基,取代的或未取代的杂环烷基,取代的或未取代的芳基(例如,被1-3个卤素取代的芳基),取代的或未取代的烷基、烷氧基或硫代烷氧基,或芳基烷基。例如,?#21271;?#21457;明的抑制剂包括多于一个R基团时,每个R基团独立地选择,正如当存在多于一个R'、R?#34180;'“和R?#34180;?#22522;团时,这些基团中的每一个也独立地选择。
当R'和R”或R″和R″′连接在同一氮原子上时,它们可与该氮原子一起形成4元环、5元环、6元环或7元环。例如,-NR'R?#24065;?#25351;包括但不限于1-?#37327;?#28919;基、4-哌嗪基和4-吗啉基。从上述取代基的?#33268;?#20013;,本领域?#38469;?#20154;员将理解术语“烷基?#24065;?#25351;包括包含与除氢基团之外的基团结合的碳原子的基团,诸如卤代烷基(例如,-CF3和–CH2CF3)和酰基(例如,-C(O)CH3、-C(O)CF3、-C(O)CH2OCH3等)。
与以上针对烷基所述的取代基类似,针对芳基和杂芳基的示例性取代基(及其二价衍生物)可改变且选自例如:卤素、烷基、杂烷基、烯 基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、-OR'、-NR'R?#34180;?SR'、-卤素、-SiR'R”R”'、-OC(O)R'、-C(O)R'、-CO2R'、-C(O)NR'R?#34180;?OC(O)NR'R?#34180;?NR”C(O)R'、-NR'-C(O)NR”R”'、-NR”C(O)OR'、-NR-C(NR'R”R'“)=NR?#34180;啊?NR-C(NR'R”)=NR'“、-S(O)R'、-S(O)2R'、-S(O)2NR'R?#34180;?NRSO2R'、-CN和–NO2、-R'、-N3、-CH(Ph)2、氟代(C1-C4)烷氧代和氟代(C1-C4)烷基,数值?#27573;?#20174;0到芳环体系的开放化合价(open valences)的总数;且其中R'、R?#34180;”'和R?#34180;?#20248;选地独立选自氢、取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的杂烷基、取代的或未取代的环烷基、取代的或未取代的杂环烷基、取代的或未取代的芳基和取代的或未取代的杂芳基。例如,?#21271;?#21457;明的抑制剂包含多于一个R基团时,每个R基团独立地选择,当存在多于一个R'、R?#34180;'“和R?#34180;?#22522;团时,这些基团中的每一个也独立地选择。
如本文中使用的,在-S(O)(0-2)-中的0-2为整数0、1和2。
芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可任选地形成式-T-C(O)-(CRR')q-U-的环,其中T和U独立地为–NR-、-O-、-CRR'-或单键,且q为0到3的整数。或者,芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可任选地替换为式-A-(CH2)r-B-的取代基,其中A和B独立地为–CRR'-、-O-、-NR-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-S(O)2NR'-或单键,且r是1到4的整数。如此形成的新环的单键之一可任选地替换为双键。或者,芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可任选地替换为式-(CRR')s-X'-(C″R″′)d-的取代基,其中s和d独立地为0到3的整数,且X'为–O-、-NR'-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-或-S(O)2NR'-。取代基R、R'、R”和R'“优选地独立选自氢、取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的环烷基、取代的或未取代的杂环烷基、取代的或未取代的芳基和取代的或未取代的杂芳基。
除非另有说明,本文所述的结构还旨在包括差别仅在于存在一个或多个同位素富集的原子的化合物。例如,除了氢被替换为氘或氚或者碳被替换为13C-或14C-富集的碳之外具有本结构的化合物在本发明?#27573;?#20043;内。
本发明的化合物还可在一个或多个构成该化合物的原子上含有非自然的原子同位素比例。例如,化合物可以用放射性同位素例如氚(3H)、碘-125(125I)或碳-14(14C)进行放射性标?#24688;?#26412;发明化合物的所有同位素变体,无论有没有放射性,?#21450;?#21547;在本发明的?#27573;?#20043;内。
方法
一方面,本发明提供了一种用于治疗受试者中与PI3-激酶α和/或RTK相关的疾病状况的方法。?#26757;?#27861;通常包括向受试者同时或相继地施用治疗有效量的PI3-激酶α抑制剂和RTK抑制剂的组合。
如本文使用的,治疗有效量的PI3-激酶α抑制剂和RTK抑制剂的组合是指PI3-激酶α抑制剂和RTK抑制剂的组合,其中该组合足以实现本文定义的预期应用,包括但不限于疾病治疗。本发明方法中包括联合使用治疗有效量的PI3-激酶α抑制剂和RTK抑制剂来实现这种治疗。在本发明方法中还涉及联合使用亚治疗量的PI3-激酶α抑制剂和/或RTK抑制剂来治疗预期的疾病状况。单个抑制剂虽然以亚治疗量存在,但是协同产生了有效的效果和/或减少了在预期应用中的副作用。
因此,在一个单独但相关的方面,本发明提供了一种用于治疗受试者中与PI3-激酶α抑制剂和/或RTK相关的疾病状况的方法,包括向受试者同时或相继地施用协同有效治疗量的PI3-激酶α抑制剂和RTK抑制剂的组合。
本发明的化合物组合的治疗有效量可根据预期应用(体外或体内),或正在接受治疗的受试者及疾病状况,例如受试者的体重和年龄、疾病状况的?#29616;?#31243;度、施用方式等而变化,这可由本领域普通?#38469;?#20154;?#27604;?#26131;地确定。该术语也适用于将在靶细胞中诱导特定响应(例如,增殖的减少或?#26800;?#30333;活性的下调)的剂量。具体的剂量将根据所选择的特定化合物、将要遵循的给药方案、是否与其他化合物联合施用、施用时机、所施用的组织以及运载它的物理递送?#20302;?#32780;变化。
本发明方法中使用的PI3-激酶α抑制剂通常展示出相对于一?#21482;?#22810;种I型磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-激酶)(包括例如PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ 和PI3-激酶δ)对PI3-激酶α的选择性抑制。
PI3-激酶α的选择性抑制可通过体外或体内方法来确定。可使用本领域中已知的任何试验,包括但不限于免疫测定、免疫沉淀法、基于荧光或细胞的试验。在一些实施方案中,体外试验用来通过测定PI3Kα蛋白质相对于另一PI3-激酶如PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的活性的试验来确定PI3-激酶α的选择性抑制。例如,间接测量通过PI3-K的活性而形成的PIP3产物的时间分辨FRET试验可用来确定测试化合物对于PI3-激酶α和/或任何其他PI3-激酶的IC50值。
如本文使用的,术语“IC50”是指抑制剂在抑制生物功能或生化功能时的最大半数抑制浓度。这种定量量度指示需要多少特定抑制剂才能抑制给定的生物过程(或过程的组成部分,即,酶、细胞、细胞受体或微生物)的一半。换句话说,它是物质的最大半数(50%)抑制浓度(IC)(50%IC或IC50)。EC50是指在体内获得最大效应的50%所需的血浆浓度。
可通过测定和构建剂量-响应曲线和检测不同浓度的抑制剂对逆转激动剂活性的效果来确定IC50。在进行这些测定中有用的体外试验被称作“体外激酶试验?#34180;?
在一些实施方案中,体外激酶试验包括使用标记的ATP作为磷酸供体(phosphodonor),并在激酶?#20174;?#20043;后在合适的过滤器上捕获底物肽。通过包括三氯乙酸沉淀和充分洗涤的各种?#38469;酰?#20351;未?#20174;?#30340;标记ATP及代谢物从放射性肽底物中解析出来。加入若干带正电的残基允许在磷酸?#23435;?#32032;纸上进行捕获,随后进行洗?#21360;?#25530;入到底物肽内的放射性通过?#20102;?#35745;数?#37255;?#27979;。该试验相对简单、适度灵敏,且肽底物可在序列和浓度方面进?#26800;?#25972;以满足试验要求。
其他示例性激酶试验在美国专利5,759,787和序列号为12/728,926的美国申请中详细描述,两者均通过引用并入本文。
在其他实施方案中,基于细胞的试验用来确定PI3-激酶α的选择性抑制。例如,如果在表达PI3-激酶α的细胞中,优选地在展示出异常高水平或活性的PI3-激酶α的细胞中,抑制剂选择性地下调PI3-激酶信号转导,则可表明该抑制剂对PI3-激酶α有选择性。具有PI3-激酶α突 变且因此展示出这类PI3-激酶α异常的多种细胞是本领域已知的。携带这类突变的细胞系的非限制性实例包括那些携带PI3-激酶α基因的核酸序列的点突变、缺失、替换或平移的细胞系。这类细胞系的实例包括但不限于BT20(H1047R突变)、MCF-7(E545K突变)、MDA-MB-361(E545K突变)、MDA-MB-453(H1047R突变)、T47D(H1047R突变)、Hec-1A(G1049R突变)和HCT-116(H1047R突变)。可使用其他在PI3Kα蛋白质中具有突变的细胞系,如在p85、C2、螺旋或激酶结构域中具有突变的细胞。
此外,PI3-激酶α活性的抑制可通过PI3-激酶α途径的信号转导的减少来确定。可使用多种读取信息(readouts)来建立该信号传导途径的输出的减少。一些非限制的示例性读取信息包括:(1)Akt在包括但不限于S473和T308的残基处的磷酸化的?#26723;停?2)如通过包括但不限于FoxO1/O3a T24/32、GSK3α/βS21/9和TSC2T1462的Akt底物的磷酸化的?#26723;?#25152;证明的,Akt激活的?#26723;停?3)包括但不限于核糖体S6S240/244、70S6K T389和4EBP1T37/46的PI3-激酶?#26009;?#28216;信号分子的磷酸化的?#26723;停?4)细胞增殖的抑制,该细胞包括但不限于正常或赘生性细胞、鼠胚胎?#19978;宋?#32454;胞、白血病胚细胞、肿瘤?#19978;?#32990;和介导自身免疫?#20174;?#30340;细胞;(5)细胞凋亡或细胞周期停滞的诱导;(6)细胞趋化性的?#26723;停?#21644;(7)4EBP1与eIF4E结合的增加。术语“eIF4E”是指参与将核糖体引导至mRNA的帽结构的24-kD真核翻译起始因子,具有人类基因座4q21-q25。
在一些实施方案中,PI3-激酶α抑制剂相对于一种、两?#21482;?#19977;种由PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ组成的其他I型磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-激酶)选择性地抑制PI3-激酶α。在其他实施方案中,与其余I型PI3-激酶相比,本发明的一些抑制剂选择性地抑制PI3-激酶α和PI3-激酶γ。在其他实施方案中,与其余I型PI3-激酶相比,本发明的一些抑制剂选择性地抑制PI3-激酶α和PI3-激酶?#38534;?#22312;其他实施方案中,与其余I型PI3-激酶相比,本发明的一些抑制剂选择性地抑制PI3-激酶α和PI3-激酶δ。
在一些实施方案中,本发明的方法使用了在体外激酶试验中确定 的IC50值约为或小于预定值的PI3-激酶α抑制剂。在一些实施方案中,PI3-激酶α抑制剂以如下IC50值抑制PI3-激酶?#31890;?#32422;1nM或更低、2nM或更低、5nM或更低、7nM或更低、10nM或更低、20nM或更低、30nM或更低、40nM或更低、50nM或更低、60nM或更低、70nM或更低、80nM或更低、90nM或更低、100nM或更低、120nM或更低、140nM或更低、150nM或更低、160nM或更低、170nM或更低、180nM或更低、190nM或更低、200nM或更低、225nM或更低、250nM或更低、275nM或更低、300nM或更低、325nM或更低、350nM或更低、375nM或更低、400nM或更低、425nM或更低、450nM或更低、475nM或更低、500nM或更低、550nM或更低、600nM或更低、650nM或更低、700nM或更低、750nM或更低、800nM或更低、850nM或更低、900nM或更低、950nM或更低、1μM或更低、1.2μM或更低、1.3μM或更低、1.4μM或更低、1.5μM或更低、1.6μM或更低、1.7μM或更低、1.8μM或更低、1.9μM或更低、2μM或更低、5μM或更低、10μM或更低、15μM或更低、20μM或更低、25μM或更低、30μM或更低、40μM或更低、50μM、60μM、70μM、80μM、90μM、100μM、200μM、300μM、400μM或500μM或更低。
在一些实施方案中,PI3-激酶α抑制剂选择性地抑制PI3-激酶?#31890;?#20854;IC50值比其针对选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的一种、两?#21482;?#19977;?#21046;?#20182;I型PI3-激酶的IC50值至少低2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、100或1000倍。
在一些实施方案中,PI3-激酶α抑制剂选择性地抑制PI3-激酶?#31890;?#20854;IC50值小于约1nM、2nM、5nM、7nM、10nM、20nM、30nM、40nM、50nM、60nM、70nM、80nM、90nM、100nM、120nM、140nM、150nM、160nM、170nM、180nM、190nM、200nM、225nM、250nM、275nM、300nM、325nM、350nM、375nM、400nM、425nM、450nM、475nM、500nM、550nM、600nM、650nM、700nM、750nM、800nM、850nM、900nM、950nM、1μM、1.2μM、1.3μM、1.4μM、1.5μM、1.6μM、1.7μM、1.8μM、1.9μM、2μM、5μM、10μM、15μM、 20μM、25μM、30μM、40μM、50μM、60μM、70μM、80μM、90μM、100μM、200μM、300μM、400μM或500μM,并且所述IC50值比其针对选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的一种、两?#21482;?#19977;?#21046;?#20182;I型PI3-激酶的IC50值至少低2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、100或1000倍。在一些实施方案中,如在体外激酶试验中所确定的,PI3-激酶α抑制剂以约100nM或更低的IC50值抑制PI3-激酶α。
在一些情况下,如在体外激酶试验中所确定的,PI3-激酶α抑制剂以约200nM或更低的IC50值抑制PI3-激酶?#31890;?#19988;该IC50值比其针对选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的所有其他I型PI3-激酶的IC50值至少低5、10、15、20、25、50、100或1000倍。在一些实施方案中,PI3-激酶α抑制剂以小于约100nM的IC50值选择性地抑制PI3-激酶?#31890;?#19988;所述IC50值比其针对选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的所有其他I型PI3-激酶的IC50值至少低5、10、15、20、25、50或100、1000倍。
在一些情况下,如在体外激酶试验中所确定的,PI3-激酶α抑制剂以约50nM或更低的IC50值抑制PI3-激酶?#31890;?#19988;该IC50值比其针对选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的所有其他I型PI3-激酶的IC50值至少低5、10、15、20、25、50、100或1000倍。
在一些实施方案中,PI3-激酶α抑制剂以小于约20nM的IC50值选择性地抑制PI3-激酶?#31890;?#19988;所述IC50值比其针对选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的所有其他I型PI3-激酶的IC50值至少低5、10、15、20、25、50或100、1000倍。
在一些实施方案中,PI3-激酶α抑制剂以小于约20nM的IC50值选择性地抑制PI3-激酶?#31890;?#19988;所述IC50值比其针对选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的所有其他I型PI3-激酶的IC50值至少低5、10、15、20、25、50或100、1000倍。
在一些情况下,如在体外激酶试验中所确定的,PI3-激酶α抑制剂以约20nM或更低的IC50值抑制PI3-激酶?#31890;?#19988;该IC50值比其针对 选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的所有其他I型PI3-激酶的IC50值至少低100倍。
或者,如在体外激酶试验中所确定的,PI3-激酶α抑制剂以约10μM或更低、5μM或更低、2.5μM或更低、1μM或更低、500nM或更低、100nM或更低、75nM或更低、50nM或更低、25nM或更低、10nM或更低、5nM或更低、1nM或更低、500pM或更低、或100pM或更低的EC50值抑制PI3-激酶α。
在一些实施方案中,PI3-激酶α抑制剂以比其针对选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的一种、两?#21482;?#19977;?#21046;?#20182;I型PI3-激酶的EC50值至少低5、10、15、20、25、50、100或1000倍的EC50值选择性地抑制PI3-激酶α。
在一些实施方案中,如在体外激酶试验中所确定的,PI3-激酶α抑制剂以约10μM或更低、5μM或更低、2.5μM或更低、1μM或更低、500nM或更低、100nM或更低、75nM或更低、50nM或更低、25nM或更低、10nM或更低、5nM或更低、1nM或更低、500pM或更低或100pM或更低的EC50值抑制PI3-激酶?#31890;?#19988;该EC50值比其针对选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的一种、两?#21482;?#19977;?#21046;?#20182;I型PI3-激酶的EC50值至少低5、10、15、20、25、50或100、1000倍。
本发明可以使用目前本领域已知的或未来将被鉴定的任何PI3-激酶α抑制剂,包括但不限于CNX-1351(来自Avila)、BYL719(来自Novartis)和GDC-0032(来自Roche)。
受体酪氨酸激酶落在目前鉴定的大约20种类别的?#27573;?#20869;,其中大多数激活PI3K并且已与癌症相关联。作为非限制性的实例,I类RTK包含EGFR家族,包括EGFR、HER2、HER3和HER4。EGFR在许多不同类型的癌症中过表达,在几种不同的癌症中发现了HER2过表达,包括在大约30%的乳腺癌中,并且HER3的过表达已与几种癌症药物如吉非替尼和西妥昔单抗的获得性抗性相关联。HER4的突变已与癌症?#36884;?#31070;分裂症相关联。I类RTK在配体结合后能够多聚化,包括形成同型二聚体、异二聚体?#36879;?#39640;级的寡聚物。尤其是,HER2本身不结合配体, 但它是其他I类RTK的优选的二聚化配偶体。因此,靶向I类RTK的任意组合(优选EGFR和HER2之一或两者)的RTK抑制剂对于治疗疾病是有用的。
其他RTK也与人类疾病相关联,并因此是本发明中使用的RTK抑制剂的有用靶标。非限制性实例包括FLT3(III类RTK),其是急?#36816;?#26679;白血病中最常见的突变基因。VEGF受体是V类RTK,并参与血管发生。VI类RTK包括HGFR,其在癌症中的异常激活可引发肿瘤生长和转移,并且与许多不同类型的癌症有关。已知VIII类受体(也称作Eph受体)在包括乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、食管癌、结肠癌、黑素瘤和造血癌症在内的众多癌症中过表达。Eph受体还被认为在血管发生和细胞运动中发挥作用,并且可增加肿瘤生长和迁移。XIV类RTK包括RET原癌基因,其功能获得性突变已与包括甲状腺髓样癌、多发性内分泌肿瘤和甲状旁腺增生在内的多种类型的癌症相关联。与多种癌症或其他疾病有关的RTK的许多其他实例在文献中?#19988;?#30693;的。
RTK起到信号转导途径的跨膜组分的作用。例如,RTK可通过配体结合而被多种生长因子、激素或细胞因子激活。已知一些RTK如HER2不直接结合配体,而是可与结合配体的其他RTK缔合。激活后,RTK的细胞内C?#31169;?#26500;域自磷酸化,形成针对下游衔接子或信号分子如包含SH2(Src同源物2)或PTB(磷酸酪氨酸结合)结构域的蛋白质的结合?#22351;恪TK而后可使这些下游蛋白质(包括含有SH2的酶PI3K)磷酸化。
RTK对PI3K的刺激通过在两个关键?#22351;鉙473和T308的磷酸化而引起Akt的激活。据报道,Akt的完全激活需要S473和T308两者的磷酸化。Akt以多?#22336;?#24335;促进细胞存活和增殖,包括抑制凋亡、促进葡萄糖摄取?#36879;?#21464;细胞代谢。在Akt上的两个磷酸化?#22351;?#20013;,由PDK1介导的T308处的激活环磷酸化被认为对激酶活性是必不可少的,而S473处的疏水性基序磷酸化提高了Akt激酶活性。
本发明方法中使用的RTK抑制剂对靶RTK通常具有高度的选择性。在一些实施方案中,RTK抑制剂对于特定类别的RTK的一?#21482;?#22810;种成?#26412;?#26377;选择性。在一些实施方案中,RTK抑制剂对于一?#21482;?#22810;种I 类RTK(也称作EGFR家族的激酶)具有选择性。一方面,RTK抑制剂结合并直接抑制EGFR和HER2两者。在另一方面,相对于一种、两?#21482;?#19977;?#21046;?#20182;EGFR家族成员,如HER2、HER3和HER4,RTK抑制剂选择性抑制EGFR。在另一方面,相对于一种、两?#21482;?#19977;?#21046;?#20182;EGFR家族成员,如EGFR、HER3和HER4,RTK抑制剂选择性抑制HER2。
这种能力可用本领域已知的或本文所述的任何方法来确定。例如,RTK活性的抑制可通过下游PI3K/Akt/mTor途径的信号转导的减少来确定。可利用众多的读取信息来建立该信号传导途径的输出的减少。一些非限制的示例性读取信息包括(1)Akt在包括但不限于S473和/或T308的残基处的磷酸化的?#26723;停?2)如通过包括但不限于FoxO1/O3a T24/32、GSK3α/βS21/9和TSC2T1462中任一种的Akt底物的磷酸化的减少所证明的,Akt激活的?#26723;停?3)包括但不限于核糖体S6S240/244、70S6K T389和4EBP1T37/46的mTor下游信号分子的磷酸化的?#26723;停?4)细胞增殖的抑制,该细胞包括但不限于正常或赘生性细胞、鼠胚胎?#19978;宋?#32454;胞、白血病胚细胞、肿瘤?#19978;?#32990;和介导自身免疫?#20174;?#30340;细胞;(5)细胞凋亡或细胞周期停滞的诱导;(6)细胞趋化性的?#26723;停?#21644;(7)4EBP1与eIF4E结合的增加。
用于建立RTK的选择性抑制的基于细胞的试验可采用多种形式。这通常将取决于研究中的生物活性和/或信号转导读取信息。例如,药剂抑制RTK使下游底物磷酸化的能力可通过本领域已知的多种类型的激酶试验来确定。代表性的试验包括但不限于利用识别磷酸化蛋白质的抗体如抗磷酸酪氨酸抗体、抗磷酸丝氨酸抗体或抗磷酸苏氨酸抗体的免疫印迹法和免疫沉淀法。或者,可使用特异性识别激酶底物的特定磷酸化形式的抗体(例如,抗磷酸PI3K抗体)。此外,激酶活性可通过诸如AlphaScreenTM(可获自Perkin Elmer)和eTagTM测定(Chan-Hui,等人(2003)Clinical Immunology111:162-174)等高通量化学发光测定?#37255;?#27979;。另一方面,可使用诸如在磷流(phosflow)实验中描述的流式细胞术等单细胞分析来测量在混合细胞群体中多个下游RTK底物的磷酸化。
免疫印迹法和磷流法的一个优点是可同时测量多个激酶底物的磷 酸化。这提供了可同时测量功效和选择性的优势。例如,可使细胞与各种浓度的RTK抑制剂接触,并且可测量RTK和其他激酶的底物的磷酸化水平。一方面,在被称作“全面激酶调查”的试验中?#28304;?#37327;激酶底物进行分析。选择性的RTK抑制剂预计抑制RTK底物的磷酸化,而不抑制其他激酶的底物的磷酸化。或者,选择性的RTK抑制剂可通过诸如反馈回路或冗余等预期或非预期机制来抑制其他激酶的底物的磷酸化作用。
RTK或PI3-激酶α的抑制效果可通过细胞集落形成试验或其他形式的细胞增殖试验来建立。大量的细胞增殖试验在本领域中可以获得,并且其中许多试验可作为试剂?#35874;?#24471;。细胞增殖试验的非限制性实例包括检测氚代胸腺嘧啶摄取试验、BrdU(5'-溴代-2'-脱氧尿苷)摄取(Calibochem销售的试剂盒)、MTS摄取(Promega销售的试剂盒)、MTT摄取(Cayman Chemical销售的试剂盒)、染料摄取(Invitrogen销售)。
凋亡和细胞周期停滞分析可用本文例举的任何方法以及本领域已知的其他方法进?#23567;?#24050;经设计了许多不同的方法?#37255;?#27979;凋亡。示例性的分析包括但不限于TUNEL(TdT介导的dUTP切口末端标记)分析、ISEL(原位末端标记)和用于在细胞群体或单个细胞中检测DNA断裂的DNA阶梯分析、测量质膜改变的膜联蛋白-V分析、诸如p53和Fas等凋亡相关蛋白质的检测。
基于细胞的试验通常如下进行:将靶细胞(例如,在?#22028;?#22522;中)暴露于为可能的RTK选择性抑制剂或PI3-激酶α抑制剂的测试化合物,然后再对研究中的读取信息进行分析。根据候选RTK抑制剂或PI3-激酶α抑制剂的性质,可将它们直接加入到细胞中或与载体一起加入。例如,?#24065;?#21058;为核酸时,可通过本领域熟知的方法将其加入到细胞?#22028;?#29289;中,这些方法包括但不限于磷酸钙沉淀、显微注射或电穿孔。或者,可将核酸引入表达载体或插入载体中以供引入细胞中。含有启动子和多核苷酸可有效连接于其中的克隆?#22351;?#30340;载体是本领域熟知的。这些载体能够在体外或体内转录RNA,且可?#21448;?#22914;Stratagene(La Jolla,CA)和Promega  Biotech(Madison,WI)等来源购买。为了优化表达和/或体外转?#36857;?#21487;能有必要去除、增加或改变克隆的5’和/或3’非翻译部分,以消除额外的、潜在的不适合的替代翻译起始密?#33009;?#25110;可能在转录或翻译水平上干扰或减少表达的其他序列。或者,共有核糖体结合?#22351;?#21487;直接插入起始密?#33009;?#30340;5’端来提高表达。载体的实例有病毒如杆状病毒和逆转录酶病毒、噬菌体、腺病毒、腺相关病毒、粘粒、质粒、真菌载体和本领域中通常使用的其他重组载体,已描述了它们在多种真核和原核宿主中的表达,并且它们可用于基因治疗以及简单的蛋白?#26102;?#36798;。其中有几?#22336;?#30149;毒载体,包括DNA/脂质体复合物,和靶向的病?#38236;?#30333;DNA复合物。为了增强向细胞的递送,本发明的核酸或蛋白质可与结合细胞表面抗原的抗体或其结合片段?#21058;?#36824;包含靶向抗体或其片段的脂质体可在本发明的方法中使用。其他生物学上可接受的载体可连同本发明化合物一起使用,包括例如在REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES,第19版.(2000)中所述的那些载体。
本发明的药剂?#37096;?#29992;来抑制细胞中Akt(S473)和Akt(T308)两者的磷酸化。因此,本发明提供了一?#22336;?#27861;,包括使细胞与有效量的这种生物活性剂接触从而使Akt在S473和T308残基处的磷酸化得到同时抑制的步骤。一方面,当在可比较的摩尔浓度下,优选地在相同的摩尔浓度下测试时,生物活性剂对Akt的S473的磷酸化的抑制比对Akt的T308的磷酸化的抑制更有效。
Akt磷酸化的抑制可用本领域已知的或本文描述的任何方法来确定。代表性的试验包括但不限于利用识别特定磷酸化蛋白质的抗体如抗磷酸络氨酸抗体的免疫印迹法和免疫沉淀法。基于细胞的ELISA试剂盒对激活的(在S473处磷酸化的)Akt相对于总Akt蛋白质的量进行定量,这种试剂盒也是可以获得的(SuperArray Biosciences)。
在实施本发明的方法时,可使用任何表达PI3-激酶α、RTK抑制剂的靶RTK和/或Akt的细胞。增殖可得到抑制的特定细胞类型的非限制实例包括?#19978;宋?#32454;胞、骨骼组织(骨和软骨)的细胞、上皮组织(例如肝、肺、乳腺、皮肤、膀胱和肾)的细胞、心脏和平滑肌细胞、神经细胞(神 经胶质和神经元)、内分泌细胞(肾上腺、垂体、胰?#21512;?#32990;)、黑素细胞和许多不同类型的造血细胞(例如,B细胞或T细胞谱系的细胞及其对应的?#19978;?#32990;、成淋巴细胞)。同样?#34892;?#36259;的有表现出肿瘤倾向或表型的细胞。特别?#34892;?#36259;的是差别表达(过度表达或表达不足)致病基因的细胞类型。涉及基因异常功能的疾病类型包括但不限于自身免疫性疾病、癌症、肥胖、高血压、糖尿病、神经元和/或肌肉退行性疾病、心脏疾病、内分泌紊乱及其任意组合。
在一些实施方案中,如在体外激酶试验中所确定的,RTK抑制剂以如下IC50值抑制靶RTK:约1nM、2nM、5nM、7nM、10nM、20nM、30nM、40nM、50nM、60nM、70nM、80nM、90nM、100nM、120nM、140nM、150nM、160nM、170nM、180nM、190nM、200nM、225nM、250nM、275nM、300nM、325nM、350nM、375nM、400nM、425nM、450nM、475nM、500nM、550nM、600nM、650nM、700nM、750nM、800nM、850nM、900nM、950nM、1μM、1.2μM、1.3μM、1.4μM、1.5μM、1.6μM、1.7μM、1.8μM、1.9μM、2μM、5μM、10μM、15μM、20μM、25μM、30μM、40μM、50μM、60μM、70μM、80μM、90μM、100μM、200μM、300μM、400μM或500μM或更低,并且所述IC50值比其针?#36816;?#26377;其他RTK的IC50值至少低2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、100或1000倍。例如,如在体外激酶试验中所确定的,RTK抑制剂以约200、100、75、50、25、10、5、1或0.5nM或更低的IC50值抑制I类RTK。在一种情况下,如在体外激酶试验中所确定的,RTK抑制剂以约100nM或更低的IC50值抑制I类RTK。或者,如在体外激酶试验中所确定的,RTK抑制剂以约10nM或更低的IC50值抑制I类RTK。在另一实例中,如在体外激酶试验中所确定的,RTK抑制剂以约200、100、75、50、25、10、5、1或0.5nM或更低的IC50值抑制EGFR和HER2中的一?#21482;?#22810;种。在一种情况下,如在体外激酶试验中所确定的,RTK抑制剂以约100nM或更低的IC50值抑制EGFR和HER2中的一?#21482;?#22810;种。或者,如在体外激酶试验中所确定的,RTK抑制剂以约10nM或更低的IC50 值抑制EGFR和HER2中的一?#21482;?#22810;种。
在一些实施方案中,本发明提供了RTK抑制剂的应用,其中如在体外激酶试验中所确定的,RTK抑制剂直接结合并以约为或小于预定值的IC50值抑制靶RTK。在一些实施方案中,RTK抑制剂抑制以如下IC50值抑制靶RTK:约1nM或更低、2nM或更低、5nM或更低、7nM或更低、10nM或更低、20nM或更低、30nM或更低、40nM或更低、50nM或更低、60nM或更低、70nM或更低、80nM或更低、90nM或更低、100nM或更低、120nM或更低、140nM或更低、150nM或更低、160nM或更低、170nM或更低、180nM或更低、190nM或更低、200nM或更低、225nM或更低、250nM或更低、275nM或更低、300nM或更低、325nM或更低、350nM或更低、375nM或更低、400nM或更低、425nM或更低、450nM或更低、475nM或更低、500nM或更低、550nM或更低、600nM或更低、650nM或更低、700nM或更低、750nM或更低、800nM或更低、850nM或更低、900nM或更低、950nM或更低、1μM或更低、1.2μM或更低、1.3μM或更低、1.4μM或更低、1.5μM或更低、1.6μM或更低、1.7μM或更低、1.8μM或更低、1.9μM或更低、2μM或更低、5μM或更低、10μM或更低、15μM或更低、20μM或更低、25μM或更低、30μM或更低、40μM或更低、50μM或更低、60μM或更低、70μM或更低、80μM或更低、90μM或更低、100μM或更低、200μM或更低、300μM或更低、400μM或更低或500μM或更低。
在一些实施方案中,RTK抑制剂以如下IC50值抑制靶RTK:约1nM或更低、2nM或更低、5nM或更低、7nM或更低、10nM或更低、20nM或更低、30nM或更低、40nM或更低、50nM或更低、60nM或更低、70nM或更低、80nM或更低、90nM或更低、100nM或更低、120nM或更低、140nM或更低、150nM或更低、160nM或更低、170nM或更低、180nM或更低、190nM或更低、200nM或更低、225nM或更低、250nM或更低、275nM或更低、300nM或更低、325nM或更低、350nM或更低、375nM或更低、400nM或更低、425nM或更 低、450nM或更低、475nM或更低、500nM或更低、550nM或更低、600nM或更低、650nM或更低、700nM或更低、750nM或更低、800nM或更低、850nM或更低、900nM或更低、950nM或更低、1μM或更低、1.2μM或更低、1.3μM或更低、1.4μM或更低、1.5μM或更低、1.6μM或更低、1.7μM或更低、1.8μM或更低、1.9μM或更低、2μM或更低、5μM或更低、10μM或更低、15μM或更低、20μM或更低、25μM或更低、30μM或更低、40μM或更低、50μM或更低、60μM或更低、70μM或更低、80μM或更低、90μM或更低、100μM或更低、200μM或更低、300μM或更低、400μM或更低或500μM或更低,且RTK抑制剂对选自PI3-激酶α、PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的一?#21482;?#22810;种I型PI3-激酶基本上无活性。在一些实施方案中,如在体外激酶试验中所确定的,RTK抑制剂以约10nM或更低的IC50值抑制靶RTK,并且RTK抑制剂对选自PI3-激酶α、PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的一?#21482;?#22810;种I型PI3-激酶基本上无活性。
如本文使用的,术语“基本上无活性”是指这样一种抑制剂:如通过体外酶测定法(例如,体外激酶试验)所确定的,其对其靶标的活性的抑制小于在不存在该抑制剂时最大活性的约1%、5%、10%、15%或20%。
在其他实施方案中,如在体外激酶试验中所确定的,RTK抑制剂以约1000、500、100、75、50、25、10、5、1或0.5nM或更低的IC50值抑制靶RTK,并且所述IC50值比其针对选自PI3-激酶α、PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的所有I型PI3激酶的IC50值至少低2、5、10、15、20、50、100或1000倍。例如,如在体外激酶试验中所确定的,RTK抑制剂以约100nM或更低的IC50值抑制靶RTK,并且所述IC50值比其针对选自PI3-激酶α、PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的所有其他I型PI3-激酶的IC50值至少低5倍。
在一些实施方案中,如在体外激酶试验中所确定的,RTK抑制剂以约100nM或更低的IC50值抑制I类RTK,并且所述IC50值比其针对选自PI3-激酶α、PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的所有I型PI3-激酶的IC50值至少低5倍。在一些实施方案中,如在体外激酶试验中 所确定的,RTK抑制剂以约100nM或更低的IC50值抑制EGFR和HER2中的一?#21482;?#22810;?#37073;?#24182;且所述IC50值比其针对选自PI3-激酶α、PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ的所有I型PI3-激酶的IC50值至少低5倍。
在一些实施方案中,如在体外激酶试验中所确定的,本发明方法中使用的RTK抑制剂以约1000、500、100、75、50、25、10、5、1或0.5nM或更低的IC50值选择性地抑制EGFR和HER2中的一?#21482;?#22810;种。例如,如在体外激酶试验中所确定的,在本发明的方法中使用的RTK抑制剂以约1000、500、100、75、50、25、10、5、1或0.5nM或更低的IC50值选择性地抑制HER2。例如,已表明曲妥珠单抗和曲妥珠单抗衍生物或类似物主要结合至HER2而非EGFR。在另一实例中,如在体外激酶试验中所确定的,在本发明方法中使用的RTK抑制剂以约1000、500、100、75、50、25、10、5、1或0.5nM或更低的IC50值选择性地抑制HER2和EGFR两者。例如,已表明拉帕替尼和拉帕替尼衍生物或类似物主要抑制HER2和EGFR两者。在另一实例中,如在体外激酶试验中所确定的,在本发明方法中使用的RTK抑制剂以约1000、500、100、75、50、25、10、5、1或0.5nM或更低的IC50值选择性地抑制EGFR。合适的EGFR抑制剂化合物包括,例如埃罗替尼、吉非替尼、凡他尼布或它们的类似物或衍生物。在一些实施方案中,受体酪氨酸激酶抑制剂是HER2/neu的抑制剂,包括但不限于阿法替尼、拉帕替尼和萘拉替尼。
适用于本发明方法中的PI3-激酶α抑制剂或RTK抑制剂可选自多种类型的分子。例如,抑制剂可以是生物或化学化合物,如简单或复杂的有机或无机分子、肽、肽模拟物、蛋白质(例如抗体)、脂质或多核苷酸(例如小干扰RNA、微小RNA、反义物、适体、核酶或三股螺旋)。
细胞靶标的选择性抑制作为治疗由该靶标介导的疾病状况的方法的优势是多方面的。因为健康细胞?#35272;?#20110;癌症中激活的信号传导途径得?#28304;?#27963;,所以在癌症治疗过程中对这些途径的抑制会导致有害的副作用。为使治疗癌症的方法获得成功而不对健康细胞产生过多损害,需要针对一?#21482;?#22810;种异常信号传导组分的极高度的特异性。此外,癌细胞可?#35272;?#20110;过度活跃的信号传导得?#28304;?#27963;(称为癌基因?#31070;?#24615;假说)。以这种 方式,频繁地观察到癌细胞通过针对克服药物效果的相同途径中的突变进行选择而适应药物对异常信号传导组分的抑制。因此,如果癌症治疗针对整个信号传导途径,或针对信号传导途径内的多于一种组分,则其可能更成功地克服抗药性的问题。
不受理论的束缚,对PI3-激酶α的选择性抑制对由PI3-激酶介导的疾病状况提供了更具针对性的治疗,而不破坏一?#21482;?#22810;?#21046;?#20182;I型磷脂酰肌醇3-激酶(即PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ)所涉及的一个或多个途径。
一些含有PI3K和RTK的信号传导途径在图1中示出。PI3K和RTK信号传导的一种主要下游效应物为Akt丝氨酸/苏氨酸激酶。Akt具有被称为PH结构域或血小板白细胞C激酶底物同源性结构域(Pleckstrin Homology domain)的蛋白质结构域,该结构域以高亲和力结合至磷酸肌?#32908;?#33267;于Akt的PH结构域,其结合PIP3(磷脂酰肌醇(3,4,5)-三磷酸,PtdIns(3,4,5)P3)或PIP2(磷脂酰肌醇(3,4)-二磷酸,PtdIns(3,4)P2)。PI3K响应于来自化学信使(如结合至G蛋?#30528;剂?#21463;体或受体酪氨酸激酶的配体)的信号使PIP2磷酸化。通过PI3K的磷酸化将PIP2转化成PIP3,从而将Akt?#25216;?#21040;细胞膜,在细胞膜处,它被mTORC2在丝氨酸473(S473)处磷酸化。
本发明的方法对治疗与PI3-激酶α和/或RTK相关的疾病状况是有用的。由PI3-激酶α和/或RTK的异常活性或表达水平直接或间接导致的任何疾病状况可以是预期的疾病状况。
已报道了与PI3-激酶α和/或RTK相关的大量疾病状况。PI3-激酶α例如与多种人类癌症有关。已经证明,在内皮细胞迁移的控制中,血管发生选择性地需要PI3K的α同种型。(Graupera等人,Nature2008;453;662-6)。据认为,编码PI3Kα的基因中的突变或导致PI3Kα上调的突变发生于许多人类癌症中,如肺癌、胃癌、子宫内膜癌、卵巢癌、膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、脑癌和皮肤癌。通常,编码PI3Kα的基因中的突变是在螺旋和激酶结构域中的几个热点内聚集的点突变,如E542K、E545K和H1047R。已经证明,许多这样的突变是致癌的功能 获得性突变。由于PI3Kα的高突变?#21097;?#38774;向这一途径可提供宝贵的治疗机会。虽然其他的PI3K同种型如PI3Kδ或PI3Kγ主要在造血细胞中表达,但是PI3Kα与PI3Kβ为组成型表达的。
与PI3-激酶α和/或RTK相关的疾病状况的特征?#37096;?#22312;于PI3-激酶α的下游信使的异常高水平的活性和/或表达。例如,诸如PIP2、PIP3、PDK、Akt、PTEN、PRAS40、GSK-3?#38534;21、p27等蛋白质或信使可能以异常量存在,该异常量可通过本领域已知的任何试验来测定。
作为信号转导途径的主要生长因子受体和启动剂,RTK的失调是众多人类疾病中的共同主题,因此靶向这些RTK的药物具有治疗价值。例如,II类RTK信号传导(胰?#26680;?#21463;体家族)的失调可导致2型糖尿病。可由RTK(如I类RTK)的失调导致的疾病的其他非限制性实例包括神经变性疾病如多发性硬化症和阿尔兹海默病以及多种癌症。通常,RTK的过表达或过度激活导致PI3K/Akt途径的激活增强,这可通过使用RTK抑制剂来?#26723;汀I3K/Akt途径在许多癌症中被激活。激活的Akt通过使蛋白质如BAD、FOXO、NF-KB、p21Cip1、p27Kipl、GSK3β等磷酸化来调节细胞存活、细胞增殖和代谢。Akt?#37096;?#36890;过使TSC2磷酸化来促进细胞生长。Akt激活有可能通过共同地促进生长、增殖和存活来促进细胞转化和对凋亡的抗性,同时抑制凋亡途径。RTK的抑制剂以及PI3-激酶α抑制剂的组合对治疗具有提高的Akt磷酸化的肿瘤是有益的,并且应下调细胞生长、细胞存活和细胞增殖。
需要时,在治疗前用诊断分析检测待治疗的受试者,以确定肿瘤细胞对PI3Kα激酶抑制剂的敏感性。可使用本领域已知的可确定受试者的肿瘤细胞对PI3Kα激酶抑制剂的敏感性的任何方法。在治疗前使用诊断分析检测受试者以确定肿瘤细胞对PI3Kα激酶抑制剂的敏感性的情况下,在一个实施方案中,当受试者被确定为其肿瘤细胞预计对作为单一药剂的PI3Kα激酶抑制剂具有低敏感性,但可能在RTK抑制剂的存在下表现出增强的敏感性(反之亦然)时,同时或相继地向受试者施用治疗有效量的PI3Kα激酶抑制剂和RTK抑制剂的组合。在另一实施方案中,当受试者被确定为其肿瘤细胞预计对作为单一药剂的PI3Kα激酶抑制剂 具有高敏感性,但基于本文所述的结果?#37096;?#33021;在RTK抑制剂的存在下表现出增强的敏感性时,同时或相继地地向受试者施用治疗有效量的PI3Kα激酶抑制剂和RTK抑制剂的组合。在这些方法中,可考虑关于受试者对PI3Kα激酶抑制剂和RTK抑制剂组合的可能?#20174;?#24615;的预测,并结合关于受试者个体的任何其他情况,根据给药医师的?#23454;?#21028;?#24076;?#21516;时或相继地共同施用一?#21482;?#22810;种额外的抗癌剂或治疗以及PI3Kα激酶抑制剂和RTK抑制剂。
因此,在一些实施方案中,本发明提供了一?#22336;?#27861;,其包括:(a)确定受试者中与由PI3-激酶?#20004;?#23548;的疾病状况相关的PI3-激酶α突变的存在;和(b)向所述受试者施用本发明的药物组合物。
在另一实施方案中,本发明提供了一种抑制细胞中Akt(S473)和/或Akt(T308)的磷酸化的方法,包括使细胞与有效量的PI3-激酶α抑制剂和RTK抑制剂接触,例如,如通过基于细胞的试验或体外激酶试验所确定的,相对于一?#21482;?#22810;种I型磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-激酶)选择性地抑制HER2和EGFR两者的活性的生物活性剂,其中该PI3-激酶α抑制剂展示出通过体外激酶试验确定的、相对于一?#21482;?#22810;种I型磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-激酶)对PI3-激酶α的选择性抑制,其中该一?#21482;?#22810;种I型PI3-激酶选自PI3-激酶?#38534;I3-激酶γ和PI3-激酶δ。
在本文下面的实施例中呈现的数据表明,RTK抑制剂和PI3Kα抑制剂组合的抗肿瘤效果优于任一种抑制剂本身的抗肿瘤效果,并且RTK抑制剂与PI3Kα抑制剂的共同施用对治疗与PI3-激酶α和/或RTK相关的肿瘤病状可能是有效的。这些病状的非限制性实例包括但不限于棘皮瘤、腺泡细胞癌、听神经瘤、肢端着色斑性黑素瘤、顶端螺旋瘤、急性?#20154;?#31890;细胞白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性巨核母细胞白血病、急性单核细胞白血病、急?#36816;?#27597;细胞性白血病伴成熟、急?#36816;?#26679;树突状细胞白血病、急?#36816;?#26679;白血病、急性早幼粒细胞白血病、釉质瘤、腺癌、腺样囊性癌、腺瘤、牙源性腺瘤样瘤、肾上腺皮质癌、成人T-细胞白血病、侵袭性NK-细胞白血病、AIDS相关癌症、AIDS相关淋巴瘤、软组织腺泡状肉瘤、成釉细胞?#23435;?#30244;、肛门癌、间变?#28304;?#32454;胞淋巴 瘤、间变性甲状腺癌、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤、血管肌脂瘤、血管肉瘤、阑尾癌、星形细胞瘤、非典型畸胎样杆状瘤、基底细胞癌、基底样癌、B细胞白血病、B细胞淋巴瘤、Bellini导管癌、胆道癌、膀胱癌、胚细胞瘤、?#21069;?#39592;肿瘤、脑干神经胶质瘤、脑肿瘤、乳腺癌、Brenner肿瘤、支气管肿瘤、细支气管肺泡癌、棕色瘤、伯基特淋巴瘤、原发部位未知的癌症、类癌瘤、癌、原位癌、阴茎癌、原发部位未知的癌、癌肉瘤、Castleman病、中枢神经?#20302;?#32986;胎瘤、小脑星形细胞瘤、大脑星形细胞瘤、子宫颈癌、胆管上皮癌、软骨瘤、软骨肉瘤、脊索瘤、绒毛膜癌、脉络丛乳头状瘤、慢性淋巴细胞性白血病、慢性单核细胞性白血病、慢?#36816;?#24615;白血病、慢性骨髓增生性疾病、慢性嗜中性白细胞白血病、透明细胞肿瘤、结肠癌、结直肠癌、颅?#20351;?#30244;、皮肤T细胞淋巴瘤、德戈斯病、隆凸性皮肤?#23435;?#32905;瘤、皮样?#25233;住?#32467;缔组织增生性小圆细胞肿瘤、?#33268;源驜细胞淋巴瘤、胚胎发育不良性神经上皮肿瘤、胚胎性癌、内胚层?#21058;觥?#23376;宫内膜癌、子宫内膜子宫癌、子宫内膜样肿瘤、肠病相关的T细胞淋巴瘤、室管膜母细胞瘤、室管膜瘤、上皮样肉瘤、红白血病、食道癌、成感觉神经细胞瘤、尤因家族肿瘤、尤因家族肉瘤、尤因肉瘤、颅外胚细胞瘤、性腺外生殖细胞肿瘤、肝外胆管癌、乳腺外佩吉特病、输卵管癌、胎内胎、?#23435;?#30244;、?#23435;?#32905;瘤、滤泡性淋巴瘤、滤泡性甲状腺癌、胆囊癌、胆囊癌、神经节神经胶质瘤、神经节瘤、胃癌、胃淋巴瘤、胃肠癌、胃肠类癌瘤、胃肠间质瘤、胃肠道间质瘤、胚细胞瘤、生殖细胞瘤、妊娠性绒毛膜癌、妊娠?#33796;?#32454;胞肿瘤、骨巨细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、神经胶质瘤、大脑神经胶质瘤病、血管球瘤、胰高血糖素瘤、性腺母细胞瘤、粒层细胞瘤、多毛细胞白血病、毛细胞白血病、头颈癌、头颈部癌、心脏癌、血管母细胞瘤、血管外皮细胞瘤、血管肉瘤、血?#21512;低?#24694;性肿瘤、肝细胞癌、肝脾T细胞淋巴瘤、遗传性乳腺-卵巢癌综合征、霍奇金淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤、下咽癌、下丘神经胶质瘤、炎性乳腺癌、眼内黑素瘤、胰?#21512;?#32990;癌、胰?#21512;?#32990;瘤、幼年粒单核细胞白血病、卡波西肉瘤、卡波西?#20808;?#30244;、肾癌、Klatskin瘤、Krukenberg瘤、喉癌、喉癌、恶性雀斑样黑素瘤、白血病、白血病、唇 及口腔癌、脂肪肉瘤、肺癌、黄体瘤、淋巴管瘤、淋巴管肉瘤、淋巴上皮瘤、淋巴样白血病、淋巴瘤、巨球蛋白血症、恶性?#23435;?#32452;织细胞瘤、恶性?#23435;?#32452;织细胞瘤、骨恶性?#23435;?#32452;织细胞瘤、恶性神经胶质瘤、恶性间皮瘤、恶性周边神经鞘瘤、恶性杆状瘤、恶性蝾螈瘤、MALT淋巴瘤、外套细胞淋巴瘤、肥大细胞白血病、纵?#32671;?#32986;细胞瘤、纵隔肿瘤、甲状腺髓样癌、髓母细胞瘤、髓母细胞瘤、髓上皮瘤、黑素瘤、黑素瘤、脑膜瘤、Merkel细胞癌、间皮瘤、间皮瘤、原发灶隐匿的转移性鳞状颈癌、转移性尿路上皮癌、混合型Mullerian肿瘤、单核细胞性白血病、口腔癌、黏液瘤、多发性内分泌瘤综合征、多发性骨髓瘤、多发性骨髓瘤、蕈样真菌病、蕈样真菌病、骨髓发育不良疾病、骨髓增生异常综合征、髓样白血病、髓样肉瘤、骨髓增生性疾病、黏液瘤、鼻腔癌、鼻咽癌、鼻咽癌、赘瘤(Neoplasm)、神经鞘瘤、神经母细胞瘤、神经母细胞瘤、神经?#23435;?#30244;、神经瘤、结节性黑素瘤、非霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、非黑素瘤皮肤癌、非小细胞肺癌、眼部肿瘤、寡星形细胞瘤、少突神经胶质瘤、?#20154;?#31890;细胞腺瘤、视神经鞘脑膜瘤、口癌、口癌、口咽癌、骨肉瘤、骨肉瘤、卵巢癌、卵巢癌、卵巢上皮癌、卵巢生殖细胞肿瘤、卵巢低潜在恶性肿瘤、乳房佩吉特病、?#19997;?#26031;特肿瘤、胰腺癌、胰腺癌、乳头状甲状腺癌、乳头状瘤病、副神经节瘤、鼻?#21450;?#30002;状旁腺癌、阴茎癌、血管外周上皮样细胞肿瘤、咽癌、嗜铬细胞瘤、?#26800;确只?#30340;松果体实质肿瘤、松果体母细胞瘤、垂体细胞瘤、垂体腺瘤、垂体肿瘤、浆细胞赘瘤、胸膜?#25991;?#32454;胞瘤、多胚瘤、前驱T淋巴母细胞性淋巴瘤、原发性中枢神经?#20302;沉?#24052;瘤、原发性渗出性淋巴瘤、原发性肝细胞癌、原发性肝癌、原发性腹膜癌、原发性神经外胚层瘤、前列腺癌、腹膜假黏液瘤、直肠癌、肾细胞癌、涉及染色体15上的NUT基因的呼吸道癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌瘤、横纹肌肉瘤、Richter转化(Richter's transformation)、骶?#19981;?#32974;瘤、唾?#21512;?#30284;、肉瘤、神经鞘瘤病(Schwannomatosis)、皮脂腺癌、继发性赘瘤、精原细胞瘤、浆液性肿瘤、塞-莱细胞瘤、?#36816;?间质瘤、赛泽里综合征、印戒细胞癌(Signet ring cell carcinoma)、皮肤癌、小蓝色圆细胞肿瘤、小细胞癌、小细胞肺癌、小 细胞淋巴瘤、小肠癌、软组织肉瘤、生长抑素瘤、煤烟疣、脊髓肿瘤、脊椎肿瘤、脾边缘区淋巴瘤、鳞状细胞癌、胃癌、浅表扩散性黑素瘤、幕上原发性神经外胚层瘤、表面上皮-间质瘤、滑膜肉瘤、T细胞急性淋巴母细胞性白血病、T细胞大?#24085;?#28107;巴细胞白血病、T细胞白血病、T细胞淋巴瘤、T细胞幼淋巴细胞性白血病、畸胎瘤、晚期淋巴癌、?#21644;?#30284;、泡膜细胞瘤、喉癌、胸腺癌、胸腺瘤、甲状腺癌、肾盂及输尿管移行细胞癌、移行细胞癌、脐尿管癌、尿道癌、泌尿生殖?#20302;持?#30244;、子宫肉瘤、眼色素层黑素瘤、阴道癌、弗-莫综合征、疣状癌、视路神经胶质瘤、外阴癌、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、Warthin瘤、Wilms瘤或其任意组合。
在其他实施方案中,本文所述的使用PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂的方法用于治疗心脏状况,包括动脉粥样硬化、心脏肥大、心脏肌细胞功能?#20064;?#34880;压升高和血管收缩。本发明还涉及治疗哺乳动物中与血管发生或血管生?#19978;?#20851;的疾病的方法,包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的本发明的PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂,或其任?#25105;?#23398;上可接受的盐、酯、前药、溶剂化物、水合物或衍生物。
在一些实施方案中,所述方法用于治疗选自下组的疾病:肿瘤血管发生、诸如类风湿关节炎的慢性炎性疾病、动脉粥样硬化、炎性肠病、诸如银?#30142; ?#28287;疹和硬皮病的皮肤病、糖尿病、糖尿病性视网膜病变、早产儿视网膜病变、年龄相关性黄斑变性、血管瘤、神经胶质瘤、黑素瘤、卡波西肉瘤和卵巢癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、结肠癌和表皮样癌。
在一些实施方案中,本发明提供了PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂在治疗与PI3-激酶α和/或RTK相关的疾病状况中的用途,该疾病状况包括但不限于与哺乳动物中不良的、活动过度的、有害的或有毒的免疫应答有关的病状,统称为“自身免疫性疾病?#34180;?#33258;身免疫性疾病包括但不限于克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、银?#30142; ?#38134;?#30142;?#20851;节炎、幼年型关节炎和强直性脊柱炎。自身免疫性疾病的其他非限制性实例包括自身免疫型糖尿病、多发性硬化症、?#20302;?#24615;红斑狼疮(SLE)、类风湿性脊椎炎、痛风 性关节炎、变态?#20174;Α?#33258;身免疫性葡萄膜炎、肾病综合征、多?#20302;?#24615;自身免疫病、自身免疫性听力丧失、成人呼吸窘迫综合征、休克肺、慢性肺部炎性疾病、肺结节病、肺?#23435;?#21270;、矽肺、特发性间质性肺病、慢性阻塞性肺病、哮喘、再狭窄、脊椎关节病、赖特尔综合征、自身免疫性肝炎、炎症性皮肤病、大血管血管炎、中血管血管炎或小血管血管炎、子宫内膜异位症、前列腺炎和舍格伦综合征(Sjogren's syndrome)。不希望的免疫应答?#37096;?#20197;相关于或导致,例如,哮喘、肺气肿、支气管炎、银?#30142; ?#21464;态?#20174;Α?#36807;敏?#20174;Α?#33258;身免疫性疾病、类风湿关节炎、移植物抗宿主病、移植排斥、肺损伤和红斑狼疮。本发明的药物组合物可以用于治疗其他呼吸?#20302;?#30142;病,包括但不限于影响?#25105;丁?#33016;膜腔、小支气管、气管、上呼吸道或用于呼吸的神经和肌肉的疾病。本发明的组合物可以进一步用于治疗多器官衰竭。
本发明?#22266;?#20379;了使用PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂来治疗哺乳动物中的肝脏疾病(包括糖尿病)、胰腺炎或肾脏疾病(包括增生性肾小球肾炎和糖尿病诱发的肾脏疾病)或疼痛的方法。
本发明?#22266;?#20379;了使用PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂来治疗精子能动性的方法。本发明进一步提供了使用PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂来治疗包括但不限于阿尔茨海默病、亨延顿病、中枢神经?#20302;?#21019;伤和中风的神经性或神经退行性疾病的方法。
本发明进一步提供了使用PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂来预防哺乳动物中的胚细胞植入的方法。
本发明还涉及使用PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂来治疗哺乳动物中与血管发生或血管生?#19978;?#20851;的疾病的方法,该疾病可表?#27835;?#32959;瘤血管发生、诸如类风湿关节炎的慢性炎性疾病、炎性肠病、动脉粥样硬化、诸如银?#30142; ?#28287;疹和硬皮病的皮肤病、糖尿病、糖尿病性视网膜病变、早产儿视网膜病变、年龄相关性黄斑变性、血管瘤、神经胶质瘤、黑素瘤、卡波西肉瘤和卵巢癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、结肠癌和表皮样癌。
本发明进一步提供了使用PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂来治疗涉及 血小板聚集或血小板粘附的病症的方法,该病症包括但不限于Bernard-Soulier综合征、格?#30002;?#26364;血小板机能不全、Scott综合征、血管性血友病、Hermansky-Pudlak综合征和灰色血小板综合征。
在一些实施方案中,提供了使用PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂来治疗疾病的方法,该疾病为骨骼肌萎缩、骨骼肌肥大、癌组织中的白细胞?#25216;?#20405;袭转移、黑素瘤、卡波西肉瘤、急性和慢性细菌和病毒感染、脓?#23616;ⅰ?#32958;小球硬化症、肾小球肾炎或进行性肾脏?#23435;?#21270;。
某些实施方案涉及人类受试者,诸如已诊断为患有与PI3-激酶α和/或RTK相关的疾病状况或处于发展或罹患该疾病状况的风险中的受试者。某些其他实施方案涉及非人类受试者,例如非人灵长类动物,诸如猕猴、黑?#23578;傘?#22823;?#23578;傘?#38271;尾黑颚猴、?#23578;傘?#29394;狒或其他非人灵长类动物,包括本领域可知作为临床前模型(包括炎性疾病的临床前模型)的非人类受试者。某些其他实施方案涉及为哺乳动物的非人类受试者,例如小鼠、大鼠、兔子、猪、?#22028;頡?#39532;、牛、山羊、沙鼠、?#36136;蟆?#35930;鼠或其他哺乳动物。还考虑了其他实施方?#31119;?#20854;中受试者或生物来源可以是非哺乳类脊椎动物,例如另一高等脊椎动物,或禽类、两栖动物或爬行动物物?#37073;?#25110;另一受试者或生物来源。在本发明的某些实施方案中使用了转基因动物。转基因动物为非人类动物,其中该动物的一个或多个细胞含有这样的核酸:该核酸为非内源性的(即异源性的),且作为其细胞的一部分中的染色体外元件存在,或者稳定地整合至其种系DNA中(即,多数或全部细胞的基因组序列中)。
示例性的RTK抑制剂化合物
本发明的方法可与任何靶向、?#26723;?#25110;抑制任何靶RTK活性的RTK抑制剂一起使用。在一个实施方案中,靶RTK可以是受体酪氨酸激酶的I类RTK表皮生长因子家族的成员(作为同型二聚体或异二聚体的EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4)及其突变体。靶向、?#26723;?#25110;抑制表皮生长因子受体家族的活性的化合物特别是抑制EGF受体酪氨酸激酶家族的成员(例如,EGF受体、HER2/ErbB2、HER3/ErbB3和HER4/ErbB4)或结合至EGF或EGF相关配体的化合物、蛋白质或抗体,并且尤其是 在WO97/02266(例如,实施例39的化合物)或在EP0564409、WO99/03854、EP0520722、EP0566226、EP0787722、EP0837063、US5,747,498、WO98/10767、WO97/30034、WO97/49688、WO97/38983且尤其是WO96/30347(例如,称为CP358774的化合物)、WO96/33980(例如,化合物ZD1839)和WO95/03283(例如,化合物ZM105180)中一般性?#36884;?#20307;公开的那些化合物、蛋白质或单克隆抗体;例如,曲妥珠单抗(HerceptinTM)、西妥昔单抗(ErbituxTM)、易瑞沙(Iressa)、特罗凯(Tarceva)、OSI-774、Cl-1033、EKB-569、GW-2016、E1.1、E2.4、E2.5、E6.2、E6.4、E2.11、E6.3或E7.6.3和在WO03/013541中公开的7H-?#37327;?#24182;-[2,3-d]嘧啶衍生物。其他合适的EGFR家族抑制剂包括拉帕替尼、萘拉替尼、阿法替尼、埃罗替尼、吉非替尼。
在其他实施方案中,RTK抑制剂可以?#21069;?#21521;、?#26723;?#25110;抑制c-Met受体活性的化合物,如靶向、?#26723;?#25110;抑制c-Met活性的化合物,尤其是抑制c-Met受体的激酶活性的化合物或靶向c-Met的胞外域或结合至HGF的抗体。
合适的RTK抑制剂化合物的其他实例包括但不限于靶向、?#26723;?#25110;抑制血小板衍生生长因子受体(PDGFR)的活性的化合物,如靶向、?#26723;?#25110;抑制PDGFR活性的化合物,尤其是抑制PDGF受体的化合物,例如,N-苯基-2-嘧啶胺的衍生物,例如,伊马替尼、SU101、SU6668和GFB-111;靶向、?#26723;?#25110;抑制?#19978;宋?#32454;胞生长因子受体(FGFR)的活性的化合物;靶向、?#26723;?#25110;抑制胰?#26680;?#26679;生长因子受体I(IGF-IR)的活性的化合物,如靶向、?#26723;?#25110;抑制IGF-IR活性的化合物,尤其是抑制IGF-I受体的激酶活性的化合物,如在WO02/092599中公开的那些化合物或如OSI906,或靶向IGF-I受体的胞外域的抗体,如CP-751871、R1507、AVE1642、IMC-A12、AMG479、MK-0646、SCH717454或其生长因子;靶向、?#26723;?#25110;抑制Trk受体酪氨酸激酶家族活性的化合物,如来妥替尼(CEP-701)或肝配蛋白B4抑制剂;靶向、?#26723;?#25110;抑制AxI受体酪氨酸激酶家族的活性的化合物;靶向、?#26723;?#25110;抑制Ret受体酪氨酸激酶的活性的化合物;靶向、?#26723;?#25110;抑制Kit/SCFR受体酪氨酸激酶的活性的化合物,例如, 伊马替尼;靶向、?#26723;?#25110;抑制C-kit受体酪氨酸激酶(PDGFR家族的一部分)的活性的化合物,如靶向、?#26723;?#25110;抑制c-Kit受体酪氨酸激酶家族的活性的化合物,尤其是抑制c-Kit受体的化合物,例如,伊马替尼;靶向、?#26723;?#25110;抑制c-Abl家族的成员、它们的基因融合产物(例如,BCR-AbI激酶)和突变体的活性的化合物,如靶向、?#26723;?#25110;抑制c-Abl家族成员和它们的基因融合产物的活性的化合物,例如,N-苯基-2-嘧啶?#36153;?#29983;物,例如,伊马替尼或尼罗替尼(AMN107);PD180970;AG957;NSC680410;来自ParkeDavis的PD173955;或达?#31243;?#23612;(BMS-354825);靶向、?#26723;?#25110;抑制丝氨酸/苏氨酸激酶的蛋白激酶C(PKC)和Raf家族的成员,MEK、SRC、JAK、FAK、PDK1、PKB/Akt和Ras/MAPK家族的成员,和/或周期蛋白?#35272;?#24615;激酶家族(CDK)的成员的化合物,尤其是在US5,093,330中公开的星形孢菌素衍生物,例如米哚妥?#37073;?#26356;多的化合物的实例包括,例如,UCN-01、沙芬戈、BAY43-9006、苔藓抑素1、哌立福?#31890;灰?#33707;福新(llmofosine);RO318220和RO320432;GO6976;Isis3521;LY333531/LY379196;异喹啉化合物,如在WO00/09495中公开的那些异喹啉化合物;FTIs;PD184352或QAN697(一种P13K抑制剂)或AT7519(CDK抑制剂);靶向、?#26723;?#25110;抑制蛋白质-酪氨酸激酶抑制剂活性的化合物,如靶向、?#26723;?#25110;抑制蛋白质-酪氨酸激酶抑制剂活性的化合物包括甲磺酸伊马替尼(格列卫(GLEEVEC))或酪氨酸磷酸化抑制剂。酪氨酸磷酸化抑制剂优选地是低分子量(Mr<1500)化合物,或其药学上可接受的盐,尤其是选自苯亚甲基丙二腈类或S-芳基苯丙二腈或双基质(bisubstrate)喹啉类化合物,更特别的是任何选自下组的化合物:酪氨酸磷酸化抑制剂A23/RG-50810;AG99;酪氨酸磷酸化抑制剂AG213;酪氨酸磷酸化抑制剂AG1748;酪氨酸磷酸化抑制剂AG490;酪氨酸磷酸化抑制剂B44;酪氨酸磷酸化抑制剂B44(+)对映异构体;酪氨酸磷酸化抑制剂AG555;AG494;酪氨酸磷酸化抑制剂AG556、AG957和adaphostin(4-{[(2,5-二羟苯基)甲基]氨基}-苯甲酸金刚烷基酯;NSC680410,adaphostin)。
在一些实施方案中,RTK抑制剂是III类受体酪氨酸激酶(包括 C-kit或PDGFR)的抑制剂。例如,RTK抑制剂可以?#21069;?#26132;替尼、帕唑帕尼、奎扎替尼(quizartinib)、舒尼替尼、索拉非尼或?#24418;?#23612;布。在其他实施方案中,RTK抑制剂是VEGFR的抑制剂,如阿昔替尼、西地尼布、帕唑帕尼、瑞戈非尼、司马尼布、索拉非尼、舒尼替尼、替沃扎尼(tivozanib)、?#24418;?#23612;布或凡他尼布。
在一些方面,RTK抑制剂可以是治疗性抗体。可与本发明的化合物联合的治疗性抗体包括但不限于抗受体酪氨酸激酶抗体(西妥昔单抗、帕尼单抗、曲妥珠单抗)、抗CD20抗体(利妥昔单抗、?#24418;?#33707;单抗)和其他抗体如阿仑珠单抗、贝伐珠单抗和吉妥珠单抗。
示例性的PI3Kα抑制剂化合物
一方面,本发明提供了一种PI3Kα抑制剂,其为式I的化合物:

或其药学上可接受的盐,其中:
W1'为N、NR3'或CR3';W2'为N、NR4'、CR4'或C=O;W3'为N、NR5'或CR5';W4'为N,其中没有超过两个N原子且没有超过两个C=O基团相邻;
W5'为N;
W6'为N或CR8';
Wa'和Wb'独立地为N或CR9';
Wc'和Wd'中的一个是N,而另一个是O、NR10'或S;
R1'和R2'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、 硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;
R3'和R4'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;或者R3'和R4'一起形成环状部分;
R5'、R6'、R7'和R8'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;
R9'为烷基或卤代;且
R10'为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分。
例如,本发明提供了一种PI3Kα抑制剂,其为式I的化合物:

或其药学上可接受的盐,其中:
X为O或S或N;
W1'为N、NR3'、CR3'或C=O,W2'为N、NR4'、CR4'或C=O,W3'为N、NR5'或CR5',W4'为N、C=O或CR6',其中没有超过两个N原子且没有超过两个C=O基团相邻;
W5'为N或CR7';
W6'为N或CR8';
R1'和R2'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;
R3'和R4'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分;
或者R3'和R4'一起形成环状部分;且
R5'、R6'、R7'和R8'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR′R″,其中R′和R″与氮一起形成环状部分。
在一些实施方案中,式II化合物以互变异构体存在,并?#20918;?#21457;明涉及这些互变异构体。
在一些实施方案中,式II化合物具有下式:

例如,式II化合物是:

在式II化合物的一些实施方案中,W1'为CR3',W2'为CR4',W3'为CR5'、W4'为N,W5'为CR7',且W6'为CR8';W1'为N、W2'为CR4',W3'为CR5',W4'为N,W5'为CR7',且W6'为CR8';或W1'为CR3',W2'为N,W3'为CR5',W4'为N,W5'为CR7',且W6'为CR8'。这些实施方案的通 式如?#28388;?#31034;:

在一些实施方案中,X为O。在其他实施方案中,X为S。
在一些实施方案中,R1'为氢。在其他实施方案中,R1'为烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。
在一些实施方案中,R2'为氢。在其他实施方案中,R2'为,例如,未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在其他实施方案中,R2'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R2'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R2'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R2'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R2'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、 吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。本发明?#22266;?#20379;这样的化合物,其中R2'为未取代的或取代的杂芳基烷基,包括但不限于连接到烷基的如上所述的单环和双环杂芳基,该烷基又包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基。在一些实施方案中,R2'为未取代的或取代的环烷基(包括但不限于环丙基、环丁基和环戊基)或未取代的或取代的杂烷基(非限制性实例包括乙氧基甲基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基甲基)。在一些进一步的实施方案中,R2'为未取代的或取代的杂环烷基,其包括但不限于?#37327;?#28919;基、四氢呋喃基、哌啶基、四氢吡喃基、噻唑烷基、咪唑烷基、吗啉基和哌嗪基。在式II化合物的又一些实施方案中,R2'为未取代的或取代的烷氧基,包括但不限于C1-C4烷氧基,如甲氧基、乙氧基、丙氧基或丁氧基。R2'还可以是未取代的或取代的杂环烷氧基,包括但不限于4-NH哌啶-1-基-氧基、4-甲基哌啶-1-基-氧基、4-?#19968;?#21708;啶-1-基-氧基、4-异丙基-哌啶-1-基-氧基和?#37327;?#28919;-3-基-氧基。在其他实施方案中,R2'为未取代的或取代的氨基,其中所述取代的氨基包括但不限于二甲氨基、二乙氨基、二异丙基氨基、N-甲基N-?#19968;?#27688;基和二丁氨基。在一些实施方案中,R2'为未取代的或取代的酰基、未取代的或取代的酰氧基、未取代的或取代的C1-C4酰氧基、未取代的或取代的烷氧羰基、未取代的或取代的酰氨基、或者未取代的或取代的磺酰氨基。在其他实施方案中,R2'是卤代,其为-I、-F、-Cl或-Br。在一些实施方案中,R2'选自氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲和碳酸酯。还考虑R2'为-CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基、庚基、-OCH3、-OCH2CH3或-CF3。
在式II化合物的一些实施方案中,W1'为CR3。R3'可以为,例如,氢、未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在其他实施方案中,R3'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R3'为未取代的或取代的芳基 (包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中该烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R3'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R3'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。本发明?#22266;?#20379;式II化合物,其中R3'为未取代的或取代的杂芳基烷基,包括但不限于连接到烷基的如上所述的单环和双环杂芳基,该烷基又包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基。在一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的环烷基(包括但不限于环丙基、环丁基和环戊基)或未取代的或取代的杂烷基(非限制性实例包括乙氧基甲基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基甲基)。在一些进一步的实施方案中,R3'为未取代的或取代的杂环烷基,其包括但不限于?#37327;?#28919;基、四氢呋喃基、哌啶基、四氢吡喃基、噻唑烷基、咪唑烷基、吗啉基和哌嗪基。在式II化合物的又一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的烷氧基,包括但不限于C1-C4烷氧基,如甲氧基、乙氧基、丙氧基或丁氧基。R3'还可以是未取代的或取代的杂环烷氧基,包括但不限于4-NH哌啶-1-基-氧基、4-甲基哌啶-1-基-氧基、4-?#19968;?#21708;啶-1-基-氧基、4-异丙基-哌啶-1-基-氧基和?#37327;?#28919;-3-基-氧基。在其他实施方案中,R3'为未取代的或取代的氨基,其中所述取代的氨基包括但不限于二甲氨基、二乙氨基、二异丙基氨基、N-甲基N-?#19968;?#27688;基和二丁氨基。在一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的酰基、未取代的或取代的酰氧基、未取代的或取代的C1-C4酰氧基、未取代或取代的烷氧羰基、未取代的或取代的酰氨基、或者未取代或取代的磺酰氨基。在其他实施方案中,R3'是卤代,其为-I、-F、-Cl或-Br。在一些实施方案中,R3'选自氰基、羟基、硝基、磷酸酯、 脲和碳酸酯。还考虑R3'为-CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基、庚基、-OCH3、-OCH2CH3或-CF3。
式II化合物的R3'还可以为NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成含有3至8个环原子的环状部分。如此形成的环状部分可以进一步包括一个或多个选自S、O和N的杂原子。如此形成的环状部分为未取代的或取代的,包括但不限于吗啉基、氮杂环丁基、?#37327;?#28919;基、哌啶基、哌嗪基、异噻唑烷基1,2-二氧化物(1,2,dioxide)和硫代吗啉基。更多的非限制性的示例性环状部分如下:

本发明?#22266;?#20379;式II的化合物,其中,当R3'是由烷基、烯基、炔基、环烷基、杂烷基、杂环烷基、杂环烷氧基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、酰基、烷氧基、酰胺基、氨基、磺酰氨基、酰氧基、烷氧羰基和NR'R″(其中R'和R″与氮一起形成环状部分)组成的组的成员时,R3'任选地被一个或多个以下取代基取代?#21644;?#22522;、烯基、炔基、环烷基、杂烷基、杂环烷基、杂环烷氧基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、酰基、杂环烷氧基、烷氧基、酰胺基、氨基、磺酰氨基、酰氧基、烷氧羰基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。上述取代基中的每一个都可进一步被选自烷基、烷氧基、酰胺基、氨基、磺酰氨基、酰氧基、烷氧羰基、卤代、氰基、羟基、硝基、氧代、磷酸酯、脲和碳酸酯的一个或多个取代基所取代。
例如,本发明提供这样的化合物,其?#26800;盧3'为烷基时,该烷基被NR'R″所取代,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。如此形成的环状部分可以是未取代的或取代的。非限制性的示例性环状部分包括但不限于吗啉基、氮杂环丁基、?#37327;?#28919;基、哌啶基、哌嗪基和硫代吗啉基。在式 II化合物的其他实例中,当R3'为烷基时,该烷基被杂环烷基取代,该杂环烷基包括氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢呋喃基、?#37327;?#22522;、四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基和哌嗪基。所有上面列出的杂环烷基取代基均可以是未取代的或取代的。
在式II化合物的又一些实例中,当R3'为烷基时,该烷基被未取代的或取代的5、6、7、8、9或10元单环或双环杂芳基所取代。单环杂芳基包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。
在式II化合物的其他实施方案中,R3'为–NHR3″、-N(CH3)R3″、-N(CH2CH3)R3″、-N(CH(CH3)2)R3″或–OR3″,其中R3″为未取代的或取代的杂环烷基(其非限制性实例包括4-NH哌啶-1-基、4-甲基哌啶-1-基、4-?#19968;?#21708;啶-1-基、4-异丙基-哌啶-1-基和?#37327;?#28919;-3-基),未取代的或取代的单环芳基,或者未取代的或取代的单环杂芳基(包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基)。在一个实例中,R3'为-O-芳基,即苯氧基。在另一个实例中,R3'为-O-(4-甲基)哌啶-1-基或-O-(4-异丙基)哌啶-1-基。
在式II化合物的一些实施方案中,R3'为以下部分之一:



在式II化合物的一些实施方案中,W1'为NR3',其中R3'为氢,未取代的或取代的C1-C10烷基(其包括但不限于-CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;),或者未取代的或取代的C3-C7环烷基(其包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基和环己基)。在式II化合物的其他实施方案中,R3'为未取代的或取代的杂环烷基(其包括但不限于氧杂环丁基、四氢呋喃基、?#37327;?#28919;基、四氢吡喃基、哌啶基和哌嗪基),或者未取代的或取代的C2-C10杂烷基(其包括但并不限于甲氧基乙氧基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基?#19968;?。或者,R3'为未取代的或取代的单环杂芳基(其包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基),或者未取代的或取代的单环芳基。
在另外其他的实施方案中,W1'为C=O。
在式II化合物的一些实施方案中,W2'为CR4'。R4'可以为,例如,氢,或者未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、 异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在其他实施方案中,R4'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R4'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中该烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R4'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R4'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R4'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。
本发明?#22266;?#20379;了式II的化合物,其中R4'为未取代的或取代的杂芳基烷基,包括但不限于连接到烷基的如上所述的单环和双环杂芳基,该烷基又包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基。在一些实施方案中,R4'为未取代的或取代的环烷基(包括但不限于环丙基、环丁基和环戊基)或者未取代的或取代的杂烷基(非限制性的实例包括乙氧基甲基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基甲基)。在一些进一步的实施方案中,R4'为未取代的或取代的杂环烷基,其包括但不限于?#37327;?#28919;基、四氢呋喃基、哌啶基、四氢吡喃基、噻唑烷基、咪唑烷基、吗啉基和哌嗪基。在式I化合物的又一些实施方案中,R4为未取代的或取代的烷氧基,包括但不限于C1-C4烷氧基,如甲氧基、乙氧基、丙氧基或丁氧基。R4还可以是未取代的或取代的杂环烷氧基,包括但不限于4-NH哌啶-1-基-氧基、4-甲基哌啶-1-基-氧基、4-?#19968;?#21708;啶-1-基-氧基、4-异丙基-哌啶-1-基-氧基和?#37327;?#28919;-3-基-氧基。在其他实施方案中,R4'为未取代 的或取代的氨基,其中所述取代的氨基包括但不限于二甲氨基、二乙氨基、二异丙基氨基、N-甲基N-?#19968;?#27688;基和二丁氨基。在一些实施方案中,R4'为未取代的或取代的酰基、未取代的或取代的酰氧基、未取代的或取代的C1-C4酰氧基、未取代或取代的烷氧羰基、未取代的或取代的酰氨基、或者未取代或取代的磺酰氨基。在一些实施方案中,R4是卤代,其为-I、-F、-Cl或-Br。在一些实施方案中,R4'选自氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲或碳酸酯。还考虑R4为-CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基、庚基、-OCH3、-OCH2CH3或-CF3。
式II化合物的R4'还可以为NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成含有3至8个环原子的环状部分。如此形成的环状部分可以进一步包括一个或多个选自S、O和N的杂原子。如此形成的环状部分为未取代的或取代的,包括但不限于吗啉基、氮杂环丁基、?#37327;?#28919;基、哌啶基、哌嗪基、异噻唑烷基1,2-二氧化物和硫代吗啉基。更多的非限制性的示例性环状部分如下:

本发明?#22266;?#20379;式II的化合物,其中,当R4'是由烷基、烯基、炔基、环烷基、杂烷基、杂环烷基、杂环烷氧基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、酰基、烷氧基、酰胺基、氨基、磺酰氨基、酰氧基、烷氧羰基和NR'R″(其中R'和R″与氮一起形成环状部分)组成的组的成员时,R4'任选地被一个或多个以下取代基取代?#21644;?#22522;、烯基、炔基、环烷基、杂烷基、杂环烷基、杂环烷氧基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、酰基、烷氧基、酰胺基、氨基、磺酰氨基、酰氧基、烷氧羰基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。上述取代基中的每一个都可进一步被选自烷基、烷氧基、酰胺基、氨基、磺酰氨基、酰氧基、烷氧羰基、卤代、氰 基、羟基、硝基、氧代、磷酸酯、脲和碳酸酯的一个或多个取代基取代。
例如,本发明提供这样的化合物,其?#26800;盧4'为烷基时,该烷基被NR'R″所取代,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。如此形成的环状部分可以是未取代的或取代的。非限制性的示例性环状部分包括但不限于吗啉基、氮杂环丁基、?#37327;?#28919;基、哌啶基、哌嗪基、异噻唑烷基1,2-二氧化物和硫代吗啉基。在式II化合物的其他实例中,当R4为烷基时,该烷基被杂环烷基取代,该杂环烷基包括氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢呋喃基、?#37327;?#22522;、四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基和哌嗪基。上面列出的所有杂环烷基取代基均可是未取代的或取代的。
在式II化合物的又一些实例中,当R4'为烷基时,该烷基被未取代的或取代的5、6、7、8、9或10元单环或双环杂芳基取代。单环杂芳基包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。
在式II化合物的一些实施方案中,W2'为NR4',其中R4'为氢、未取代的或取代的C1-C10烷基(其包括但不限于-CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)或未取代的或取代的C3-C7环烷基(其包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基和环己基)。在式II化合物的其他实施方案中,R4'为未取代的或取代的杂环烷基(其包括但不限于氧杂环丁基、四氢呋喃基、?#37327;?#28919;基、四氢吡喃基、哌啶基和哌嗪基),或者未取代的或取代的C2-C10杂烷基(其包括但并不限于甲氧基乙氧基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基?#19968;?。或者,R4'为未取代的或取代的单环杂芳基(其包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基),或者未取代的或取代的单环芳基。
在一些实施方案中,R3'和R4'一起形成环状部分。这样的环状部分 可含有,例如,3至8个环原子。如此形成的环状部?#21482;?#21487;以包括一个或多个选自S、O和N的杂原子。如此形成的环状部分为未取代的或取代的。在一些实施方案中,取代基为C1-C10烷基(其包括但不限于-CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;),或C3-C7环烷基(其包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基和环己基);杂环烷基(其包括但不限于氧杂环丁基、四氢呋喃基、?#37327;?#28919;基、四氢吡喃基、哌啶基和哌嗪基),C2-C10杂烷基(其包括但并不限于甲氧基乙氧基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基?#19968;?;单环杂芳基(其包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基),或者未取代的或取代的单环芳基。所述环状部分可具有一个或多个可以相同的或不同的取代基。
在一些实施方案中,由R3'和R4'所形成的环状部分被以下取代基中的至少一个所取代:



在式II化合物的一些实施方案中,W3'为CR5'。R5'可以为,例如,氢,或者未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在一个实施方案中,R5'为H。在其他实施方案中,R5'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R5'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中该烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R5'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R5'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R5'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。
在式II化合物的一些实施方案中,W3'为N或NR5',其中R5'为氢、未取代的或取代的C1-C10烷基(其包括但不限于-CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;),或者未取代的或取代的C3-C7环烷基(其包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基和环己 基)。在式II化合物的其他实施方案中,R5'为未取代的或取代的杂环烷基(其包括但不限于氧杂环丁基、四氢呋喃基、?#37327;?#28919;基、四氢吡喃基、哌啶基和哌嗪基),或者未取代的或取代的C2-C10杂烷基(其包括但并不限于甲氧基乙氧基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基?#19968;?。或者,R5'为未取代的或取代的单环杂芳基(其包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基),或者未取代的或取代的单环芳基。
在式II化合物的一些实施方案中,W4'为CR6'。R6'可以为,例如,氢,或者未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在一个实施方案中,R6'为H。在其他实施方案中,R6'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R6'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R6'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R6'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R6'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。
在式II化合物的一些实施方案中,W4'为N或NR6',其中R6'为氢、未取代的或取代的C1-C10烷基(其包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)或未取代的或取代的C3-C7环烷基(其包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基和环己基)。 在式II化合物的其他实施方案中,R6'为未取代的或取代的杂环烷基(其包括但不限于氧杂环丁基、四氢呋喃基、?#37327;?#28919;基、四氢吡喃基、哌啶基和哌嗪基),或未取代的或取代的C2-C10杂烷基(其包括但并不限于甲氧基乙氧基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基?#19968;?。或者,R6'为未取代的或取代的单环杂芳基(其包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基),或者未取代的或取代的单环芳基。
在一些实施方案中,W4'为C=O。
在式II化合物的一些实施方案中,W5'为N。在式II化合物的其他实施方案中W5'为CR7'。R7'可以为,例如,氢,或者未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在一个实施方案中,R7'为H。在其他实施方案中,R7'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R7'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R7'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R7'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R7'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。
在式II化合物的一些实施方案中,W6'为N。在式II化合物的其他实施方案中,W6'为CR8'。R8'可以为,例如,氢或者未取代的或取代的 烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在一个实施方案中,R8'为H。在其他实施方案中,R8'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R8'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R8'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R8'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R8'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。
在一些实施方案中,式II的化合物具有下式:

在其他实施方案中,式II的化合物为:

例如,式II的化合物为:

在一些实施方案中,式II的化合物为:

另一方面,本发明提供了子式IIa的化合物。

在一个实施方案中,R1'、R3'、R4'、R5'和R8'为氢。在另一个实施方案中,R1'、R3'、R5'和R8'为氢,且R4'为烷基、杂烷基、烯基、炔基、 环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。R4'可以为,例如,氢、未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在其他实施方案中,R4'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R4'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R4'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R4'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R4'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。

另一方面,本发明提供了子式IIa'和子式IIb'的化合物,其中W1'为CR3',W2'为CR4',W3'为CR5',W4'为N,W5'为CR7',且W6'为CR8'。在一个实施方案中,R1'、R3'、R4'、R5'、R7'和R8'为氢。在另一个实施方案中,R1'、R4'、R5'、R7'和R8'为氢,且R3'为烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤 代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。R3'可以为,例如,氢、未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在其他实施方案中,R3'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R3'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R3'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R3'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。本发明?#22266;?#20379;了式II的化合物,其中R3'为未取代的或取代的杂芳基烷基,其包括但不限于连接到烷基的如上所述的单环和双环杂芳基,该烷基又包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基。在一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的环烷基(包括但不限于环丙基、环丁基和环戊基)或者未取代的或取代的杂烷基(非限制性实例包括乙氧基甲基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基甲基)。在又一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的杂环烷基,其包括但不限于?#37327;?#28919;基、四氢呋喃基、哌啶基、四氢吡喃基、噻唑烷基、咪唑烷基、吗啉基和哌嗪基。在式II化合物的又一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的烷氧基,包括但不限于C1-C4烷氧基,如甲氧基、乙氧基、丙氧基或丁氧基。R3'还可以为未取代的或取代的杂环烷氧基,包括但不限于4-NH哌啶-1-基-氧基、4-甲基哌啶-1-基- 氧基、4-?#19968;?#21708;啶-1-基-氧基、4-异丙基-哌啶-1-基-氧基和?#37327;?#28919;-3-基-氧基。在其他实施方案中,R3'为未取代的或取代的氨基,其中所述取代的氨基包括但不限于二甲氨基、二乙氨基、二异丙基氨基、N-甲基N-?#19968;?#27688;基和二丁氨基。在一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的酰基、未取代的或取代的酰氧基、未取代的或取代的C1-C4酰氧基、未取代或取代的烷氧羰基、未取代的或取代的酰氨基、或者未取代或取代的磺酰氨基。在其他实施方案中,R3'是卤代,其为-I、-F、-Cl或-Br。在一些实施方案中,R3'选自氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲和碳酸酯。还考虑了R3'为-CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基、庚基、-OCH3、-OCH2CH3或-CF3。在一些实施方案中,R3'还可以为NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成含有3至8个环原子的环状部分。如此形成的环状部?#21482;?#21487;以包括一个或多个选自S、O和N的杂原子。如此形成的环状部分为未取代的或取代的,包括但不限于吗啉基、氮杂环丁基、?#37327;?#28919;基、哌啶基、哌嗪基、异噻唑烷基1,2,二氧化物和硫代吗啉基。更多的非限制性示例性环状部分如下:

另一方面,本发明提供了子式IIb的化合物:

在一个实施方案中,R1'、R4'、R5'和R8'为氢。在另一个实施方案中,R1'、R5'和R8'为氢,且R4'为烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环 烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。R4'可以为,例如,氢、未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在其他实施方案中,R4'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R4'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R4'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R4'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R4'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。
另一方面,本发明提供了子式IIc和子式IId的化合物,其中W1'为N,W2'为CR4',W3'为CR5',W4'为N,W5'为CR7',且W6'为CR8'。

在一个实施方案中,R1'、R4'、R5'、R7'和R8'为氢。在另一个实施方案中,R1'、R5'、R7'和R8'为氢,且R4'为烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤 代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。R4'可以为,例如,氢、未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在其他实施方案中,R4'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R4'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R4'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R4'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R4'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。本发明?#22266;?#20379;了式II的化合物,其中R4'为未取代的或取代的杂芳基烷基,包括但不限于连接到烷基的如上所述的单环和双环杂芳基,该烷基又包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基。在一些实施方案中,R4'为未取代的或取代的环烷基(包括但不限于环丙基、环丁基和环戊基)或者未取代的或取代的杂烷基(非限制性实例包括乙氧基甲基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基甲基)。在又一些实施方案中,R4'为未取代的或取代的杂环烷基,其包括但不限于?#37327;?#28919;基、四氢呋喃基、哌啶基、四氢吡喃基、噻唑烷基、咪唑烷基、吗啉基和哌嗪基。在式II化合物的又一些实施方案中,R4'为未取代的或取代的烷氧基,包括但不限于C1-C4烷氧基,如甲氧基、乙氧基、丙氧基或丁氧基。R3'还可以为未取代的或取代的杂环烷氧基,包括但不限于4-NH哌啶-1-基-氧基、4-甲基哌啶-1-基- 氧基、4-?#19968;?#21708;啶-1-基-氧基、4-异丙基-哌啶-1-基-氧基和?#37327;?#28919;-3-基-氧基。在其他实施方案中,R4'为未取代的或取代的氨基,其中所述取代的氨基包括但不限于二甲氨基、二乙氨基、二异丙基氨基、N-甲基N-?#19968;?#27688;基和二丁氨基。在一些实施方案中,R4'为未取代的或取代的酰基、未取代的或取代的酰氧基、未取代的或取代的C1-C4酰氧基、未取代或取代的烷氧羰基、未取代的或取代的酰氨基或未取代或取代的磺酰氨基。在其他实施方案中,R4'是卤代,其为-I、-F、-Cl或-Br。在一些实施方案中,R4'选自氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲和碳酸酯。还考虑了R4'为-CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基、庚基、-OCH3、-OCH2CH3或-CF3。在一些实施方案中,R3'还可以为NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成含有3至8个环原子的环状部分。如此形成的环状部?#21482;?#21487;以包括一个或多个选自S、O和N的杂原子。如此形成的环状部分为未取代的或取代的,包括但不限于吗啉基、氮杂环丁基、?#37327;?#28919;基、哌啶基、哌嗪基、异噻唑烷基1,2,二氧化物和硫代吗啉基。更多的非限制性示例性环状部分如下:

另一方面,本发明提供了子式IIe和子式IIf的化合物,其中W1'为CR3',W2'为N,W3'为CR5',W4'为N,W5'为CR7',且W6'为CR8'。

在一个实施方案中,R1'、R3'、R5'、R7'和R8'为氢。在另一个实施方案中,R1'、R5'、R7'和R8'为氢,且R3'为烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤 代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。R3'可以为,例如,氢、未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在其他实施方案中,R3'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R3'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中该烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R3'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R3'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。本发明?#22266;?#20379;了式II的化合物,其中R3'为未取代的或取代的杂芳基烷基,包括但不限于连接到烷基的如上所述的单环和双环杂芳基,该烷基又包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基。在一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的环烷基(包括但不限于环丙基、环丁基和环戊基)或者未取代的或取代的杂烷基(非限制性实例包括乙氧基甲基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基甲基)。在一些进一步的实施方案中,R3'为未取代的或取代的杂环烷基,其包括但不限于?#37327;?#28919;基、四氢呋喃基、哌啶基、四氢吡喃基、噻唑烷基、咪唑烷基、吗啉基和哌嗪基。在式II化合物的又一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的烷氧基,包括但不限于C1-C4烷氧基,如甲氧基、乙氧基、丙氧基或丁氧基。R3'还可以为未取代的或取代的杂环烷氧基,包括但不限于4-NH哌啶-1-基-氧基、4-甲基哌啶-1- 基-氧基、4-?#19968;?#21708;啶-1-基-氧基、4-异丙基-哌啶-1-基-氧基和?#37327;?#28919;-3-基-氧基。在其他实施方案中,R3'为未取代的或取代的氨基,其中所述取代的氨基包括但不限于二甲氨基、二乙氨基、二异丙基氨基、N-甲基N-?#19968;?#27688;基和二丁氨基。在一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的酰基、未取代的或取代的酰氧基、未取代的或取代的C1-C4酰氧基、未取代或取代的烷氧羰基、未取代的或取代的酰氨基、或者未取代或取代的磺酰氨基。在其他实施方案中,R3'是卤代,其为-I、-F、-Cl或-Br。在一些实施方案中,R3'选自氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲和碳酸酯。还考虑了R3'为-CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基、庚基、-OCH3、-OCH2CH3或-CF3。在一些实施方案中,R3'还可以为NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成含有3至8个环原子的环状部分。如此形成的环状部?#21482;?#21487;以包括一个或多个选自S、O和N的杂原子。如此形成的环状部分为未取代的或取代的,包括但不限于吗啉基、氮杂环丁基、?#37327;?#28919;基、哌啶基、哌嗪基、异噻唑烷基1,2,二氧化物和硫代吗啉基。更多的非限制性示例性环状部分如下:

在一些实施方案中,取代基R3'、R4'、R5'、R6'或R8'可为表1中示出的任何取代基。
表1.式II化合物的R3'、R4'、R5'、R6'、R8'部分,各自独立地包括但不限于以下部分:




另一方面,本发明提供了一种PI3Kα抑制剂,其为式III化合物:

或其药学上可接受的盐,其中:
X为O或S或N;
W1'为S、N、NR3'或CR3',W2'为N或CR4',W3'为S、N或CR5',W4'为N或C,且W7'为N或C,其中没有超过两个N原子且没有超过两个C=O基团相邻;
W5'为N或CR7';
W6'为N或CR8';
R1'和R2'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;
R3'和R4'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、 硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;或者R3'和R4'一起形成环状部分;
R5'、R7'和R8'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。
在一些实施方案中,式III的化合物作为互变异构体存在,?#20918;?#21457;明考虑了这样的互变异构体。
在一些实施方案中,PI3Kα抑制剂为具有下式的式III化合物:

在又一些实施方案中,W1'为CR3',W2'为CR4',W3'为N,W4'为N,W5'为CR7',且W6'为CR8'。在其他实施方案中,W1'为CR3',W2'为CR4',W3'为N,W4'为N,W5'为CR7',且W6'为CR8'。在其他实施方案中,W1'为CR3',W2'为CR4',W3'为N,W4'为N,W5'为N,且W6'为CR8'。在另外其他的实施方案中,W1'为NR3',W2'为CR4',W3'为N,W4'为C,W5'为CR7',且W6'为CR8'。在其他实施方案中,W1'为S,W2'为CR4',W3'为N,W4'为C,W5'为CR7',且W6'为CR8'。在其他实施方案中,W1'为CR3',W2'为CR4',W3'为S,W4'为C,W5′′为N,且W6'为N。
在其他实施方案中,式III抑制剂为下式之一的化合物:


其中,对于上式中的每一个,每个各自的R变量包括“上撇号”(')。
在一些实施方案中,X为O。在其他实施方案中,X为S。
在一些实施方案中,R1'为氢。在其他实施方案中,R1'为烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。
在一些实施方案中,R2'为氢。在其他实施方案中,R2'为,例如,未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在其他实施方案中,R2'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R2'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R2'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R2'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R2'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、 异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。本发明?#22266;?#20379;了这样的化合物:其中R2'为未取代的或取代的杂芳基烷基,包括但不限于连接到烷基的如上所述的单环和双环杂芳基,该烷基又包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基。在一些实施方案中,R2'为未取代的或取代的环烷基(包括但不限于环丙基、环丁基和环戊基)或者未取代的或取代的杂烷基(非限制性实例包括乙氧基甲基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基甲基)。在一些进一步的实施方案中,R2'为未取代的或取代的杂环烷基,其包括但不限于?#37327;?#28919;基、四氢呋喃基、哌啶基、四氢吡喃基、噻唑烷基、咪唑烷基、吗啉基和哌嗪基。在式III化合物的又一些实施方案中,R2'为未取代的或取代的烷氧基,包括但不限于C1-C4烷氧基,如甲氧基、乙氧基、丙氧基或丁氧基。R2'还可以为未取代的或取代的杂环烷氧基,包括但不限于4-NH哌啶-1-基-氧基、4-甲基哌啶-1-基-氧基、4-?#19968;?#21708;啶-1-基-氧基、4-异丙基-哌啶-1-基-氧基和?#37327;?#28919;-3-基-氧基。在其他实施方案中,R2'为未取代的或取代的氨基,其中所述取代的氨基包括但不限于二甲氨基、二乙氨基、二异丙基氨基、N-甲基N-?#19968;?#27688;基和二丁氨基。在一些实施方案中,R2'为未取代的或取代的酰基、未取代的或取代的酰氧基、未取代的或取代的C1-C4酰氧基、未取代或取代的烷氧羰基、未取代的或取代的酰氨基、或者未取代或取代的磺酰氨基。在其他实施方案中,R2'是卤代,其为-I、-F、-Cl或-Br。在一些实施方案中,R2'选自氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲和碳酸酯。还考虑了R2'为-CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基、庚基、-OCH3、-OCH2CH3或-CF3。
在式III化合物的一些实施方案中,W1'为CR3'。R3'可以为,例如,氢、未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在其他实施方案中,R3'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者 未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R3'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R3'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R3'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。本发明?#22266;?#20379;了式III的化合物,其中R3'为未取代的或取代的杂芳基烷基,包括但不限于连接到烷基的如上所述的单环和双环杂芳基,该烷基又包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基。在一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的环烷基(包括但不限于环丙基、环丁基和环戊基)或者未取代的或取代的杂烷基(非限制性实例包括乙氧基甲基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基甲基)。在一些进一步的实施方案中,R3'为未取代的或取代的杂环烷基,其包括但不限于?#37327;?#28919;基、四氢呋喃基、哌啶基、四氢吡喃基、噻唑烷基、咪唑烷基、吗啉基和哌嗪基。在式III化合物的又一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的烷氧基,包括但不限于C1-C4烷氧基,如甲氧基、乙氧基、丙氧基或丁氧基。R3'还可以为未取代的或取代的杂环烷氧基,包括但不限于4-NH哌啶-1-基-氧基、4-甲基哌啶-1-基-氧基、4-?#19968;?#21708;啶-1-基-氧基、4-异丙基-哌啶-1-基-氧基和?#37327;?#28919;-3-基-氧基。在其他实施方案中,R3'为未取代的或取代的氨基,其中所述取代的氨基包括但不限于二甲氨基、二乙氨基、二异丙基氨基、N-甲基N-?#19968;?#27688;基和二丁氨基。在一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的酰基、未取代的或取代的酰氧基、未取代的或取代的C1-C4酰氧基、未取代或取代的烷氧羰基、未取代的或取代的酰氨 基、或者未取代或取代的磺酰氨基。在其他实施方案中,R3'是卤代,其为-I、-F、-Cl或-Br。在一些实施方案中,R3'选自氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲和碳酸酯。还考虑R3'为-CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基、庚基、-OCH3、-OCH2CH3或-CF3。
式III化合物的R3'还可以为NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成含有3至8个环原子的环状部分。如此形成的环状部分可以进一步包括一个或多个选自S、O和N的杂原子。如此形成的环状部分为未取代的或取代的,包括但不限于吗啉基、氮杂环丁基、?#37327;?#28919;基、哌啶基、哌嗪基、异噻唑烷基1,2,二氧化物和硫代吗啉基。更多的非限制性示例性环状部分如下:

本发明?#22266;?#20379;了式III的化合物,其?#26800;盧3'为由烷基、烯基、炔基、环烷基、杂烷基、杂环烷基、杂环烷氧基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、酰基、烷氧基、酰胺基、氨基、磺酰氨基、酰氧基、烷氧羰基和NR'R″(其中R'和R″与氮一起形成环状部分)组成的组的成员时,则R3'任选地被一个或多个以下取代基所取代?#21644;?#22522;、烯基、炔基、环烷基、杂烷基、杂环烷基、杂环烷氧基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、酰基、杂环烷氧基、烷氧基、酰胺基、氨基、磺酰氨基、酰氧基、烷氧羰基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。上述取代基中的每一个都可进一步被一个或多个选自烷基、烷氧基、酰胺基、氨基、磺酰氨基、酰氧基、烷氧羰基、卤代、氰基、羟基、硝基、氧代、磷酸酯、脲和碳酸酯的取代基所取代。
例如,本发明提供了这样的化合物,其?#26800;盧3'为烷基时,该烷基被NR'R″所取代,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。如此形成的环状 部分可以是未取代的或取代的。非限制性的示例性环状部分包括但不限于吗啉基、氮杂环丁基、?#37327;?#28919;基、哌啶基、哌嗪基和硫代吗啉基。在式III化合物的其他实例中,当R3'为烷基时,该烷基被杂环烷基所取代,所述杂环烷基包括氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢呋喃基、?#37327;?#22522;、四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基和哌嗪基。所有上面列出的杂环烷基取代基均可以是未取代的或取代的。
在式III化合物的又一些其他实例中,当R3'为烷基时,该烷基被未取代的或取代的5、6、7、8、9或10元单环或双环杂芳基所取代。单环杂芳基包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。
在式III化合物的其他实施方案中,R3'为–NHR3″、-N(CH3)R3″、-N(CH2CH3)R3″、-N(CH(CH3)2)R3″或–OR3″,其中R3″为未取代的或取代的杂环烷基(其非限制性实例包括4-NH哌啶-1-基、4-甲基哌啶-1-基、4-?#19968;?#21708;啶-1-基、4-异丙基-哌啶-1-基和?#37327;?#28919;-3-基)、未取代的或取代的单环芳基,或者未取代的或取代的单环杂芳基(包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基)。在一个实例中,R3'为-O-芳基,即苯氧基。在另一个实例中,R3'为-O-(4-甲基)哌啶-1-基或-O-(4-异丙基)哌啶-1-基。
在式III化合物的一些实施方案中,R3'为以下部分之一:



在式III化合物的一些实施方案中,W1'为NR3',其中R3'为氢,未取代的或取代的C1-C10烷基(其包括但不限于-CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;),或者未取代的或取代的C3-C7环烷基(其包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基和环己基)。在式III化合物的其他实施方案中,R3'为未取代的或取代的杂环烷基(其包括但不限于氧杂环丁基、四氢呋喃基、?#37327;?#28919;基、四氢吡喃基、哌啶基和哌嗪基),或者未取代的或取代的C2-C10杂烷基(其包括但并不限于甲氧基乙氧基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基?#19968;?。或者,R3'为未取代的或取代的单环杂芳基(其包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基),或者未取代的或取代的单环芳基。
在其他实施方案中,W1'为N。在又一些其他实施方案中,W1'为S。
在式III化合物的一些实施方案中,W2'为CR4'。R4'可以为,例如,氢,或者未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在其他实施方案中,R4'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R4'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R4'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R4'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R4'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。
本发明?#22266;?#20379;了式III的化合物,其中R4'为未取代的或取代的杂芳基烷基,包括但不限于连接到烷基的如上所述的单环和双环杂芳基,该烷基又包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基。在一些实施方案中,R4'为未取代的或取代的环烷基(包括但不限于环丙基、环丁基和环戊基)或者未取代的或取代的杂烷基(非限制性的实例包括乙氧基甲基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基甲基)。在一些进一步的实施方案中,R4'为未取代的或取代的杂环烷基,其包括但不限于?#37327;?#28919;基、四氢呋喃基、哌啶基、四氢吡喃基、噻唑烷基、咪唑烷基、吗啉基和哌嗪基。在式III化合物的又一些实施方案中,R4'为未取代的或取代的烷氧基,包括但不限于C1-C4烷氧基,如甲氧基、乙氧基、丙氧 基或丁氧基。R4'还可以是未取代的或取代的杂环烷氧基,包括但不限于4-NH哌啶-1-基-氧基、4-甲基哌啶-1-基-氧基、4-?#19968;?#21708;啶-1-基-氧基、4-异丙基-哌啶-1-基-氧基和?#37327;?#28919;-3-基-氧基。在其他实施方案中,R4'为未取代的或取代的氨基,其中所述取代的氨基包括但不限于二甲氨基、二乙氨基、二异丙基氨基、N-甲基N-?#19968;?#27688;基和二丁氨基。在一些实施方案中,R4'为未取代的或取代的酰基、未取代的或取代的酰氧基、未取代的或取代的C1-C4酰氧基、未取代或取代的烷氧羰基、未取代的或取代的酰氨基、或者未取代或取代的磺酰氨基。在一些实施方案中,R4'是卤代,其为-I、-F、-Cl或-Br。在一些实施方案中,R4'选自氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲或碳酸酯。还考虑了R4'为-CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基、庚基、-OCH3、-OCH2CH3或-CF3。
式III化合物的R4'还可以为NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成含有3至8个环原子的环状部分。如此形成的环状部?#21482;?#21487;以包括一个或多个选自S、O和N的杂原子。如此形成的环状部分为未取代的或取代的,包括但不限于吗啉基、氮杂环丁基、?#37327;?#28919;基、哌啶基、哌嗪基、异噻唑烷基1,2,二氧化物和硫代吗啉基。更多的非限制性示例性环状部分如下:

本发明?#22266;?#20379;式III的化合物,其中,当R4'是由烷基、烯基、炔基、环烷基、杂烷基、杂环烷基、杂环烷氧基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、酰基、烷氧基、酰胺基、氨基、磺酰氨基、酰氧基、烷氧羰基和NR'R″(其中R'和R″与氮一起形成环状部分)组成的组的成员时,R4'则任选地被一个或多个以下取代基取代?#21644;?#22522;、烯基、炔基、环烷基、杂烷基、杂环烷基、杂环烷氧基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂 芳基烷基、酰基、烷氧基、酰胺基、氨基、磺酰氨基、酰氧基、烷氧羰基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。上述取代基中的每一个都可进一步被一个或多个选自烷基、烷氧基、酰胺基、氨基、磺酰氨基、酰氧基、烷氧羰基、卤代、氰基、羟基、硝基、氧代、磷酸酯、脲和碳酸酯的取代基所取代。
例如,本发明提供这样的化合物,其?#26800;盧4'为烷基时,该烷基被NR'R″所取代,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。如此形成的环状部分可以是未取代的或取代的。非限制性的示例性环状部分包括但不限于吗啉基、氮杂环丁基、?#37327;?#28919;基、哌啶基、哌嗪基、异噻唑烷基1,2,二氧化物和硫代吗啉基。在式III化合物的其他实例中,当R4'为烷基时,该烷基被杂环烷基取代,所述杂环烷基包括氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢呋喃基、?#37327;?#22522;、四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基和哌嗪基。上面列出的所有杂环烷基取代基均可是未取代的或取代的。
在式III化合物的又一些实例中,当R4'为烷基时,该烷基被未取代的或取代的5、6、7、8、9或10元单环或双环杂芳基所取代。单环杂芳基包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。在式III化合物的一些实施方案中,W2'为N。
在一些实施方案中,R3'和R4'一起形成环状部分。这样的环状部分可含有,例如,3至8个环原子。如此形成的环状部?#21482;?#21487;以包括一个或多个选自S、O和N的杂原子。如此形成的环状部分为未取代的或取代的。在一些实施方案中,取代基为C1-C10烷基(其包括但不限于-CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;),或C3-C7环烷基(其包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基和环己 基);杂环烷基(其包括但不限于氧杂环丁基、四氢呋喃基、?#37327;?#28919;基、四氢吡喃基、哌啶基和哌嗪基),C2-C10杂烷基(其包括但并不限于甲氧基乙氧基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基?#19968;?;单环杂芳基(其包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基),或者未取代的或取代的单环芳基。所述环状部分可具有一个或多个可以相同或不同的取代基。
在一些实施方案中,由R3'和R4'所形成的环状部分被以下取代基中的至少一个所取代:



在式III化合物的一些实施方案中,W3'为CR5'。R5'可以为,例如,氢,或者未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在一个实施方案中,R5'为H。在其他实施方案中,R5为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R5'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R5'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R5'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R5'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。在式III化合物的一些实施方案中,W3'为N。在其他实施方案中,W3'为S。
在式III化合物的一些实施方案中,W4'为C。在其他实施方案中,W4'为N。
在式III化合物的一些实施方案中,W5'为N。在式III化合物的其他实施方案中,W5'为CR7'。R7'可以为,例如,氢,或者未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在一个实施方案中,R7'为H。在其他实施方案中,R7'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代 的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R7'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R7'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R7'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R7'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。
在式III化合物的一些实施方案中,W6'为N。在式III化合物的其他实施方案中,W6'为CR8'。R8'可以为,例如,氢,或者未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在一个实施方案中,R8'为H。在其他实施方案中,R8'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R8'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R8'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R8'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R8'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚 基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。
在式III化合物的一些实施方案中,W7'为C。在其他实施方案中,W7'为N。
本发明?#22266;?#20379;了由以下子类所定义的式III化合物:


其中对于上式中的每一个,每个各自的R变量包括“上撇号”(')。
在子类IIIa–IIIj化合物的一些实施方案中,R1'为氢。在子类IIIa-IIIl化合物的其他实施方案中,R2'为NHCO(烷基)的NH2。在子类IIIa-IIIl化合物的其他实施方案中,R4'为氢。在子类IIIc–IIIf和IIIi-IIIl化合物的其他实施方案中,R7'为氢。在子类IIIa–IIIh和IIIk-IIIl化合物的其他实施方案中,R8'为氢。
在子类IIIa至IIIl化合物的一些实施方案中,R3'为烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。R3'可以为,例如,氢,未取代的或取代的烷基(包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基?#36879;?#22522;)。在其他实施方案中,R3'为未取代的或取代的烯基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5烯基,例如,乙烯基、烯丙基、1-甲基丙烯-1-基、丁烯基或戊烯基)或者未取代的或取代的炔基(包括但不限于未取代的或取代的C2-C5炔基,如?#33008;?#22522;、炔丙基、丁炔基或戊炔基)。或者,R3'为未取代的或取代的芳基(包括但不限于单环或双环芳基)或未取代的或取代的芳基烷基(包括但不限于连接到烷基的单环或双环芳基,其中烷基包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基)。在其他一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的杂芳基,包括但不限于单环和双环杂芳基。单环杂芳基R3'包括但不限于?#37327;?#22522;、噻吩基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基和噁唑基。双环杂芳基R3'包括但不限于苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基、氮杂吲哚基、吡唑并嘧 啶基、嘌呤基、?#37327;?#24182;[1,2-b]哒嗪基、?#37327;?#24182;嘧啶基、吲唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基和?#37327;?#24182;[1,2-f][1,2,4]三嗪基。本发明?#22266;?#20379;式II的化合物,其中R3'为未取代的或取代的杂芳基烷基,包括但不限于连接到烷基的如上所述的单环和双环杂芳基,该烷基又包括但不限于CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和戊基。在一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的环烷基(包括但不限于环丙基、环丁基和环戊基)或者未取代的或取代的杂烷基(非限制性实例包括乙氧基甲基、甲氧基甲基和二?#19968;?#27688;基甲基)。在一些进一步的实施方案中,R3'为未取代的或取代的杂环烷基,其包括但不限于?#37327;?#28919;基、四氢呋喃基、哌啶基、四氢吡喃基、噻唑烷基、咪唑烷基、吗啉基和哌嗪基。在式II化合物的又一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的烷氧基,包括但不限于C1-C4烷氧基,如甲氧基、乙氧基、丙氧基或丁氧基。R3'还可以为未取代的或取代的杂环烷氧基,包括但不限于4-NH哌啶-1-基-氧基、4-甲基哌啶-1-基-氧基、4-?#19968;?#21708;啶-1-基-氧基、4-异丙基-哌啶-1-基-氧基和?#37327;?#28919;-3-基-氧基。在其他实施方案中,R3'为未取代的或取代的氨基,其中所述取代的氨基包括但不限于二甲氨基、二乙氨基、二异丙基氨基、N-甲基N-?#19968;?#27688;基和二丁氨基。在一些实施方案中,R3'为未取代的或取代的酰基、未取代的或取代的酰氧基、未取代的或取代的C1-C4酰氧基、未取代或取代的烷氧羰基、未取代的或取代的酰氨基、或者未取代或取代的磺酰氨基。在其他实施方案中,R3'是卤代,其为-I、-F、-Cl或-Br。在一些实施方案中,R3'选自氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲和碳酸酯。还考虑了R3'为-CH3、-CH2CH3、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基、庚基、-OCH3、-OCH2CH3或-CF3。在一些实施方案中,R3'还可以为NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成含有3至8个环原子的环状部分。如此形成的环状部分可以进一步包括一个或多个选自S、O和N的杂原子。如此形成的环状部分为未取代的或取代的,包括但不限于吗啉基、氮杂环丁基、?#37327;?#28919;基、哌啶基、哌嗪基、异噻唑烷基1,2,二氧化物和硫代吗啉基。更多的非限制性的示例性环状部分如下:

本发明进一步提供一种PI3Kα抑制剂,其为式IV的化合物:

或其药学上可接受的盐,其中
W1'为CR3',W2'为被R2'取代的C-苯并噁唑基,且W3'为S;
W1'为CR3',W2'为被R2'取代的C-苯并噁唑基,且W3'为CR5';
W1'为N或NR3',W2'为CR4',且W3'为被R2取代的C-苯并噁唑基;
W1'为CR3',W2'为CR4',且W3'为被R2取代的C-苯并噁唑基;或
W1'为N或NR3',W2'为NR4',且W3'为被R2取代的C-苯并噁唑基;
X为N;
R1'和R2'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;
R3'和R4'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;
R5'、R6'、R7'和R8'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷 基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。
在式IV化合物的一些实施方案中该化合物为:

其中,W1'为CR3'或NR3'且W2'为CR4'。
另一方面,本发明提供了一种PI3Kα抑制剂,其为式V的化合物:

或其药学上可接受的盐,其中:
W1'为N、NR3'、CR3'或C=O;W2'为N、NR4'、CR4'或C=O;W3'为N、NR5'或CR5';W4'为N、C=O或CR6',其中没有超过两个N原子且没有超过两个C=O基团相邻;
W5'为N或CR7';
W6'为N或CR8';
Wa'和Wb'独立地为N或CR9';
Wc'和Wd'中的一个为N,而另一个为O、NR10'或S;
R1'和R2'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷 基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;
R3'和R4'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;或者R3'和R4'一起形成环状部分;
R5'、R6'、R7'和R8'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;
R9'为烷基或卤代;且
R10'为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。
在式IV化合物的一些实施方案中,W1'为CR3',W2'为CR4',W3'为CR5',W4'为N,W5'为CR7',且W6'为CR8';W1'为N,W2'为CR4',W3'为CR5',W4'为N,W5'为CR7',且W6'为CR8';或者W1'为CR3',W2'为N,W3'为CR5',W4'为N,W5'为CR7',且W6'为CR8'。在式IV化合物一些实施方案中,Wb'为N。在其他实施方案中,Wa'为CR9'且R9'为烷基。
本发明?#22266;?#20379;了一种PI3Kα抑制剂,其为式VI的化合物:

或其药学上可接受的盐,其中
W1'为S、N、NR3'或CR3',W2'为N或CR4',W3'为S、N或CR5',W4'为N或C,且W7'为N或C,其中没有超过两个N原子且没有超过两个C=O基团相邻;
W5'为N或CR7';
W6'为N或CR8';
Wa'和Wb'独立地为N或CR9';
Wc'和Wd'中的一个为N,而另一个为O、NR10'或S;
R1'和R2'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;
R3'和R4'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;或者R3'和R4'一起形成环状部分;
R5'、R7'和R8'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成 环状部分;
R9'为烷基或卤代;且
R10'为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。
在式VI化合物的一些实施方案中,W1'为CR3',W2'为CR4',W3'为N,W4'为N,W5'为CR7',且W6'为CR8'。在其他实施方案中,W1'为CR3',W2'为CR4',W3'为N,W4'为N,W5'为CR7',且W6'为CR8'。在其他实施方案中,W1'为CR3',W2'为CR4',W3'为N,W4'为N,W5'为N,且W6'为CR8'。在另外的其他实施方案中,W1'为NR3',W2'为CR4',W3'为N,W4'为C,W5'为CR7',且W6'为CR8'。在其他实施方案中,W1'为S,W2'为CR4',W3'为N,W4'为C,W5'为CR7',且W6'为CR8'。在其他实施方案中,W1'为CR3',W2'为CR4',W3'为S,W4'为C,W5'为N,且W6'为N。
在式VI化合物的一些实施方案中,Wb'为N。在其他实施方案中,Wa'为CR9'且R9'为烷基。
本发明进一步提供了PI3Kα抑制剂,其为式VI-A和式VI-B的化合物:

或其药学上可接受的盐,其中
W1'为CR3';
R1'和R2'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、 硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;
且R3'为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。
本文?#22266;?#20379;了PI3Kα抑制剂,其为式VI-C和式VI-D的化合物:

或其药学上可接受的盐,其中
W1'为CR3';
W5'为N或CR7';
Wa'和Wb'独立地为N或CR9';
Wc'和Wd'中的一个为N,而另一个为O、NR10'或S;
R1'和R2'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;
R3'为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;
R7'为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸 酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;
R9'为烷基或卤代;且
R10'为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。
在式V-C或式V-D化合物的一些实施方案中,Wb'为N。在其他实施方案中,Wa'为CR9'且R9'为烷基。
本文?#22266;?#20379;了一种PI3Kα抑制剂,其为式VII的化合物:

或其药学上可接受的盐,其中
W1'为CR3';W2'为CR4';
Wa'为CH或N;
R1'为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;
R3'为烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;
R4'为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;
或者R3'和R4'一起形成环状部分;
R10'和R11'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。
本发明进一步提供了一种PI3Kα抑制剂,其为式VIII的化合物:

或其药学上可接受的盐,其中
X1为CR3'、NR3'或S;
X2为CR4'、NR4'、CR4'CR5'或CR4'NR5';
X3和X4独立地为C或N;
X5为CR6'、NR6'或S;
X4为CR7'、NR7'、CR7'CR8'或CR7'NR8';
Wa'和Wb'独立地为N或CR9';
Wc'和Wd'中的一个为N,而另一个为O、NR10'或S;
R1'和R2'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;
R3'和R4'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;或者R3'和R4'一起形成环状部分;
R5'、R6'、R7'和R8'独立地为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环 烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分;
R9'为烷基或卤代;且
R10'为氢、烷基、杂烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、烷氧基、杂环烷氧基、酰胺基、氨基、酰基、酰氧基、烷氧羰基、磺酰氨基、卤代、氰基、羟基、硝基、磷酸酯、脲、碳酸酯或NR'R″,其中R'和R″与氮一起形成环状部分。
在式VIII化合物的一些实施方案中,Wb'为N。在其他实施方案中,Wa'为CR9'且R9'为烷基。
?#20174;?#27969;程—PI3Kα抑制剂化合物
一般而言,本发明的化合物可通过以下?#20174;?#27969;程来制?#31119;?
流程A':

例如,本发明的化合物可通过以下?#20174;?#27969;程来制?#31119;?
流程A″:

流程B':

本发明的化合物可以通过在流程A'、A″和B'中大致呈现的?#20174;?#27969;程来合成。该合成通过式A化合物与式B化合物?#21058;?#26469;进行,生成式C化合物。该?#21058;?#27493;骤通常通过使用包括但不限于四(三苯基膦)钯的钯催化剂来催化。该?#21058;?#36890;常在合适的碱的存在下进行,该碱的非限制性实例为碳酸钠。用于?#26757;从?#30340;合?#21980;?#21058;的一个实例是二氧杂环?#21644;?#27700;溶液。
用于流程A'或A″的式A化合物具有式A的结构,其中T1为卤素,包括溴、?#21462;?#27679;和碘,且其中其余取代基针对本发明化合物的式I和式II来定义。对于如式B所示的硼酸和酸衍生物,X为O或S,?#20918;?#24182;噁唑或苯并噻唑部分可连接在4、5、6或7位。
对于式B的化合物,G为氢或RG1,其中RG1为烷基、烯基或芳基。或者,B(OG)2一起形成5元或6元环状部分。在一些实施方案中,式B的化合物为具有式E结构的化合物:

其中G为H或RG1;RG1为烷基、烯基或芳基。或者,B(OG)2一起形成5元或6元环状部分;且RG2为H、氨基甲酸叔丁酯或酰基。
流程C″:

流程C'示出了用于合成式B'化合物或任选地用在?#20174;?#27969;程C'中的式B″化合物的示例性流程。M为如式B所述的杂环部分,如苯并噁唑基或苯并噻唑基部分。?#26757;从?#36890;过式D的化合物与硼酸三烷基酯或硼酸衍生物?#20174;?#26469;进行,以产生式B'的化合物。硼酸三烷基酯包括但不限于硼酸三异丙酯,并且硼酸衍生物包括但不限于双(?#30340;?#37255;)二硼。?#26757;从?#36890;常在碱的存在下进行,该碱的非限制性实例为乙酸钾。?#26757;从?#21487;在诸如二氧杂环?#21644;?#25110;四氢呋喃的溶剂中进?#23567;?
用于流程C'中的式D化合物为其中T2为卤素或另一种离去基团且M如上定义的化合物。通过用诸如盐酸的酸处理可将式B'的化合物进一?#38454;?#21270;为式B″的化合物。
可通过流程C'合成的一些示例性的式B化合物包括但不限于下式的化合物:

在需要时,苯并噁唑基部分(即式C的M1)上的取代基的脱保护(例如,从氨基取代基上除去Boc保护)在式B化合物?#21058;?#33267;式A化合物之后进?#23567;?
具有此类保护基的一些示例性化合物包括但不限于下式的化合物:


以下?#20174;?#27969;程说明?#24605;?#31181;本发明的化合物的制?#31119;?
流程D':5-(7-(3-(4-异丙基哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)-1,5-萘啶-2-基)苯并[d]噁唑-2-胺的合成

流程E':2-氨基-1-(4-(6-(2-氨基苯并[d]噁唑-5-基)-1,5-萘啶-3-基)哌嗪-1-基)-2-甲基丙-1-酮的合成

流程F':5-(3-吗啉基吡啶并[2,3-b]吡嗪-6-基)苯并[d]噁唑-2-胺的合成

流程G':5-(6-吗啉基-1,5-萘啶-3-基)苯并[d]噁唑-2-胺的合成

?#20174;?#27969;程H':

?#20174;?#27969;程I':

?#20174;?#27969;程J':

?#20174;?#27969;程K':

?#20174;?#27969;程L':

?#20174;?#27969;程M':

?#20174;?#27969;程N':

?#20174;?#27969;程O':

?#20174;?#27969;程P':

?#20174;?#27969;程Q':

?#20174;?#27969;程R':

?#20174;?#27969;程S':

?#20174;?#27969;程T':

?#20174;?#27969;程U':

?#20174;?#27969;程V':

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表2示出了示例性的本发明的PI3Kα抑制剂。
表2.所选的本发明化合物的体外IC50数据。使用以下符号:+(大于10微摩尔)、++(小于10微摩尔)、+++(小于1微摩尔)和++++(小于100nM)。
































































*从化合物438开?#36857;?#29992;MDA-MB-361细胞系获得增殖数据。
表3示出了其他示例性的本发明的PI3Kα抑制剂。
表3.所选的本发明化合物的体外IC50数据。使用以下符号:+(大于10微摩尔)、++(小于10微摩尔)、+++(小于1微摩尔)和++++(小于100nM)。











药物组合物及施用
本发明一方面提供了利用PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂的联合治疗。提供用于本发明的联合?#21697;?#30340;治疗剂(包括化合物)可同时或分开施用。这种联合施用包括,例如,两种药剂在同一剂型中同时施用,在单独的剂型中同时施用,以及分开施用。例如,多种治疗剂可以一起配制在同一剂型中并同时施用。或者,多种治疗剂可以同时施用,其中,两种药剂存在于单独的制剂中。在另一种替代方案中,可以施用本发明的抑制剂,随后紧接着施用上述的任?#25105;?#21058;,或者相反。在分开施用方案中,本发明的抑制剂和上述的任?#25105;?#21058;可以相隔几分钟或相隔几个小时或相隔几天施用。术语“联合治疗?#34987;?#21253;括本文所述的治疗剂进一步与其他生物活性化合物或成分以及?#19988;?#29289;?#21697;?例如,?#36136;?#27835;疗或放射治疗)联合施用。
本发明的化合物的施用可通过任何能将化合物递送至作用部位的方法来实现。有效量的本发明的抑制剂可通过具有类似效用的药剂的任何公认的给药方式以单一或多次剂量施用,所述方式包括直肠、口腔、鼻内?#36884;?#30382;途径、通过动脉内注射、静脉内、腹膜内、肠胃外、肌肉内、皮下、口服、局部、作为吸入剂,或通过浸渍或涂覆的装?#32654;?#22914;支架,或动脉插入的圆柱形聚合物。每一种抑制剂或治疗剂的相继施用或基本上同时施用可通过上述任何合适的途径实?#37073;?#24182;且包括但不限于口服途 径、静脉内途径、肌肉内途径和通过粘膜组织直接吸收。治疗剂可通过相同途径或通过不同途径施用。例如,选定的组合中的第一治疗剂可通过静脉内注射给药,而该组合中的其他治疗剂可口服施用。或者,例如,所有治疗剂可口服施用或所有治疗剂可通过静脉内注射施用。治疗剂的施用顺序并不十分关键。
在一些实施方案中,本发明的抑制剂的施用可以在整个疗程中以一剂量连续地或间歇地实现。确定最有效的施用手段和剂量的方法是本领域?#38469;?#20154;员所熟知的,且随着治疗中所用组合物、治疗目的、接受治疗的靶细胞或组织以及接受治疗的受试者而改变。单一或多重给药可采用由主?#25105;?#29983;所选择的剂量水平和模式来进?#23567;?
所施用的每种抑制剂或化合物的量将取决于受治疗的哺乳动物、病症或病状的?#29616;?#31243;度、给药速率、化合物的配置和处方医生的判断。然而,有效剂量在约0.001至约100mg/kg体重/天,优选约1至约35mg/kg/天的?#27573;?#20869;,为单次或分次剂量。对于70kg的人,这相当于约0.05至7g/天,优选约0.05至约2.5g/天。在一些情况下,低于上述?#27573;?#30340;下限的剂量水平可能已经绰绰有余,而在其他情况下,可以采?#37238;?#22823;的剂量而不致引起任何有害的副作用,例如,通过将这样较大的剂量分成几个小剂量用于全天给药。
在一些实施方案中,本发明的联合治疗以包含至少PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂的单一剂量施用。通常,这种施用通过注射例如静脉内注射进行,以便于迅速引入药剂。然而,?#37096;?#20197;?#20204;?#20351;用其他途径。单一剂量的本发明的联合治疗还可用于治疗急性病状。
在一些实施方案中,本发明的联合治疗以多次剂量给药。给药可以是每天约一次、两次、三次、四次、五次、六次或超过六次。给药可以是约每月一次、每两周一次、每周一次或隔日一次。在另一实施方案中,PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂约每天一次至约每天六次联合给药。在另一实施方案中,PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂的给药持续少于约7天。在又一实施方案中,给药持续超过约6天、10天、14天、28天、2个月、6个月或一年。在一些情况下,实?#33267;?#32493;给药并保持必要长的时间。
本发明的联合治疗的施用可持续必要长的时间。在一些实施方案中,本发明的药剂施用超过1、2、3、4、5、6、7、14或28天。在一些实施方案中,本发明的药剂施用少于28、14、7、6、5、4、3、2或1天。在一些实施方案中,本发明的药剂持续地长期施用,例如,用于治疗慢性疾病。
?#21271;?#21457;明的联合治疗以包含一?#21482;?#22810;?#21482;?#21512;物的组合物施用且一?#21482;?#21512;物具有比另一?#21482;?#21512;物更短的半衰期时,?#19978;?#24212;地调整单位剂型。
在一些实施方案中,对本发明的联合治?#24179;?#34892;测试以评?#37226;?#20195;动力学性质和预期的副作用谱。用于此目的的各种试验是本领域中已知的。例如,在药物开发的早期可通过进行Caco-2渗透性试验来估计口服利用性。此外,可通过?#26377;?#40736;、大鼠和猴子中的试验结果推断来近似地估计在人体中的口服药代动力学。在一些实施方案中,本发明的化合物在多个生物物种中显示出良好的口服利用性。
其他试验?#30142;?#25233;制剂对肝功能和代谢的影响。细胞色素P450(CYP)蛋?#36164;?#23545;哺乳动物施用的药物的代谢中所涉及的主要酶。因此,候选药物的不希望的相互作用可能是不良的药物相互作用的重要来源。一般来说,期望药物不与诸如CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6或CYP3A4等CYP同工酶相互作用。在一些实施方案中,本发明的抑制剂对CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6或CYP3A4表现出大于10μM的IC50。此外,使用人制剂的肝微粒体?#36879;?#32454;胞代谢试验可以用来估计候选药物的体外半衰期。
心脏毒性也是评价化合物中的重要考虑因素。例如,hERG为编码Kv11.1钾?#33009;?#36890;道的基因,该蛋白质参与介导心脏中的心脏动作电位的?#37255;?#21270;电流。候选药物对hERG基因产物的抑制可导致猝死风险增加,因此是不希望的性质。在一些实施方案中,本发明的抑制剂在以合适的浓度给药时,表现出小于10%的hERG抑制。
化合物的诱变性可以通过Ames试验或改良的Ames试验使用例如肝S9?#20302;?#26469;分析。在一些实施方案中,化合物在这样的试验中表现 出负活性。
抑制剂的其他不希望的相互作用?#37096;?#20197;通过受体组筛选来确定。在一些实施方案中,针对本发明的联合治疗没有检测到显著的相互作用。可配制本发明的药物组合物以提供治疗有效量的本发明治疗剂或其药学上可接受的盐、酯、前药、溶剂化物、水合物或衍生物的组合。当需要时,该药物组合物包含药学上可接受的盐和/或其配位络合物,以及一?#21482;?#22810;种药学上可接受的赋形剂、载体(包括惰性固体稀释剂和填料)、稀释剂(包括无菌水溶液?#36879;?#31181;有机溶剂)、渗透促进剂、增溶剂和佐剂。
本发明的药物组合物可作为PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂的组合进行施用,或进一步与一?#21482;?#22810;种通常也以药物组合物的形式施用的其他药剂联合施用。当需要时,可将本发明的组合与其他药剂混合成制剂或可将两种组分配制成单独的制剂,以分开地或同时地联合使用它们。
在一些实施方案中,在本发明的药物组合物中提供的一?#21482;?#22810;?#21482;?#21512;物的浓度小于100%、90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%、19%、18%、17%、16%、15%、14%、13%、12%、11%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%、0.5%、0.4%、0.3%、0.2%、0.1%、0.09%、0.08%、0.07%、0.06%、0.05%、0.04%、0.03%、0.02%、0.01%、0.009%、0.008%、0.007%、0.006%、0.005%、0.004%、0.003%、0.002%、0.001%、0.0009%、0.0008%、0.0007%、0.0006%、0.0005%、0.0004%、0.0003%、0.0002%或0.0001%w/w、w/v或v/v。
在一些实施方案中,本发明的一?#21482;?#22810;?#21482;?#21512;物的浓度大于90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%、19.75%、19.50%、19.25%、19%、18.75%、18.50%、18.25%、18%、17.75%、17.50%、17.25%、17%、16.75%、16.50%、16.25%、16%、15.75%、15.50%、15.25%、15%、14.75%、14.50%、14.25%、14%、13.75%、13.50%、13.25%、13%、12.75%、12.50%、12.25%、12%、11.75%、11.50%、11.25%、11%、10.75%、10.50%、10.25%、10%、9.75%、9.50%、9.25%、9%、8.75%、8.50%、8.25%、8%、7.75%、7.50%、7.25%、7%、6.75%、6.50%、6.25%、6%、5.75%、5.50%、5.25%、5%、4.75%、4.50%、4.25%、4%、3.75%、3.50%、3.25%、3%、2.75%、 2.50%、2.25%、2%、1.75%、1.50%、1.25%、1%、0.5%、0.4%、0.3%、0.2%、0.1%、0.09%、0.08%、0.07%、0.06%、0.05%、0.04%、0.03%、0.02%、0.01%、0.009%、0.008%、0.007%、0.006%、0.005%、0.004%、0.003%、0.002%、0.001%、0.0009%、0.0008%、0.0007%、0.0006%、0.0005%、0.0004%、0.0003%、0.0002%或0.0001%w/w、w/v或v/v。
在一些实施方案中,本发明的一?#21482;?#22810;?#21482;?#21512;物的浓度在约0.0001%至约50%、约0.001%至约40%、约0.01%至约30%、约0.02%至约29%、约0.03%至约28%、约0.04%至约27%、约0.05%至约26%、约0.06%至约25%、约0.07%至约24%、约0.08%至约23%、约0.09%至约22%、约0.1%至约21%、约0.2%至约20%、约0.3%至约19%、约0.4%至约18%、约0.5%至约17%、约0.6%至约16%、约0.7%至约15%、约0.8%至约14%、约0.9%至约12%、约1%至约10%w/w、w/v或v/v的?#27573;?#20869;。
在一些实施方案中,本发明的一?#21482;?#22810;?#21482;?#21512;物的浓度在约0.001%至约10%、约0.01%至约5%、约0.02%至约4.5%、约0.03%至约4%、约0.04%至约3.5%、约0.05%至约3%、约0.06%至约2.5%、约0.07%至约2%、约0.08%至约1.5%、约0.09%至约1%、约0.1%至约0.9%w/w、w/v或v/v的?#27573;?#20869;。
在一些实施方案中,本发明的一?#21482;?#22810;?#21482;?#21512;物的量等于或小于10g、9.5g、9.0g、8.5g、8.0g、7.5g、7.0g、6.5g、6.0g、5.5g、5.0g、4.5g、4.0g、3.5g、3.0g、2.5g、2.0g、1.5g、1.0g、0.95g、0.9g、0.85g、0.8g、0.75g、0.7g、0.65g、0.6g、0.55g、0.5g、0.45g、0.4g、0.35g、0.3g、0.25g、0.2g、0.15g、0.1g、0.09g、0.08g、0.07g、0.06g、0.05g、0.04g、0.03g、0.02g、0.01g、0.009g、0.008g、0.007g、0.006g、0.005g、0.004g、0.003g、0.002g、0.001g、0.0009g、0.0008g、0.0007g、0.0006g、0.0005g、0.0004g、0.0003g、0.0002g或0.0001g。
在一些实施方案中,本发明的一?#21482;?#22810;?#21482;?#21512;物的量大于0.0001g、0.0002g、0.0003g、0.0004g、0.0005g、0.0006g、0.0007g、0.0008 g、0.0009g、0.001g、0.0015g、0.002g、0.0025g、0.003g、0.0035g、0.004g、0.0045g、0.005g、0.0055g、0.006g、0.0065g、0.007g、0.0075g、0.008g、0.0085g、0.009g、0.0095g、0.01g、0.015g、0.02g、0.025g、0.03g、0.035g、0.04g、0.045g、0.05g、0.055g、0.06g、0.065g、0.07g、0.075g、0.08g、0.085g、0.09g、0.095g、0.1g、0.15g、0.2g、0.25g、0.3g、0.35g、0.4g、0.45g、0.5g、0.55g、0.6g、0.65g、0.7g、0.75g、0.8g、0.85g、0.9g、0.95g、1g、1.5g、2g、2.5、3g、3.5、4g、4.5g、5g、5.5g、6g、6.5g、7g、7.5g、8g、8.5g、9g、9.5g或10g。
在一些实施方案中,本发明的一?#21482;?#22810;?#21482;?#21512;物的量在0.0001-10g、0.0005-9g、0.001-8g、0.005-7g、0.01-6g、0.05-5g、0.1-4g、0.5-4g或1-3g的?#27573;?#20869;。
根据本发明的联合治疗在宽剂量?#27573;?#20869;是有效的。例如,在治疗成年人时,每天0.01至1000mg、0.5至100mg、1至50mg和每天5至40mg的剂量均为可使用的剂量的实例。一个示例性剂量为每天10至30mg。确切的剂量将取决于给药途径、施用化合物的形式、待治疗的受试者、待治疗的受试者的体重以及主?#25105;?#29983;的偏好?#36884;?#39564;。
本发明的药物组合物通常包含活性成分(例如,本发明的抑制剂或其药学上可接受的盐和/或配位络合物),以及一?#21482;?#22810;种药学上可接受的赋形剂、载体,包括但不限于惰性固体稀释剂和填料、稀释剂、无菌水溶液?#36879;?#31181;有机溶剂、渗透促进剂、增溶剂和佐剂。
下面描述了非限制的示例性药物组合物及其制备方法。
用于口服给药的药物组合物。在一些实施方案中,本发明提供用于口服给药的药物组合物,其包含至少一种治疗剂以及适于口服给药的药物赋形剂。
在一些实施方案中,本发明提供用于口服给药的固体药物组合物,其包含:(i)为PI3Kα抑制剂的化合物;(ii)为RTK抑制剂的第二化合物;和(iii)以及适合用于口服给药的药物赋形剂。在一些实施方案中,所述组合物进一步含有:(iv)第三药剂或甚至第四药剂。在一些实施方案中, 每一?#21482;?#21512;物或药剂以治疗有效量存在。在其他实施方案中,一?#21482;?#22810;?#21482;?#21512;物或药剂以亚治疗量存在,并且所述化合物或药剂协同作用以提供治疗有效的药物组合物。
在一些实施方案中,本发明提供一种药物组合物,其包含PI3-激酶α抑制剂和RTK抑制剂的组合。该PI3-激酶α抑制剂和RTK抑制剂可包装成单一口服剂型。在其他实施方案中,该PI3-激酶α抑制剂和RTK抑制剂可包装成单独的剂型如片剂。
在一个实施方案中,本发明提供了包含100mg至1.5g的本发明抑制剂的口服剂型。该口服剂型可为片剂,配制成液体形式,立即?#22836;?#25110;持续?#22836;?#30340;形式。
在一些实施方案中,药物组合物可为适合于口服的液体药物组合物。适于口服给药的本发明的药物组合物可呈离散的剂型,如胶囊剂、扁囊剂或片剂,或液体或喷雾剂,其各自含有预定量的活性成分,为粉末或在?#24085;!?#28342;液、或在水性或非水性液体中的悬浮液、水包油型乳剂或油包水型液体乳剂中,包括液体剂型(例如悬浮液或浆剂)和口服固体剂型(例如片剂或整?#33018;?#21058;)。如本文所用的术语“片剂”通常是指片剂、小胶囊、胶囊(包括软明胶胶囊)和锭剂。口服剂型可配制成片剂、丸剂、糖锭剂、胶囊剂、乳剂、亲脂和亲水混悬剂、液体剂、凝胶剂、糖浆剂、浆剂、混悬剂等等,由待治疗的个体或患者口服摄入。此类剂型可以通过任?#25105;?#23398;方法来制?#31119;?#20294;所有方法均包括使活性成分与构成一?#21482;?#22810;种必要成分的载体相结合的步骤。在一个实施方案中,本发明的抑制剂包含在胶?#25233;小?#36866;于口服给药的胶囊包括由明胶制成的推入配合胶囊,以及由明胶和诸如?#35270;?#25110;山梨醇的增塑剂制成的软密封胶囊。推入配合胶囊可含有与诸如乳糖的填料、诸如淀粉的粘合剂、和/或诸如滑石或硬脂酸镁的润滑剂以及任选的稳定剂混合的活性成分。任选地,用于口服的本发明的组合物可通过以下方式得到:将抑制剂与固体赋形剂混合,任选地?#24515;?#25152;得的混合物,并在加入合适的助剂(如果需要)之后对?#24085;?#28151;合物进行加工,从而得到片剂或糖锭剂芯。具体地,合适的赋形剂为填料,如糖类,包括乳糖、蔗糖、?#20107;?#37255;或山梨醇;?#23435;?#32032;制剂,如玉 米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基?#23435;?#32032;、羟丙基甲基?#23435;?#32032;、羧甲基?#23435;?#32032;钠和/或聚乙烯?#37327;?#28919;酮(PVP)。一般而言,通过均匀和紧密地混合活性成分与液体载体或精细粉碎的固体载体或两者,然后如果需要,将产品成形为所需的形式来制备组合物。例如,可以通过任选地与一?#21482;?#22810;种辅助成分压制或模制来制备片剂。可以通过在合适的机器中压制呈诸如粉末或?#24085;?#30340;自由流动形式的活性成分来制备压制片剂,该活性成分任选地混有赋形剂,例如但不限于粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂和/或表面活性剂或分散剂。可通过在合适的机器中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物的混合物来制备模制片剂。
由于水可?#28304;?#36827;一些化合物的?#21040;猓?#26412;发明进一步包括含有活性成分的无水药物组合物和剂型。例如,作为模拟长期存储的一种手段,可将水添加(例如5%)至药?#20998;校?#20197;确定诸如贮藏寿命或制剂随时间的稳定性等特性。本发明的无水药物组合物和剂型可使用无水的或含低水分的成分和低水?#21482;?#20302;湿度条件来制备。如果在制造、包装和/或储存过程中期望与水分和/或湿度大量接触,则含有乳糖的本发明的药物组合物和剂型可以制备成无水的。可以制备和贮存无水药物组合物,以使其无水性质得到保持。因此,可以使用已知能防止暴露于水的材料包装无水组合物,以使它们可以包括在合适的配方药剂盒中。合适的包装的实例包括但不限于,密封箔、塑料?#21462;?#21333;位剂量容器、泡罩包装和带状包装。
可以按照常规的药物混合?#38469;?#23558;活性成分与药物载体在紧密混合物中组合。根据给药所需的制剂形式,载体可以采取多种形式。在制备用于口服剂型的组合物时,可使用任何常用的药物介?#39318;?#20026;载体,在口服液体制剂(如悬浮液、溶液剂和酏剂)或气雾剂的情况下,例如水、二?#32908;?#27833;、?#32908;?#35843;味剂、防腐剂、着色剂等;或者在口服固体制剂的情况下,在不使用乳糖的一些实施方案中,可使用诸如淀粉、糖、微晶?#23435;?#32032;、稀释剂、成粒剂、润滑剂、粘合剂和崩解剂的载体。例如,对于固体口服制剂合适的载体包括粉剂、胶囊和片剂。如果需要,可以通过标准的水性或非水性?#38469;?#23558;片剂进行包?#38534;?
适合用于药物组合物和剂型中的粘合剂包括但不限于,玉米淀粉、马铃薯淀粉或其他淀粉、明胶、天然和合成树胶如阿拉伯胶、藻酸钠、藻酸、其他藻酸盐、粉状黄蓍胶、瓜耳胶、?#23435;?#32032;及其衍生物(例如,?#19968;宋?#32032;、醋酸?#23435;?#32032;、羧甲基?#23435;?#32032;钙、羧甲基?#23435;?#32032;钠)、聚乙烯基?#37327;?#28919;酮、甲基?#23435;?#32032;、预胶化淀粉、羟丙基甲基?#23435;?#32032;、微晶?#23435;?#32032;及其混合物。
用于本文所公开的药物组合物和剂型的合适的填料的实例包括但不限于滑石、碳酸钙(例如,?#24085;?#25110;粉末)、微晶?#23435;?#32032;、粉状?#23435;?#32032;、葡萄糖结合剂(dextrate)、高岭土、?#20107;?#31958;?#32908;?#30789;酸、山梨糖?#32908;?#28096;粉、预胶化淀粉及其混合物。
在本发明的组合物中可使用崩解剂以提供?#21271;?#38706;于含水环境时可崩解的片剂。太多的崩解剂会产生可能在瓶子中崩解的片剂。太少则可能不足以发生崩解,并且因此改变活性成分从剂型中?#22836;?#30340;速率和程度。因此,可以使用足量的崩解剂(?#28820;?#22826;少也不太多以至于有害地改变活性成分的?#22836;?来形成本文所公开的化合物的剂型。所用的崩解剂的量可根据制剂类型?#36879;?#33647;方式而变化,?#20918;?#39046;域普通?#38469;?#20154;员可以容易地辨别。在药物组合物中可以使用约0.5%至约15%(重量)的崩解剂,或约1%至约5%(重量)的崩解剂。可用于形成本发明的药物组合物和剂型的崩解剂包括但不限于,琼脂-琼脂、海藻酸、碳酸钙、微晶?#23435;?#32032;、交联羧甲基?#23435;?#32032;钠、交聚维酮、波拉克林钾、羟基乙酸淀粉钠、马铃薯或木薯淀粉、其他淀粉、预胶化淀粉、其他淀粉、粘土、其他藻胶、其他?#23435;?#32032;、树胶或其混合物。
用于形成本发明的药物组合物和剂型的润滑剂包括但不限于,硬脂酸钙、硬脂酸镁、矿物油、轻质矿物油、?#35270;汀?#23665;梨糖?#32908;⒏事?#31958;?#32908;?#32858;乙二?#32908;?#20854;他二?#32908;?#30828;脂酸、十二烷基硫酸钠、滑石、氢化植物油(例如,花生油、?#25326;延汀?#33909;花?#24310;汀?#33437;麻油、橄榄油、玉?#23376;?#21644;大豆油)、硬脂酸锌、油酸乙酯、月桂酸乙酯、琼脂或其混合物。其他的润滑剂包括,例如,硅酸盐硅胶、合成二氧化硅的凝聚型气溶胶或它们的混合物。可任选地以小于药物组合物的约1%(重量)的量加入润滑剂。
润滑剂还可与组织屏障一起使用,其包括但不限于多糖、polyglycans、Seprafilm、Interceed和透明质酸。
当需要水性悬浮液和/或酏剂用于口服给药时,其中的基本活性成分可与各种甜味剂或调味剂、着色物质或染料组合,并且如果需要的?#22467;?#21487;与乳化剂和/或悬浮剂,连同诸如水、乙?#32908;?#19993;二?#32908;⒏视?#21450;其各种组合的稀释剂一起组合。
片剂可以不包衣或通过已知?#38469;?#21253;衣以延迟在胃肠道中的崩解和吸收,从而在较长的时间内提供持久的作用。例如,可以采用诸如单硬脂酸?#35270;王?#25110;二硬脂酸?#35270;王?#30340;时间延迟材料。用于口服使用的制剂?#37096;?#20197;呈硬明胶胶囊形式,其中活性成分与诸如碳酸钙、磷酸钙或高岭土的惰性固体稀释剂混合,或呈软明胶胶囊形式,其中活性成分与水或诸如花生油、液体石蜡或橄榄油的油介质混合。
可用于形成本发明的药物组合物和剂型的表面活性剂包括但不限于,亲水性表面活性剂、亲脂性表面活性剂及其混合物。也就是说,可以采用亲水性表面活性剂的混合物,?#37096;?#20197;采用亲脂性表面活性剂的混合物,或还可以采用至少一种亲水性表面活性剂和至少一种亲脂性表面活性剂的混合物。
合适的亲水性表面活性剂通常可具有至少为10的HLB值,而合适的亲脂性表面活性剂通常可具有约为10或小于约10的HLB值。亲水-亲脂平衡(“HLB”值)是用于表征非?#33009;有?#30340;两亲性化合物的相对亲水性和疏水性的经验参数。具有较低HLB值的表面活性剂是更亲脂性或更疏水性的,且在油中有更大的溶解度,而具有?#32454;逪LB值的表面活性剂是更亲水性的,且在水溶液中有更大的溶解度。通常认为亲水性表面活性剂是具有大于约10的HLB值的那些化合物,以及HLB标度通常不适用的阴?#33009;印?#38451;?#33009;?#25110;两性?#33009;?#21270;合物。同样,亲脂性(即,疏水性)表面活性剂是具有等于或小于约10的HLB值的化合物。然而,表面活性剂的HLB值仅为通常用于实现工业、制药和化妆品乳剂的配制的?#33268;?#25351;?#32908;?
亲水性表面活性剂可为?#33009;有?#30340;或非?#33009;有?#30340;。合适的?#33009;有?#34920; 面活性剂包括但不限于,烷基铵盐;梭?#23384;?#37240;盐;氨基酸、寡肽和多肽的脂肪酸衍生物;氨基酸、寡肽和多肽的?#35270;王?#34893;生物;卵磷脂和氢化卵磷脂;溶血卵磷脂和氢化溶血卵磷脂;磷脂及其衍生物;溶血磷脂及其衍生物;肉碱脂肪酸酯盐;烷基硫酸酯的盐;脂肪酸盐;多库酯钠;酰基乳酸酯(acylactylate);单?#35270;王?#21644;二?#35270;王?#30340;单乙酰化酒石酸酯和二乙酰化酒石酸酯;琥珀酸单?#35270;王?#21644;二?#35270;王ィ?#21333;?#35270;王?#21644;二?#35270;王?#30340;柠檬酸酯;及其混合物。
在上述基团中,举例来说,?#33009;有?#34920;面活性剂包括:卵磷脂、溶血卵磷脂、磷脂、溶血磷脂及其衍生物;肉碱脂肪酸酯盐;烷基硫酸酯的盐;脂肪酸盐;多库酯钠;酰基乳酸酯;单?#35270;王?#21644;二?#35270;王?#30340;单乙酰化酒石酸酯和二乙酰化酒石酸酯;琥珀酸单?#35270;王?#21644;二?#35270;王ィ?#21333;?#35270;王?#21644;二?#35270;王?#30340;柠檬酸酯;及其混合物。
?#33009;有?#34920;面活性剂可以是以下物质的?#33009;?#21270;形式:卵磷脂、溶血卵磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙?#21450;貳?#30967;脂酰?#35270;汀?#30967;脂酸、磷脂酰丝氨酸、溶血磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰乙?#21450;貳?#28342;血磷脂酰?#35270;汀?#28342;血磷脂酸、溶血磷脂酰丝氨酸、PEG-磷脂酰乙?#21450;貳VP-磷脂酰乙?#21450;貳?#33026;肪酸乳酰酯、硬脂酰基-2-乳酸盐(stearoyl-2-lactylate)、硬脂酰乳酸盐(stearoyl lactylate)、琥珀酸单?#35270;王ァ?#21333;?#35270;王?二?#35270;王?#30340;单乙酰酒石酸酯/二乙酰酒石酸酯、单?#35270;王?二?#35270;王?#30340;柠檬酸酯、胆酰肌氨酸(cholylsarcosine)、己酸酯、辛酸酯、癸酸酯、月桂酸酯、肉豆蔻酸酯、棕榈酸酯、油酸酯、蓖麻醇酸酯、亚油酸酯、亚麻酸酯、硬脂酸酯、月桂基硫酸酯、?#22218;?#37232;硫酸盐(teracecyl sulfate)、多库酯、月桂酰肉碱、棕榈酰肉碱、肉豆蔻酰肉碱及其?#25105;?#21450;混合物。
亲水性非?#33009;有?#34920;面活性剂可以包括但不限于,烷基葡糖苷;烷基麦芽糖苷;烷硫基葡糖苷;十二烷基聚乙二醇?#35270;王ィ?#35832;如聚乙二醇烷基醚的聚氧化烯烷基醚;诸如聚乙二醇烷基酚的聚氧化烯烷基酚;诸如聚乙二醇脂肪酸单酯?#36884;?#20057;二醇脂肪酸二酯的聚氧化烯烷基?#21448;?#32938;酸酯;聚乙二醇?#35270;?#33026;肪酸酯;聚?#35270;?#33026;肪酸酯;诸如聚乙二?#38469;?#27700;山梨糖醇脂肪酸酯的聚氧化烯失水山梨糖醇脂肪酸酯;多元?#21152;?#30001;?#35270;?酯、植物油、氢化植物油、脂肪酸和甾醇组成的组的至少一个成员的亲水性酯交换产物;聚氧乙烯甾?#32908;?#34893;生物及其类似物;聚氧乙烯化维生素及其衍生物;聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物;及其混合物;聚乙二?#38469;?#27700;山梨糖醇脂肪酸酯和多元?#21152;?#30001;?#35270;?#19977;酯、植物油和氢化植物油组成的组的至少一个成员的亲水性酯交换产物。多元醇可以是?#35270;汀?#20057;二?#32908;?#32858;乙二?#32908;?#23665;梨糖?#32908;?#19993;二?#32908;?#23395;戊四醇或糖。
其他的亲水性非?#33009;有?#34920;面活性剂包括但不限于,PEG-10月桂酸酯、PEG-12月桂酸酯、PEG-20月桂酸酯、PEG-32月桂酸酯、PEG-32二月桂酸酯、PEG-12油酸酯、PEG-15油酸酯、PEG-20油酸酯、PEG-20二油酸酯、PEG-32油酸酯、PEG-200油酸酯、PEG-400油酸酯、PEG-15硬脂酸酯、PEG-32二硬脂酸酯、PEG-40硬脂酸酯、PEG-100硬脂酸酯、PEG-20二月桂酸酯、PEG-25三油酸?#35270;王ァEG-32二油酸酯、PEG-20月桂酸?#35270;王ァEG-30月桂酸?#35270;王ァEG-20硬脂酸?#35270;王ァEG-20油酸?#35270;王ァEG-30油酸?#35270;王ァEG-30月桂酸?#35270;王ァEG-40月桂酸?#35270;王ァEG-40棕?#31561;视汀EG-50氢化蓖麻油、PEG-40蓖麻油、PEG-35蓖麻油、PEG-60蓖麻油、PEG-40氢化蓖麻油、PEG-60氢化蓖麻油、PEG-60玉?#23376;汀EG-6癸酸/辛酸?#35270;王ァEG-8癸酸/辛酸?#35270;王ァ?#32858;?#35270;?#22522;-10月桂酸酯、PEG-30胆固?#32908;EG-25植物甾?#32908;EG-30大豆甾?#32908;EG-20三油酸酯、PEG-40失水山梨糖?#21152;?#37240;酯、PEG-80失水山梨糖醇月桂酸酯、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、POE-9月桂基?#36873;OE-23月桂基?#36873;OE-10油基?#36873;OE-20油基?#36873;OE-20硬脂基?#36873;?#29983;育酚PEG-100琥珀酸酯、PEG-24胆固?#32908;?#32858;?#35270;?#22522;-10油酸酯、吐温40、吐温60、蔗糖单硬脂酸酯、蔗糖单月桂酸酯、蔗糖单棕榈酸酯、PEG10-100壬酚系列、PEG15-100辛基酚系列以及?#32496;?#27801;姆。
仅举例来说,合适的亲脂性表面活性剂包括:脂肪醇;?#35270;?#33026;肪酸酯;乙酰化?#35270;?#33026;肪酸酯?#22351;图?#37255;脂肪酸酯;丙二醇脂肪酸酯;失水山梨糖醇脂肪酸酯;聚乙二?#38469;?#27700;山梨糖醇脂肪酸酯;甾醇和甾醇衍生物;聚氧乙烯化甾醇和甾醇衍生物;聚乙二醇烷基醚;糖酯;糖醚;单?#35270;王?#21644;二?#35270;王?#30340;乳酸衍生物;多元?#21152;?#30001;?#35270;王ァ?#26893;物油、氢化植 物油、脂肪酸和甾醇组成的组的至少一个成员的疏水性酯交换产物?#25381;?#28342;性维生素/维生素衍生物;及其混合物。在该组中,优选的亲脂性表面活性剂包括?#35270;?#33026;肪酸酯、丙二醇脂肪酸酯及其混合物,或者是多元?#21152;?#30001;植物油、氢化植物油?#36879;视?#19977;酯组成的组的至少一个成员的疏水性酯交换产物。
在一个实施方案中,组合物可包括增溶剂以确保本发明化合物的良好增溶和/或溶解,并最小化本发明化合物的沉淀。这对于非口服使用的组合物如用于注射的组合物可能尤其重要。还可加入增溶剂以提高亲水性药物和/或诸如表面活性剂的其他组分的溶解度,或维持组合物为稳定或均一的溶液或分散液。
合适的增溶剂的实例包括但不限于以下物质:醇和多元醇,如乙?#32908;?#24322;丙?#32908;?#19969;?#32908;?#33519;?#29366;肌?#20057;二?#32908;?#19993;二?#32908;?#19969;二醇及其异构体、?#35270;汀?#23395;戊四?#32908;?#23665;梨糖?#32908;⒏事洞肌?#36824;氧二元?#32908;?#24322;山梨醇二甲酯、聚乙二?#32908;?#32858;丙二?#32908;?#32858;乙烯?#32908;?#32671;丙基甲基?#23435;?#32032;和其他的?#23435;?#32032;衍生物、环糊精和环糊精衍生物;平均分子量为约200至约6000的聚乙二醇的醚,如四氢糠醇聚乙二醇醚(糖原糠醛)或甲氧基PEG;酰胺和其他含氮化合物,如2-?#37327;?#28919;酮、2-哌啶酮、ε-己内酰胺、N-烷基?#37327;?#28919;酮、N-羟基烷基?#37327;?#28919;酮、N-烷基哌啶酮、N-烷基己内酰胺、二甲基乙酰胺?#36884;?#20057;烯?#37327;?#28919;酮;酯类,如丙酸乙酯、柠檬酸三丁酯、柠檬酸乙酰基三乙酯、柠檬酸乙酰基三丁酯、柠檬酸三乙酯、油酸乙酯、辛酸乙酯、丁酸乙酯、三乙酸?#35270;王ァ?#19993;二醇单乙酸酯、丙二醇二乙酸酯、ε-己内酯及其异构体、δ-戊内酯及其异构体、β-丁内酯及其异构体;以及本领域已知的其他增溶剂,如二甲基乙酰胺、异山梨醇二甲酯、N-甲基?#37327;?#28919;酮、单辛精、二甘醇单乙醚和水。
还可以使用增溶剂的混合物。实例包括但不限于,?#35270;?#19977;乙酸酯、柠檬酸三乙酯、油酸乙酯、辛酸乙酯、二甲基乙酰胺、N-甲基?#37327;?#28919;酮、N-羟基?#19968;量?#28919;酮、聚乙烯?#37327;?#28919;酮、羟丙基甲基?#23435;?#32032;、羟丙基环糊精、乙?#32908;?#32858;乙二醇200-100、糖原糠醛(glycofurol)、transcutol、丙二醇和异山梨醇二甲酯。特别优选的增溶剂包括山梨糖?#32908;⒏视汀⒏视?#19977; 乙酸酯、乙?#32908;EG-400、糖原糠醛和丙二?#32908;?
可含有的增溶剂的量没有特别限制。给定的增溶剂的量可以限制为生物可接受的量,其可由本领域?#38469;?#20154;员很容易地确定。在某些情况下,含有?#23545;?#36229;过生物可接受量的量的增溶剂可能对例如最大化药物的浓度是有利的,在将组合物提供至受试者之前用诸如蒸馏或蒸发的常规?#38469;?#38500;去过量的增溶剂。因此,如果存在的?#22467;?#22522;于药物和其他赋形剂的总重量,增溶剂的重量比可为10%、25%、50%、100%或高达约200%(重量)。如果需要,?#37096;?#20197;使用非常少量的增溶剂,如5%、2%、1%或甚至更少。通常,增溶剂可以以约1%至约100%的量存在,更典型地为约5%至约25%(重量)。
组合物可进一步包含一?#21482;?#22810;种药学上可接受的添加剂?#36879;?#24418;剂。此类添加剂?#36879;?#24418;剂包括但不限于,防粘剂、防泡剂、缓冲剂、聚合物、抗氧化剂、防腐剂、螯合剂、粘度调节剂、?#24085;?#35843;节剂(tonicifiers)、调味剂、着色剂、增味剂、遮光剂、悬浮剂、粘合剂、填料、增塑剂、润滑剂及其混合物。
此外,为了便于加工,提高稳定性,或出于其他原因,可将酸或碱引入该组合物中。药学上可接受的碱的实例包括氨基酸、氨基酸酯、氢氧化铵、氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸氢钠、氢氧化铝、碳酸钙、氢氧化镁、硅酸铝镁、合成硅酸铝、合成二水方解石(hydrocalcite)、氢氧化镁铝、二异丙基乙胺、乙?#21450;貳?#20057;二胺、三乙?#21450;貳?#19977;乙胺、三异丙?#21450;貳?#19977;甲胺、三(羟甲基)氨基甲烷(TRIS)?#21462;?#21516;样合适的是作为药学上可接受的酸的盐的碱,该酸例如?#19988;?#37240;、丙烯酸、己二酸、海藻酸、链烷磺酸、氨基酸、抗坏血酸、苯甲酸、硼酸、丁酸、碳酸、柠檬酸、脂肪酸、甲酸、富马酸、葡萄糖酸、氢醌磺酸、异抗坏血酸、乳酸、马来酸、草酸、对溴苯磺酸、丙酸、对甲苯磺酸、水杨酸、硬脂酸、琥珀酸、单宁酸、酒石酸、巯基乙酸、甲苯磺酸、尿酸?#21462;?#36824;可使用多元酸的盐,如磷酸钠、磷酸氢二钠和磷酸二氢钠。当碱为盐时,阳?#33009;?#21487;以是任何方便的和药学上可接受的阳?#33009;櫻?#22914;铵、碱金属、碱土金属?#21462;?#23454;例可包括但不限于,钠、钾、锂、镁、钙和铵。
合适的酸为药学上可接受的有机酸或无机酸。合适的无机酸的实例包括盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸、硼酸、磷酸?#21462;?#21512;适的有机酸的实例包括乙酸、丙烯酸、己二酸、海藻酸、链烷磺酸、氨基酸、抗坏血酸、苯甲酸、硼酸、丁酸、碳酸、柠檬酸、脂肪酸、甲酸、富马酸、葡萄糖酸、氢醌磺酸、异抗坏血酸、乳酸、马来酸、甲磺酸、草酸、对溴苯磺酸、丙酸、对甲苯磺酸、水杨酸、硬脂酸、琥珀酸、单宁酸、酒石酸、巯基乙酸、甲苯磺酸、尿酸?#21462;?
用于注射的药物组合物。在一些实施方案中,本发明提供用于注射的药物组合物,该组合物包含至少一种本发明的化合物和适合于注射的药物赋形剂。例如,提供了一种注射用药物组合物,其包含至少一种PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂。?#22266;?#20379;了包含PI3Kα抑制剂的药物组合物和包含RTK抑制剂的药物组合物,其中PI3Kα抑制剂与RTK抑制剂分开或一起施用。I3Kα抑制剂和RTK抑制剂可分开配制,并且可以进一步包括第三治疗剂。组合物中的组分和药剂的量如本文所述。
可将本发明的新型组合物引入其中用于通过注射给药的形式包括水性或油性的悬浮?#28023;?#25110;具有芝麻油、玉?#23376;汀⒚拮延?#25110;花生油的乳剂,以及酏剂,?#20107;?#31958;?#32908;?#21491;旋糖或无菌水溶液和类似的药物载体。
盐水中的水溶液也常规用于注射。还可采用乙?#32908;⒏视汀?#19993;二?#32908;?#28082;体聚乙二醇等(及其合适的混合物)、环糊精衍生物以及植物油。例如,通过使用诸如卵磷脂的包衣以在分散体的情况下维持所需的?#24085;?#22823;小和通过使用表面活性剂可以保持?#23454;?#30340;流动性。可以通过各种抗细菌剂和抗真菌剂,例如对羟基苯甲酸酯、氯丁?#32908;?#33519;?#21360;?#23665;梨酸、硫柳汞等,来阻止微生物的作用。
可通过根据需要将所需量的本发明的化合物引入含有如上面列举的各?#21046;?#20182;组分的?#23454;?#30340;溶剂中,随后过滤除菌来制备无菌注射溶液。通常,通过将各种灭菌的活性成分引入含有基本分散介质和来自上面所列举的那些组成的所需其他组分的无菌载体中来制备分散体。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末的情况下,某些理想的制备方法是真空?#31245;?#21644;冷冻?#31245;錛际酰?#36825;些方法由其先前无菌过滤的溶液产生活性成分加 上任何附加的所需组分的粉末。
用于局部(例如,经皮)递送的药物组合物。在一些实施方案中,本发明提供用于经皮递送的药物组合物,该组合物包含至少一种本发明的化合物和适于经皮递送的药物赋形剂。例如,提供了一种用于局部递送的药物组合物,其包含至少一种PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂。?#22266;?#20379;了包含PI3Kα抑制剂的、用于局部递送的药物组合物,以及包含RTK抑制剂的、用于局部递送的药物组合物,其中PI3Kα抑制剂与RTK抑制剂分开或一起施用。PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂可分开配制,并且可进一步包括第三治疗剂。
本发明的组合物可以配制成适合局部或外?#37238;?#33647;的固体、半固体或液体形式的制剂,如凝胶、水溶性胶冻剂、乳膏剂、洗剂、悬浮液、泡沫剂、粉剂、膏剂、软膏剂、溶液剂、油剂、糊剂、栓剂、喷雾剂、乳剂、盐溶液、基于二甲亚砜(DMSO)的溶液。通常,具有?#32454;?#23494;度的载体能够使一个区域长时间地暴露于活性成分。与此相反,溶液制剂可能会使所选择的区域更快地暴露于活性成分。
药物组合物还可以包含合适的固体或凝?#21512;?#36733;体或赋形剂,该载体或赋形剂为允许增加渗透或协助递送治疗分子穿过皮肤的角质渗透阻隔层的化合物。局部制剂领域的熟?#33459;际?#20154;?#24065;?#30693;许多这样的渗透增强分子。此类载体?#36879;?#24418;剂的实例包括但不限于,湿润剂(例如,脲)、二醇(例如,丙二醇)、醇类(例如,乙醇)、脂肪酸(例如,油酸)、表面活性剂(例如,肉豆蔻酸异丙酯和十二烷基硫酸钠)、?#37327;?#28919;酮、?#35270;?#21333;月桂酸酯、亚砜类、萜类(例如,薄荷醇)、胺类、酰胺类、烷烃、烷?#32908;?#27700;、碳酸钙、磷酸钙、各种糖、淀粉、?#23435;?#32032;衍生物、明胶以及诸如聚乙二醇的聚合物。
本发明的方法中所使用的另一个示例性制剂采用经皮递?#22949;?#32622;(“贴剂”)。这样的透皮贴剂可用于以控制量提供含有或不含另一种药剂的本发明抑制剂的连续或不连续输注。
用于药剂递送的透皮贴剂的构建和使用为本领域所公知。参见,例如,美国专利5,023,252、4,992,445和5,001,139。可以构建此类贴剂 用于药剂的连续、脉冲式或按需递送。
用于吸入的药物组合物。用于吸入或吹入的组合物包括在药学上可接受的水性或有机溶剂或其混合物中的溶液和悬浮液以及粉剂。该液体或固体组合物可以含有如上文所述的合适的药学上可接受的赋形剂。优选地,针对局部或全身效应,通过口服或鼻腔呼吸途径施?#37238;?#32452;合物。在优选的药学上可接受的溶剂中的组合物可通过使用惰性气体雾化。雾化的溶液可?#28216;?#21270;装置直接吸入或可将雾化装?#37238;?#25509;到面?#21482;?#38388;歇正压呼吸机上。溶液、悬浮液或粉末状组合物可以合适的方式从递?#36879;?#21046;剂的装置施用,优选地经口或经鼻施用。例如,提供了一种用于呼吸递送的药物组合物,其包含至少一种PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂。?#22266;?#20379;了包含PI3Kα抑制剂的、用于呼吸递送的药物组合物,以及包含RTK抑制剂的、用于呼吸递送的药物组合物,其中PI3Kα抑制剂与RTK抑制剂分开或一起施用。包含PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂的组合物可以分开配制,并且可进一步包括第三治疗剂。
其他药物组合物。?#37096;?#20197;由本文所述的组合物和一?#21482;?#22810;种适于舌下、口腔、直肠、骨内、眼内、鼻内、硬膜外或椎管内给药的药学上可接受的赋形剂制备药物组合物。此类药物组合物的制备为本领域所公知。参见,例如,Anderson,Philip O.;Knoben,James E.;Troutman,William G,编,Handbook of Clinical Drug Data,第十版,McGraw-Hill,2002;Pratt和Taylor,编,Principles of Drug Action,第三版,Churchill Livingston,New York,1990;Katzung,编,Basic and Clinical Pharmacology,第九版,McGraw Hill,20037ybg;Goodman和Gilman,编,The Pharmacological Basis of Therapeutics,第十版,McGraw Hill,2001;Remingtons Pharmaceutical Sciences,第20版,Lippincott Williams & Wilkins.,2000;Martindale,The Extra Pharmacopoeia,第32版(The Pharmaceutical Press,London,1999);所有这些均通过引用整体并入本文。
本发明的各?#21482;?#21512;物或药物组合物的施用可通过任何能够将化合物递送至作用部位的方法来实现。这些方法包括口服途径、十二指肠内途径、肠胃外注射(包括静脉内、动脉内、皮下、肌肉内、血管内、腹膜 内或输注)、局部给药(例如,经皮应用)、直肠给药、通过导管或支架或通过吸入经由局部递送。还可经脂肪内或鞘内施用化合物。
所施用的各?#21482;?#21512;物的量将取决于受治疗的哺乳动物、病症或病状的?#29616;?#31243;度、给药速率、化合物的配置和处方医生的判断。不管怎样,有效剂量在约0.001至约100mg/kg体重/天,优选约1至约35mg/kg/天的?#27573;?#20869;,为单次或分次剂量。对于70kg的人,这相当于约0.05至7g/天,优选约0.05至约2.5g/天。在一些情况下,低于上述?#27573;?#30340;下限的剂量水平可能已经绰绰有余,而在其他情况下,可以采?#37238;?#22823;的剂量而不致引起任何有害的副作用,例如,通过将这样较大的剂量分成几个小剂量用于全天给药。
在一些实施方案中,本发明的抑制剂以单一剂量给药。通常,这种给药通过注射例如静脉内注射进行,以便快速引入药剂。然而,?#37096;?#20197;?#20204;?#20351;用其他途径。单一剂量的本发明的抑制剂还可用于治疗急性病状。
在一些实施方案中,本发明的抑制剂以多次剂量给药。给药可以是每天约一次、两次、三次、四次、五次、六次或超过六次。给药可以是约每月一次、每两周一次、每周一次或隔日一次。在另一实施方案中,本发明的抑制剂和另一药剂约每天一次至约每天六次联合给药。在另一实施方案中,本发明的抑制剂和药剂的给药持续少于约7天。在又一实施方案中,给药持续超过约6天、10天、14天、28天、2个月、6个月或一年。在一些情况下,实?#33267;?#32493;给药并保持必要长的时间。
本发明的药剂的给药可持续必要长的时间。在一些实施方案中,本发明的药剂施用超过1、2、3、4、5、6、7、14或28天。在一些实施方案中,本发明的药剂施用少于28、14、7、6、5、4、3、2或1天。在一些实施方案中,本发明的药剂持续地长期施用,例如,用于治疗慢性疾病。
有效量的本发明的抑制剂可通过具有类似效用的药剂的任何公认的给药方式以单次或多次剂量施用,?#37238;?#33647;方式包括直肠、口腔、鼻内?#36884;?#30382;途径,通过动脉内注射、静脉内、腹膜内、肠胃外、肌肉内、皮 下、口服、局部,或作为吸入剂。
还可以通过浸渍的或涂覆的装置,例如支架,或插入动脉的圆柱状聚合物,来递送本发明的组合物。这样的给药方法可以,例如,帮助预防或改善诸如球囊血管成形术的?#36136;?#25805;作后的再狭窄。不受理论所束缚,本发明的化合物可以减慢或抑制促成再狭窄的动脉壁中的平滑肌细胞的迁移和增殖。例如,可通过从支架的支柱、从支架移植物、从移植物或从支架的盖子或鞘局部递送来施用本发明的抑制剂。在一些实施方案中,本发明的抑制剂与基质混合。此基质可以为聚合物基质,并且可以用于将化合物接合到支架。适合该用途的聚合物基质包括,例如基于内酯的聚酯或共聚酯,如聚乳酸、聚己内酯乙交酯、聚原酸酯、聚酐、聚氨基酸、多糖、聚磷腈、聚(醚-酯)共聚物(例如,PEO-PLLA);聚二甲基硅氧烷、聚(乙烯-乙酸乙烯酯)、基于丙烯酸酯的聚合物或共聚物(例如,聚?#19988;一?#30002;基丙烯酸甲酯,聚乙烯?#37327;?#28919;酮)、诸如聚四氟乙烯的氟化聚合物以及?#23435;?#32032;酯。合适的基质可能是非?#21040;?#24615;的或可随时间?#21040;?#32780;?#22836;?#20986;一?#21482;?#21512;物或多?#21482;?#21512;物。可通过各?#22336;?#27861;,如浸渍/旋涂、喷涂、浸涂和/或刷涂,将本发明的化合物应用于支架表面。可将化合物应用于溶剂中,并可以使溶剂蒸发,从而在支架上形成化合物层。或者,该化合物可位于支架体或移植物内,例如位于微通道或微孔内。当植入时,化合物从支架体扩散出来以接触动脉壁。可通过将所制成的含有这样的微孔或微通道的支架浸渍在本发明化合物在合?#21980;?#21058;中的溶液里,然后蒸发掉溶剂来制备此类支架。支架表面上的过量药物可以通过额外的短暂溶剂洗涤而除去。在其他实施方案中,本发明的化合物可?#24067;?#36830;接到支架或移植物上。可使用在体内?#21040;?#20174;而导致本发明化合物?#22836;?#30340;?#24067;?#36830;接体。任何生物不稳定的连接均可用于此目的,诸如酯、酰胺或酸酐连接。另外可?#28304;?#34880;管成形术中使用的气囊经血管内施用本发明的化合物。还可以经由心包(pericard)或外膜(advential)给予本发明制剂来血管外施用所述化合物以减少再狭窄。
可以如所述使用的多种支架装置公开于例如以下参考文献中,所有这些参考文献均通过引用并入本文:美国专利5451233;美国专利 5040548;美国专利5061273;美国专利5496346;美国专利5292331;美国专利5674278;美国专利3657744;美国专利4739762;美国专利5195984;美国专利5292331;美国专利5674278;美国专利5879382;美国专利6344053。
本发明的化合物可按剂量施用。本领域公知,由于化合物的药代动力学在个体间的差异,为获得最佳治疗需要对给药方案进行个性化。可根据本公开内容通过常规实验而?#19994;?#26412;发明抑制剂的剂量。
本发明的药物组合物可以为,例如适合口服给药的形式,如片剂、胶囊、丸剂、粉末、缓释制剂、溶液、悬浮?#28023;?#36866;合肠胃外注射的形式,如无菌溶液、悬浮液或乳剂,适合局部给药的形式,如软膏或乳膏剂,或适合直肠给药的形式,如栓剂。药物组合物可以是适合于准确剂量的单?#32963;?#33647;的单位剂量形式。药物组合物将包含常规的药物载体或赋形剂和作为活性成分的根据本发明的抑制剂。此外,它可包含其他药物或药剂、载体、佐剂?#21462;?
示例性的肠胃外给药形式包括活性化合物在诸如丙二醇或右旋糖水溶液的无菌水溶液中的溶液或悬浮液。如果需要,此类剂型可以进行?#23454;?#30340;缓冲。
本发明?#22266;?#20379;药剂盒(kit)。该药剂盒包括在合适的包装中的如本文所述的一?#21482;?#22810;种本发明的抑制剂,以及可包括使用说明、临床研究?#33268;邸?#21103;作用清单等的书面材料。这样的药剂?#35874;?#21487;以包括诸如科学参考文献、包?#23433;?#20837;材料、临床试验结果和/或它们的概要等的信息,该信息指示或确立该组合物的活性和/或优点,和/或描述剂量、给药、副作用、药物相互作用或对医疗保健提供者有用的其他信息。这类信息可基于各种研究(例如,使用涉及体内模型的实验动物的研究和基于人类临床试验的研究)的结果。药剂?#35874;?#21487;以包含另一种药剂。在一些实施方案中,在药剂盒内单独的容器中,本发明的化合物?#36879;?#33647;剂作为单独的组合物提供。在一些实施方案中,在药剂盒中的容器内,本发明的化合物?#36879;?#33647;剂作为单一组合物提供。合适的包装和使用的其他物品(例如,用于液体制剂的量杯、用于使空气暴露最小化的箔包装等)是本领域已知的并可 包括在药剂盒中。本文所述的药剂盒可被提供、销售和/或?#33889;?#32473;医?#21697;?#21153;提供者,包括医生、护士、药剂师、配方师?#21462;?#22312;一些实施方案中,药剂?#35874;?#21487;以直接销售给消费者。
在一些实施方案中,受试者是需要治疗癌症、癌前状况或病变的人,其中所述癌症优选为NSCL、乳腺癌、结肠癌或胰腺癌。可以根据本发明的方法用本发明的联合治疗或治疗剂的药学上可接受的盐、酯、前药、溶剂化物、水合物或衍生物治疗的受试者包括,例如,已经被诊断为患有以下疾病的患者:银?#30142;。?#20877;狭窄;动脉粥样硬化;BPH;乳腺癌,如在乳腺导管组织中的导管癌、髓样癌、胶样癌、导管癌以及炎性乳腺癌;卵巢癌,包括上皮性卵巢肿瘤,如在卵巢中的腺癌和从卵巢?#28814;?#31227;到腹腔的腺癌;子宫癌;宫颈癌,如在子宫颈上皮中的腺癌,包括鳞状细胞癌和腺癌;前列腺癌,如选自下组的前列腺癌?#21512;?#30284;或?#28814;?#31227;到骨中的腺癌;胰腺癌,如在胰管组织中的上皮癌和胰管中的腺癌;膀胱癌,如在膀胱中的移行细胞癌、尿路上皮癌(移行细胞癌)、在内衬于膀胱的膀胱上皮细胞中的肿瘤、鳞状细胞癌、腺癌和小细胞癌;白血病,如急?#36816;?#26679;白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、慢?#36816;?#26679;白血病、多毛细胞白血病、骨髓发育不?#32908;?#39592;髓增生性疾病、急?#36816;?#24615;白血病(AML)、慢?#36816;?#24615;白血病(CML)、肥大细胞增多症、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、多发性骨髓瘤(MM)以及骨髓增生异常综合征(MDS)?#36824;前环?#30284;,如非小细胞肺癌(NSCLC),其可分为鳞状细胞癌、腺癌和大细胞未?#21482;?#30284;以及小细胞肺癌;皮肤癌,如基底细胞癌、黑素瘤、鳞状细胞癌和光化性角化病,其为有时发展成鳞状细胞癌的皮肤病状;眼视网膜母细胞瘤;皮肤或眼内(眼)黑素瘤;原发性肝癌(?#21152;?#32925;脏的癌症);肾癌?#24739;?#29366;腺癌,如乳头状癌、滤泡癌、髓质癌和未?#21482;?#30284;;AIDS相关的淋巴瘤,如?#33268;?#22411;大B细胞淋巴瘤、B细胞免疫母细胞淋巴瘤和小无裂细胞淋巴瘤;卡波西肉瘤;病毒诱发的癌症,包括乙?#36879;?#28814;病毒(HBV)、丙?#36879;?#28814;病毒(HCV)诱发的癌症?#36879;?#32454;胞癌;1型人嗜淋巴细胞病毒(HTLV-1)和成人T细胞白血病/淋巴瘤;以及人类乳头状瘤病毒(HPV)和宫颈癌;中枢神经?#20302;?#30284;症(CNS),如原发性脑肿瘤, 其包括神经胶质瘤(星形细胞瘤、间变型星形细胞瘤或多形性胶质母细胞瘤)、少突神经胶质瘤、室管膜瘤、脑膜瘤、淋巴瘤、神经鞘瘤和髓母细胞瘤;周围神经?#20302;?PNS)癌,如听神经瘤和恶性周围神经鞘瘤(MPNST),包括神经?#23435;?#30244;和神经鞘瘤、恶性?#23435;?#24615;细胞瘤、恶性?#23435;?#32452;织细胞瘤、恶性脑膜瘤、恶性间皮瘤和恶性混合性米勒瘤;口腔和口咽癌,如下咽癌、喉癌、鼻咽癌和口咽癌;胃癌,如淋巴瘤、胃基质肿瘤和类癌瘤?#22238;和?#30284;,如包括精原细胞瘤和非精原细胞瘤的生殖细胞肿瘤(GCT),以及包括莱迪希细胞瘤和塞尔托利细胞瘤的性腺基质肿瘤;胸腺癌,如胸腺瘤、胸腺癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤类癌瘤或类癌肿瘤;直肠癌;以及结肠癌。
本发明还涉及治疗哺乳动物的糖尿病的方法,?#26757;?#27861;包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的本发明的联合治疗。
此外,本文所述的联合治疗可用于治疗痤疮。
此外,本文所述的联合治疗可用于治疗动脉硬化,包括动脉粥样硬化。动脉硬化为描述任何?#26800;?#25110;大动脉的硬化的通用术语。动脉粥样硬化是特定因动脉粥样斑块而引起的动脉硬化。
此外,本文所述的联合治疗可用于肾小球肾炎的治疗。肾小球肾?#36164;?#20197;肾小球炎症为特征的原发性或继发性自身免疫性肾脏疾病。其可以是无症状的,或出现血尿和/或蛋白尿。其有许多公认的类型,分为急性、亚急性或慢性肾小球肾炎。原因是感染(细菌、病毒或寄生虫病原体)、自身免疫或副肿瘤性的。
此外,本文所述的联合治疗可用于治疗滑囊炎、狼疮、急性播散性?#32422;?#39635;炎(ADEM)、爱迪生病、抗磷脂抗体综合征(APS)、再生?#20064;?#24615;贫血、自身免疫性肝炎、乳?#26377;骸?#20811;罗恩病、糖尿病(1型)、肺出血肾炎综合征、格雷夫斯病、格林-巴利综合征(GBS)、桥本病、炎性肠病、红斑狼疮、重症肌无力、斜?#21451;?#38453;挛肌阵挛综合征(OMS)、视神经炎、ord甲状腺炎、骨关节炎、葡萄膜视网膜炎、天疱疮、多关节炎、原发性胆汁性肝硬化、莱特尔综合征、Takayasu动脉炎、颞动脉炎、温热型自身免疫性溶血性贫血、韦格纳肉芽肿病、普秃、查加斯病、慢性疲?#22949;?#21512; 征、自主神经功能异常、子宫内膜异位症、化脓性汗腺炎、间质性膀胱炎、神经性肌强直、结节病、硬皮病、溃疡性结肠炎、白?#33018;紜?#22806;阴疼?#30784;?#38417;尾炎、动脉炎、关节炎、眼睑炎、细支气管炎、支气管炎、宫颈炎、胆管炎、胆囊炎、绒毛膜羊膜炎、结肠炎、结膜炎、膀胱炎、泪腺炎、皮肌炎、心内膜炎、子宫内膜炎、肠炎、小肠结肠炎、上髁炎、附睾炎、筋膜炎、?#23435;?#32455;炎、胃炎、胃肠炎、牙龈炎、肝炎、汗腺炎、回肠炎、虹膜炎、喉炎、乳腺炎、脑膜炎、脊髓炎、心肌炎、肌炎、肾炎、脐炎、卵巢炎、?#21644;?#28814;、骨炎、耳炎、胰腺炎、腮腺炎、心包炎、腹膜炎、咽炎、胸膜炎、静脉炎、肺炎、直肠炎、前列腺炎、肾盂肾炎、鼻炎、输卵管炎、鼻窦炎、口炎、滑膜炎、肌腱炎、扁桃体炎、葡萄膜炎、阴道炎、血管炎或外阴炎。
本发明还涉及治疗哺乳动物的心血管疾病的方法,?#26757;?#27861;包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的本发明的联合治疗。心血管疾病的实例包括但不限于动脉粥样硬化、再狭窄、血管闭塞、颈动脉阻塞性疾病或缺血性病状。
另一方面,本发明提供破坏白细胞功能或破坏破骨细胞功能的方法。?#26757;?#27861;包括使白细胞或破骨细胞接触功能破坏量的本发明的联合治疗。
在本发明的另一方面,提供了通过向受试者的眼睛施用一?#21482;?#22810;种本发明的联合治疗来治疗眼病的方法。进一步提供了通过滴眼剂、眼内注射、玻璃体内注射、局部给药,或通过使用药物洗?#28814;?#32622;、微胶囊、植入物或微流体装置施用本发明的联合治疗的方法。在一些情况下,联合治疗与增加该化合物的眼内渗透性的载体或赋形剂一起施用,诸如含有具有由界面膜所包围的油性核心的胶体?#24085;?#30340;油和水乳剂。
在一些情况下,胶体?#24085;?#21253;括至少一种阳?#33009;?#21058;和至少一?#22336;搶胱有?#34920;面活性剂,如?#32496;?#27801;姆、泰洛?#24034;础?#32858;山梨酯、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、失水山梨醇酯或聚乙二?#21152;?#33026;酸酯。在一些情况下,阳?#33009;?#21058;为烷基胺、三烷基胺、季铵化合物、阳?#33009;又?#36136;、氨基?#32908;?#21452;胍盐、阳?#33009;?#21270;合物或其混合物。在一些情况下,阳?#33009;?#21058;是双胍盐,如氯己定、 聚?#21271;?#22522;双胍、苯乙双胍、烷基双胍或其混合物。在一些情况下,季铵化合物是苯扎卤铵(benzalkonium halide)、劳拉卤铵(lauralkonium halide)、西曲溴铵、十六烷基三甲基卤化铵、十四烷基三甲基卤化铵、十二烷基三甲基卤化铵、西曲卤铵(cetrimonium halide)、苄索卤铵(benzethonium halide)、山萮基苄基二甲基卤化铵(behenalkonium halide)、西他卤铵(cetalkonium halide)、鲸蜡基?#19968;?#20108;甲基卤化铵(cetethyldimonium halide)、西吡卤铵(cetylpyridinium halide)、苯度卤铵(benzododecinium halide)、氯烯丙基乌洛托品卤化物、肉豆蔻基苄基二甲基卤铵(rnyristylalkonium halide)、司拉卤铵(stearalkonium halide)或其两?#21482;?#26356;多种的混合物。在一些情况下,阳?#33009;?#21058;是苯扎氯铵、劳拉氯铵、苯度溴铵、苄索氯铵、十六烷基三甲基溴化铵、十四烷基三甲基溴化铵、十二烷基三甲基溴化铵或其两?#21482;?#26356;多种的混合物。在一些情况下,油相为矿物油和轻质矿物油、中链?#35270;?#19977;酯(MCT)、椰子?#20572;?#21253;括氢化?#25326;延汀?#27682;化棕?#28068;汀?#27682;化蓖麻油或氢化大豆油的氢化?#20572;?#21253;括聚乙二醇-40氢化蓖麻油、聚乙二醇-60氢化蓖麻油或聚乙二醇-100氢化蓖麻油的聚氧乙烯氢化蓖麻油衍生物。
本发明进一步提供通过使激酶与有效量的包含PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂的组合物接触来调节PI3K和/或RTK激酶活性的方法。调节可以是抑制或活化激酶的活性。在一些实施方案中,本发明提供通过使激酶与有效量的包含PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂的组合物在溶液中接触来抑制激酶活性的方法。在一些实施方案中,本发明提供通过接触表达?#34892;?#36259;的激酶的细胞、组织或器官来抑制激酶活性的方法。在一些实施方案中,本发明提供通过向受试者施用有效量的包含PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂的组合物来抑制受试者(包括但不限于啮齿动物和哺乳动物(例如,人))中的激酶活性的方法。在一些实施方案中,抑制的百分比超过50%、60%、70%、80%或90%。
进一步的联合治疗
本发明?#22266;?#20379;用于进一步的联合治疗的方法,其中除PI3Kα抑制 剂和RTK抑制剂以外,还使用已知调节其他途径或同一途径的其他组成部?#21482;?#29978;至数组重叠的靶酶的药剂,或其药学上可接受的盐、酯、前药、溶剂化物、水合物或衍生物。在一个方面,这样的治疗包括但不限于包含PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂的组合物与化学治疗剂、治疗性抗体和放射治疗的组合,以在需要时提供协同的或加成的治疗效果。
在另一方面,这样的治疗包括但不限于包含PI3Kα抑制剂和RTK抑制剂的组合物与mTOR抑制剂的组合。在一些实施方案中,mTOR抑制剂是如美国专利号7,651,687或7,585,868中所述的或如国际专利申请WO2007/079164、WO2007/061737、WO2007/106503或WO2007/134828中所述的化合物,这些文献通过引用整体并入本文。
对于自身免疫性疾病的治疗,本发明的化合物或药物组合物可与包括但不限于和的常见处方药联合使用。对于呼吸?#20302;?#30142;病的治疗,本发明的化合物或药物组合物可与包括但不限于和的常见处方药联合施用。
本发明的化合物可以与用于减轻诸如?#32422;?#39635;炎的炎症性病状、哮喘和本文所述的其他疾病的症状的其他药剂一起配制或施用。这些药剂包括非甾体抗炎药(NSAIDs),例如,乙酰水杨酸;布洛芬;?#30103;?#29983;;吲哚美?#31890;?#33816;丁美酮;托美丁?#21462;?#30382;质类固醇用于减轻炎症和抑制免疫?#20302;?#30340;活性。这种类型的最常用的处方药是泼尼松。氯喹(Aralen)或羟氯喹(Plaquenil)对于一些患有狼疮的个体也是非常有用的。它们最常针对狼疮的皮肤和关节症状而开出。硫唑嘌呤(Imuran)和环磷酰胺(Cytoxan)抑制炎症并倾向于抑制免疫?#20302;场?#20854;他试剂,例如甲氨蝶呤和环孢菌素,用于控制狼疮的症状。抗凝剂用来防止血液迅速凝固。它们的?#27573;?#20174;防止血小板粘结的极低剂量的阿司匹?#20540;?#32925;素/香豆素。
另一方面,本发明还涉及用于抑制哺乳动物中的异常细胞生长的方法和药物组合物,其包括一定量的本发明的抑制剂或其药学上可接受的盐、酯、前药、溶剂化物、水合物或衍生物与一定量的抗肿瘤剂(例如,化学治疗剂)的组合。许多化学治疗剂目前是本领域中已知的,并可与本 发明的化合物联合使用。
在一些实施方案中,化学治疗剂选自有丝分裂抑制剂、烷化剂、抗代谢物、?#24230;?#24615;抗生素、生长因子抑制剂、细胞周期抑制剂、酶、拓扑异构酶抑制剂、生物?#20174;?#35843;节剂、抗激素、血管生成抑制剂、免疫治疗剂、促凋亡剂和抗雄激素。非限制性实例是化学治疗剂、细胞毒性剂和?#35831;?#31867;小分子,如格列卫(Gleevec)(甲磺酸伊马替尼)、万珂(Velcade)(硼替佐米)、康士得(Casodex)(比卡鲁胺)、易瑞沙(Iressa)(吉非替尼)和阿霉素以及许多化学治疗剂。化学治疗剂的非限制性实例包括?#21644;?#21270;剂,如噻替派和环磷酰胺(CYTOXANTM);烷基磺酸酯,如白消安、英丙舒凡和哌?#35789;?#20961;;氮丙啶类,如苄替派、卡波醌、四甲尿烷亚胺和尿烷亚胺;乙烯亚胺和甲基蜜胺,包括六甲蜜胺、三?#39029;?#34588;胺、三亚?#19968;?#30967;酰胺、三亚?#19968;?#30827;代磷酰胺和三羟甲基蜜胺(trimethylolomelamine);氮芥,如苯丁酸氮芥、萘氮芥、氯磷酰胺(cholophosphamide)、雌氮芥、异环磷酰胺、二氯甲基二乙胺、盐酸氧化氮芥、美法仑、新氮芥、苯芥胆甾?#32908;?#27900;尼氮芥、曲磷胺、尿嘧啶氮芥;亚硝基脲,如卡莫司汀、?#20837;?#33740;素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、雷莫司汀;氧氮磷环类(oxazaphosphorines);亚硝基脲类;三氮烯类;抗生素,如蒽环类(anthracyclins)、放线菌素和博来霉素,包括阿拉克霉素(aclacinomysins)、放线菌素、氨茴霉素、重氮丝氨酸、博来霉素、放线菌素、加利?#24471;?#32032;、carabicin、洋红霉素、嗜癌素、康士得(CasodexTM)、色霉素、放线菌素D、柔红霉素、地托比?#24688;?-重氮基-5-氧代-L-正亮氨酸、多柔比?#24688;?#34920;柔比?#24688;?#20234;索比?#24688;?#20381;达比?#24688;?#40635;西罗霉素、丝裂霉素、霉酚酸、?#23548;用?#32032;、橄榄霉素、培洛霉素、potfiromycin、嘌呤霉素、三铁阿霉素、罗多比?#24688;?#38142;黑菌素、链脲菌素、杀结?#21496;?#32032;、乌苯美司、净司他丁、?#32679;?#27604;星;抗代谢物,如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)?#28784;端?#31867;似物,如二甲?#31471;帷?#30002;氨蝶呤、蝶罗呤、三甲曲?#24120;?#22028;呤类似物,如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤、硫鸟嘌?#21097;?#22055;啶类似物,如安西他滨、阿扎胞苷、6-氮?#19982;?#33527;、卡莫氟、阿糖胞苷、二脱氧尿苷、脱氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷、雄激素如卡普?#21644;?#19993;酸屈他雄酮、环硫雄?#32908;?#32654;雄烷、 睾内酯;抗肾上腺素,如氨鲁米特、米托坦、曲洛司坦?#28784;端?#34917;充剂,如亚?#31471;?frolinic acid);醋?#20808;?#20869;酯;醛磷酰胺糖苷;氨基酮戊酸;安吖啶;bestrabucil;比生?#28023;籩datraxate;defofamine?#30970;?#27700;仙碱;地吖醌;elfomithine;依利醋铵;依托格?#24120;?#30813;酸镓;羟基脲;香菇多糖;氯尼达明;米托?#35793;輳?#31859;?#20241;?#37260;;莫哌达醇;硝?#21271;?#21526;啶;喷司他丁?#22351;?#27688;氮芥;吡柔比星?#36824;?#33276;酸;2-?#19968;?#32956;;丙卡巴肼;PSK.RTM;丙亚胺;西佐喃;锗螺胺;替奴佐酸;三亚胺醌;2,2',2″-三?#28909;?#20057;胺;氨基甲酸乙酯;长春地?#31890;?#36798;卡巴?#28023;桓事?#37255;氮芥;二溴?#20107;?#37255;;二溴卫矛醇;哌血生;gacytosine;阿糖胞苷(“Ara-C”);环磷酰胺;噻替派;?#20185;?#28919;类,例如,?#20185;?#37255;(TAXOLTM,Bristol-Myers Squibb Oncology,Princeton,N.J.)和多烯?#20185;?#37255;(TAXOTERETM,Rhone-Poulenc Rorer,Antony,France);视黄酸;埃?#20849;?#38665;素;卡培他?#37232;?#21513;西他滨和上述任一种的药学上可接受的盐、酸或衍生物。作为合适的化学治疗细胞调节剂还包括起到调节或抑制激素对肿瘤的作用的抗激素剂,如抗雌激素,包括例如他莫昔芬(NolvadexTM)、雷洛昔芬、芳香酶抑制4(5)-咪唑、4-羟基他莫昔芬、曲?#27835;?#33452;、keoxifene、LY117018、奥那司酮和托瑞米芬(Fareston);和抗雄激素,如氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、亮丙瑞林?#36879;?#33293;瑞?#37073;?#33519;丁酸氮芥;吉西他?#37232;?-硫鸟嘌?#21097;?#24047;基嘌?#21097;患?#27688;蝶?#21097;?#38082;或铂类似物和络合物诸如?#24034;?#21644;卡铂;抗微管剂,如二萜类化合物,包括?#20185;?#37255;和多烯?#20185;?#37255;,或长春花生物碱,包括长春碱、长春新碱、长春氟宁、长春地辛和长春瑞?#37232;?#20381;托?#20652;?VP-16);异环磷酰胺;丝裂霉素C;米?#20241;?#37260;;长春新碱;长春瑞?#37232;?#35834;维本;诺消灵;替尼泊苷?#22351;瑯得?#32032;;氨基蝶?#21097;?#24076;罗达?#28784;?#29677;膦酸盐;拓扑异构酶I和II抑制剂,包括喜树碱(例如,喜树碱-11)、托泊替康、伊立替康和表鬼?#35782;?#32032;;拓扑异构酶抑制剂RFS2000;埃博霉素A或B;二氟甲基鸟氨酸(DMFO);组蛋白脱乙酰酶抑制剂?#25381;?#23548;细胞?#21482;?#36807;程的化合物;戈那瑞林激动剂?#24739;?#30827;氨酸氨基肽酶抑制剂;靶向/?#26723;?#34507;白质或脂质激酶活性的化合物;靶向、?#26723;?#25110;抑制蛋白质或脂质磷酸酶活性的化合物;抗雄激素;双膦酸盐;生物?#20174;?#35843;节剂;抗增殖抗体;乙酰肝素酶抑制剂;Ras致癌同种型抑 制剂;端粒酶抑制剂?#22351;?#30333;酶体抑制剂;用于治疗恶性血液病的化合物;靶向、?#26723;?#25110;抑制Flt-3活性的化合物;Hsp90抑制剂;替莫唑胺Hsp90抑制剂,如17-AAG(17-烯丙基氨基格尔德霉素,NSC330507),17-DMAG(17-二甲基氨基?#19968;?#27688;基-17-脱甲氧基-格尔德霉素,NSC707545)、IPI-504、CNF1010、CNF2024、CNF1010,它们来自Conforma Therapeutics;替莫唑?#38750;?#21160;蛋白纺锤体蛋白抑制剂,如来自GlaxoSmithKline的SB715992或SB743921,或来自CombinatoRx的喷他脒/?#32570;海籑EK抑制剂,如来自Array PioPharma的ARRY142886、来自AstraZeneca的AZD6244或来自Pfizer的PD181461或PD0325901、甲酰四氢?#31471;帷DG粘合剂、抗白血病化合物、核糖核苷酸还原酶抑制剂、S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶抑制剂、抗增殖抗体或其他化学治疗化合物。在需要时,本发明的化合物或药物组合物可与常开的抗癌药物如赫赛汀阿瓦斯丁爱必妥利妥昔单抗?#20185;?#37255;瑞宁得泰索帝及万珂联合使用。下面提供了关于可以与本发明的化合物一起使用的化合物的信息。
蛋白酶体抑制剂包括靶向、?#26723;?#25110;抑制蛋白酶体活性的化合物。靶向、?#26723;?#25110;抑制蛋白酶体活性的化合物包括,例如,Bortezomid(万珂TM)和MLN341。基质金属蛋白酶抑制剂(“MMP”抑制剂)包括但不限于,胶原蛋白拟肽和非拟肽抑制剂、四环素衍生物,例如异?#35831;?#37240;拟肽抑制剂巴马司他及其口服生物可利用的类似物马立马司他(BB-2516)、普马司他(AG3340)、metastat(NSC683551)BMS-279251、BAY12-9566、TAA211、MMI270B或AAJ996。用于恶性血液病治疗的化合物包括但不限于,FMS-样酪氨酸激酶抑制剂,例如,靶向、?#26723;?#25110;抑制FMS-样酪氨酸激酶受体(Flt-3R)活性的化合物;干扰素,1-b-D-阿糖呋喃胞嘧啶(ara-c)和白消安(bisulfan);和ALK抑制剂,例如靶向、?#26723;?#25110;抑制间变性淋巴瘤激酶的化合物。靶向、?#26723;?#25110;抑制FMS-样酪氨酸激酶受体(Flt-3R)活性的化合物尤其是抑制Flt-3R受体激酶家族的成员的化合物、蛋白质或抗体,例如PKC412、米哚妥林、星形孢菌素衍生物、SU11248 和MLN518。
Hsp90抑制剂包括如下的化合物,如17-AAG(17-烯丙基格尔德霉素,NSC330507),17-DMAG(17-二甲基氨基?#19968;?#27688;基-17-脱甲氧基-格尔德霉素,NSC707545)、IPI-504、CNF1010、CNF2024、CNF1010,它们来自Conforma Therapeutics;替莫唑?#38750;?#21160;蛋白纺锤体蛋白抑制剂,如来自GlaxoSmithKline的SB715992或SB743921,或来自CombinatoRx的喷他脒/?#32570;海籑EK抑制剂,如来自Array PioPharma的ARRY142886、来自AstraZeneca的AZD6244、来自Pfizer的PD181461、甲酰四氢?#31471;帷DG粘合剂、抗白血病化合物、核糖核苷酸还原酶抑制剂、S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶抑制剂、抗增殖抗体或其他化学治疗化合物。
组蛋白脱乙酰酶抑制剂(或“HDAC抑制剂”)包括抑制组蛋白脱乙酰酶并具有抗增殖活性的化合物。这包括在WO02/22577中公开的化合物,特别是N-羟基-3-[4-[[(2-?#19988;一?[2-(1H-吲哚-3-基)?#19968;鵠-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺、N-羟基-3-[4-[[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)-?#19968;鵠氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺及其药学上可接受的盐。它还特别包括辛二酰苯胺异?#35831;?#37240;(SAHA)。
用于与本发明的化合物联合使用的双膦酸包括但不限于etridonic、氯膦酸、替鲁膦酸、帕米膦酸、阿仑膦酸、伊班磷酸、利塞膦酸和唑来膦酸。
本发明的化合物还可以与靶向或?#26723;?#34507;白质或脂质激酶活性、蛋白质或脂质磷酸酶活性的化合物或进一步的抗血管发生化合物(包括额外的RTK抑制剂)一起使用。这样的化合物包括但不限于,蛋白质酪氨酸激酶和/或丝氨酸和/或苏氨酸激酶抑制剂或脂质激酶抑制剂,例如靶向、?#26723;?#25110;抑制血小板衍生生长因子受体(PDGFR)活性的化合物,如靶向、?#26723;?#25110;抑制PDGFR活性的化合物,特别是抑制PDGF受体的化合物,例如,N-苯基-2-嘧啶-?#36153;?#29983;物,例如伊马替尼、SU101、SU6668和GFB-1 11;靶向、?#26723;?#25110;抑制?#19978;宋?#32454;胞生长因子受体(FGFR)活性的化合物;靶向、?#26723;?#25110;抑制胰?#26680;?#26679;生长因子受体I(IGF-IR)活性的化合 物,如靶向、?#26723;?#25110;抑制IGF-IR活性的化合物,尤其是抑制IGF-I受体的激酶活性的化合物,如在WO02/092599中公开的那些化合物或如OSI906,或靶向IGF-I受体的胞外域的抗体,如CP-751871、R1507、AVE1642、IMC-A12、AMG479、MK-0646、SCH717454或其生长因子;靶向、?#26723;?#25110;抑制Trk受体酪氨酸激酶家族活性的化合物,或肝配蛋白B4抑制剂;靶向、?#26723;?#25110;抑制AxI受体酪氨酸激酶家族活性的化合物;靶向、?#26723;?#25110;抑制Ret受体酪氨酸激酶活性的化合物;靶向、?#26723;?#25110;抑制Kit/SCFR受体酪氨酸激酶活性的化合物,例如伊马替尼;靶向、?#26723;?#25110;抑制C-kit受体酪氨酸激酶(PDGFR家族的一部分)活性的化合物,如靶向、?#26723;?#25110;抑制c-Kit受体酪氨酸激酶家族活性的化合物,尤其是抑制c-Kit受体的化合物,例如伊马替尼;靶向、?#26723;?#25110;抑制c-Abl家族成员、其基因融合产物(例如,BCR-AbI激酶)和突变体的活性的化合物,如靶向、?#26723;?#25110;抑制c-Abl家族成员及其基因融合产物的活性的化合物,例如,N-苯基-2-嘧啶-?#36153;?#29983;物,如伊马替尼或尼洛替尼(AMN107);PD180970;AG957;NSC680410;来自ParkeDavis的PD173955;或达?#31243;?#23612;(BMS-354825);靶向、?#26723;?#25110;抑制丝氨酸/苏氨酸激酶的蛋白激酶C(PKC)和Raf家族的成员,MEK、SRC、JAK、FAK、PDK1、PKB/Akt和Ras/MAPK家族的成员,和/或周期蛋白?#35272;?#24615;激酶家族(CDK)的成员的化合物,尤其是那些在US5,093,330中公开的星形孢菌素衍生物,例如,米哚妥?#37073;?#26356;多的化合物的实例包括例如,UCN-01、沙芬戈、BAY43-9006、苔藓抑素1、哌立福?#31890;灰?#33707;福新;RO318220和RO320432;GO6976;Isis3521;LY333531/LY379196;异喹啉化合物,如WO00/09495中公开的那些异喹啉化合物;FTIs;PD184352或QAN697(P13K抑制剂)或AT7519(CDK抑制剂);靶向、?#26723;?#25110;抑制蛋白质酪氨酸激酶抑制剂活性的化合物,如靶向、?#26723;?#25110;抑制蛋白质酪氨酸激酶抑制剂活性的化合物,包括甲磺酸伊马替尼(格列卫)或酪氨酸磷酸化抑制剂。酪氨酸磷酸化抑制剂优选地是低分子量(Mr<1500)化合物,或其药学上可接受的盐,特别是选自苯亚甲基丙二腈类或S-芳基苯丙二腈或双基质(bisubstrate)喹啉类化合物的化合物,更特别的是选自下组的任何化合 物:酪氨酸磷酸化抑制剂A23/RG-50810;AG99;酪氨酸磷酸化抑制剂AG213;酪氨酸磷酸化抑制剂AG1748;酪氨酸磷酸化抑制剂AG490;酪氨酸磷酸化抑制剂B44;酪氨酸磷酸化抑制剂B44(+)对映体;酪氨酸磷酸化抑制剂AG555;AG494;酪氨酸磷酸化抑制剂AG556、AG957和adaphostin(4-{[(2,5-二羟基苯基)甲基]氨基}-苯甲酸金刚烷酯;NSC680410,adaphostin)。
本发明的化合物还可以与靶向、?#26723;?#25110;抑制受体酪氨酸激酶(作为同二聚体或异二聚体的EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4)的表皮生长因子家族的活性的化合物联合使用,它们的突变体,如靶向、?#26723;?#25110;抑制表皮生长因子受体家族的活性的化合物,特别是抑制EGF受体酪氨酸激酶家族成员例如EGF受体、ErbB2、ErbB3和ErbB4或结合EGF或EGF相关配体的化合物、蛋白质或抗体,尤其是那些在以下文献中泛泛地及具体地公开的化合物、蛋白质或单克隆抗体:WO97/02266,例如,实施例39的化合物,或EP0564409、WO99/03854、EP0520722、EP0566226、EP0787722、EP0837063、US5,747,498、WO98/10767、WO97/30034、WO97/49688、WO97/38983,尤其是WO96/30347(例如,被称为CP358774的化合物),WO96/33980(例如,化合物ZD1839)和WO95/03283(例如,化合物ZM105180);例如,曲妥珠单抗(赫赛汀TM)、西妥昔单抗(爱必妥TM)、易瑞沙、特罗凯(Tarceva)、OSI-774、Cl-1033、EKB-569、GW-2016、E1.1、E2.4、E2.5、E6.2、E6.4、E2.11、E6.3或E7.6.3,和在WO03/013541中公开的7H-?#37327;?#24182;[2,3-d]嘧啶衍生物;以及靶向、?#26723;?#25110;抑制c-Met受体活性的化合物,如靶向、?#26723;?#25110;抑制c-Met活性的化合物,尤其是抑制c-Met受体的激酶活性的化合物,或靶向c-Met的胞外域或结合HGF的抗体。进一步的抗血管生成化合物包括其活性具有另一?#21482;?#21046;(例如与蛋白质或脂质激酶抑制无关)的化合物,例如沙利度胺(THALOMID)和TNP-470。
非受体激酶血管生成抑制剂还可与本发明的化合物一起使用。血管生成通常与erbB21EGFR信号传导有关,因为已证明erbB2和EGFR的抑制剂能抑制血管生成,主要是VEGF的表达。因此,非受体酪氨酸 激酶抑制剂可以与本发明的化合物联合使用。例如,不识别VEGFR(受体酪氨酸激酶)但结合配体的抗-VEGF抗体;将抑制血管生成的整合素(α β3)的小分子抑制剂;内皮抑素和血管抑素(非-RTK),同样被证明可与本发明公开的化合物联合使用。(参见Bruns C J等人(2000),Cancer Res.,60:2926-2935;Schreiber A B,Winkler M E和Derynck R.(1986),Science,232:1250-1253;Yen L等人(2000),Oncogene19:3460-3469)。
靶向、?#26723;?#25110;抑制蛋白质或脂质磷酸酶活性的化合物包括,例如,磷酸酶1、磷酸酶2A或CDC25的抑制剂,例如冈田酸或其衍生物。诱导细胞?#21482;?#36807;程的化合物有例如视黄酸,α-、γ-或δ-生育酚,或α-、γ-或δ-生育三烯?#21360;?#29615;加氧酶抑制剂包括但不限于,例如,Cox-2抑制剂、5-烷基取代的2-芳基氨基苯乙酸和衍生物,如塞来昔布(CELEBREX)、罗非昔布(VIOXX)、依托考昔、伐地考昔或5-烷基-2-芳基氨基苯乙酸,例如,5-甲基-2-(2'-氯-6'-氟苯胺基)苯乙酸和罗美昔布。
乙酰肝素酶抑制剂包括靶向、?#26723;?#25110;抑制硫酸肝素?#21040;?#30340;化合物,包括但不限于PI-88。生物?#20174;?#35843;节剂包括淋巴因子?#36879;?#25200;素,例如,干扰素γ。Ras致癌同种型的抑制剂包括H-Ras、K-Ras、N-Ras和靶向、?#26723;?#25110;抑制Ras的致癌活性的其他化合物。法尼基转移酶抑制剂包括但不限于,例如,L-744832、DK8G557和R115777(Zarnestra)。
端粒酶抑制剂包括靶向、?#26723;?#25110;抑制端粒酶活性的化合物。靶向、?#26723;?#25110;抑制端粒酶活性的化合物特别是抑制端粒酶受体的化合物,例如端粒酶素。甲硫氨酸氨肽酶抑制剂为,例如靶向、?#26723;?#25110;抑制甲硫氨酸氨肽酶的活性的化合物。靶向、?#26723;?#25110;抑制甲硫氨酸氨肽酶的活性的化合物是,例如,bengamide或其衍生物。
抗增殖抗体包括但不限于,曲妥珠单抗(赫赛汀TM)、曲妥珠单抗-DM1、爱必妥、贝伐珠单抗(阿瓦斯丁TM)、利妥昔单抗PRO64553(抗-CD40)和2C4抗体。抗体是指例如完整的单克隆抗体、多克隆抗体、由至少2个完整的抗体形成的多特异性抗体,和抗体片段,只要它们表现出所需的生物活性。
对于急?#36816;?#24615;白血病(AML)的治疗,本发明的化合物可与标?#21450;?血病?#21697;?#32852;合使用,尤其是与用于治疗AML的?#21697;?#32852;合使用。特别是,本发明的化合物可与,例如,法尼基转移酶抑制剂和/或用于治疗AML的其他药物,如柔红霉素、阿霉素、Ara-C、VP-16、替尼泊苷、米?#20241;?#37260;、依达比?#24688;?#21345;铂和PKC412联合施用。
与本发明的化合物联合使用的抗白血病化合物包括,例如,Ara-C,嘧啶类似物,其为脱氧胞苷的2'-α-羟基核糖(阿拉伯糖苷)衍生物。还包括?#20301;?#22028;呤的嘌呤类似物,6-巯基嘌呤(6-MP)和磷酸氟达拉滨。靶向、?#26723;?#25110;抑制组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂的活性的化合物,如丁酸钠和辛二酰苯胺异?#35831;?#37240;(SAHA),抑制被称为组蛋白脱乙酰酶的酶的活性。特定的HDAC抑制剂包括MS275、SAHA、FK228(原FR901228)、制滴菌素A和在US6,552,065中公开的化合物,特别是N-羟基-3-[4-[[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)-?#19968;鵠-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺,或其药学上可接受的盐,和N-羟基-3-[4-[(2-?#19988;一?{2-(1/-/-吲哚-3-基)?#19968;鵠氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺,或其药学上可接受的盐,例如乳酸盐。
促生长素抑制素受体拮抗剂包括靶向、治疗或抑制促生长素抑制素受体的化合物,诸如奥曲肽和SOM230(帕瑞肽)。损伤肿瘤细胞的方法包括诸如电离辐射的方法,例如,以电磁射线(如X-射线和γ射线)或粒子(如α粒子和β粒子)发生的电离辐射。电离辐射在放射治疗中提供但并不限于放射治疗,且为本领域已知的。参见Hellman,Principles of Radiation Therapy,Cancer,in Principles and Practice of Oncology,Devita等人,编,第4版,第1卷,第248-275页(1993)。EDG粘合剂包括调节淋巴细胞再循环的免疫抑制剂,如FTY720。
核糖核苷酸还原酶抑制剂包括嘧啶或嘌呤核苷类似物,包括但不限于,氟达拉滨和/或胞嘧啶阿拉伯糖苷(ara-C)、6-硫鸟嘌呤、5-氟尿嘧啶、克拉屈滨、6-巯基嘌呤(尤其是针对ALL与ara-C联用)和/或喷司他丁。核糖核苷酸还原酶抑制剂为例如,羟基脲或2-羟基-1/-/-异吲哚-1,3-二酮衍生物,诸如在Nandy等人,Acta Oncologica,第33卷,第8期,第953-961页(1994)中提到的PL-1、PL-2、PL-3、PL-4、PL-5、PL-6、PL-7 或PL-8。
S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶抑制剂包括但不限于在US5,461,076中所公开的化合物。
尤其还包括那些在WO98/35958中所公开的化合物、蛋白质或VEGF的单克隆抗体,例如,1-(4-?#32570;?#33018;基)-4-(4-吡啶基甲基)酞嗪或其药学上可接受的盐,例如,琥珀酸盐,或在WO00/09495、WO00/27820、WO00/59509、WO98/11223、WO00/27819和EP0769947中所公开的;由Prewett等人,Cancer Res,第59卷,第5209-5218页(1999);Yuan等人,Proc Natl Acad Sci U S A,第93卷,第14765-14770页(1996);Zhu等人,Cancer Res,第58卷,第3209-3214页(1998);和Mordenti等人,Toxicol Pathol,第27卷,第1期,第14-21页(1999);在WO00/37502和WO94/10202中所述的那些;由O'Reilly等人,Cell,第79卷,第315-328页(1994)所述的血管抑素;由O'Reilly等人,Cell,第88卷,第277-285页(1997)所述的内皮抑素;氨茴酸酰胺;ZD4190;ZD6474;SU5416;SU6668;贝伐珠单抗;或抗-VEGF抗体或抗VEGF受体抗体,例如,rhuMAb和RHUFab,VEGF适体,例如,Macugon;FLT-4抑制剂、FLT-3抑制剂、VEGFR-2IgGI抗体、Angiozyme(RPI4610)和贝伐珠单抗(阿瓦斯丁TM)。
本发明的化合物?#37096;?#29992;作共同治疗化合物与其他药物如抗炎药、支气管扩张药或抗组胺药物联合使用,特别是在诸如上文所提到的那些的阻塞性或炎性呼吸道疾病的治疗中,例如作为此类药物的治疗活性的增强剂或者作为减少此类药物所需的剂量或潜在副作用的手段。本发明的抑制剂可与其他药物混合在固定的药物组合物中,或其可以在其他药物之前、同时或之后分开施用。因此,本发明包括所述的本发明抑制剂与抗炎药、支气管扩张药、抗组胺药或止咳药物的组合,所述的本发明的化合物以及所述药物可在相同或不同的药物组合物中。合适的抗炎药物包括类固醇,特别是糖皮质激素,如布地奈?#38534;?#20108;丙酸倍氯米松(beclamethasone dipropionate)、丙酸氟替卡松、环索奈德或糠酸莫米他松,或WO02/88167、WO02/12266、WO02/100879、WO02/00679(特别是 实施例3、11、14、17、19、26、34、37、39、51、60、67、72、73、90、99和101)、WO03/035668、WO03/048181、WO03/062259、WO03/064445、WO03/072592中描述的类固醇;非甾体糖皮质激素受体激动剂,如在WO00/00531、WO02/10143、WO03/082280、WO03/082787、WO03/104195、WO04/005229中描述的那些;LTB4拮抗剂,如LY293111、CGS025019C、CP-195543、SC-53228、BIIL284、ONO4057、SB209247和在US5451700中描述的那些;LTD4拮抗剂,如?#19979;?#21496;特和扎鲁司特;PDE4抑制剂,例如西洛司特(GlaxoSmithKline)、罗氟司特(Byk Gulden)、V-11294A(Napp)、BAY19-8004(Bayer)、SCH-351591(Schering-Plough)、阿罗茶碱(Almirall Prodesfarma)、PD189659/PD168787(Parke-Davis)、AWD-12-281(Asta Medica)、CDC-801(Celgene)、SeICID(TM)CC-10004(Celgene)、VM554/UM565(Vernalis)、T-440(Tanabe)、KW-4490(Kyowa Hakko Kogyo)和在WO92/19594、WO93/19749、WO93/19750、WO93/19751、WO98/18796、WO99/16766、WO01/13953、WO03/104204、WO03/104205、WO03/39544、WO04/000814、WO04/000839、WO04/005258、WO04/018450、WO04/018451、WO04/018457、WO04/018465、WO04/018431、WO04/018449、WO04/018450、WO04/018451、WO04/018457、WO04/018465、WO04/019944、WO04/019945、WO04/045607和WO04/037805中所公开的那些;A2a受体激动剂,如在EP409595A2、EP1052264、EP1241176、WO94/17090、WO96/02543、WO96/02553、WO98/28319、WO99/24449、WO99/24450、WO99/24451、WO99/38877、WO99/41267、WO99/67263、WO99/67264、WO99/67265、WO99/67266、WO00/23457、WO00/77018、WO00/78774、WO01/23399、WO01/27130、WO01/27131、WO01/60835、WO01/94368、WO02/00676、WO02/22630、WO02/96462、WO03/086408、WO04/039762、WO04/039766、WO04/045618和WO04/046083中所公开的那些;A2b拮抗剂,如在WO02/42298中描述的那些;和β-2肾上腺素受体激动剂,如沙丁胺醇(舒喘宁)、奥西那林、特布他林、沙美特罗、非诺特罗、丙卡特罗,特别是福 莫特罗及其药学上可接受的盐,和WO0075114中式I的化合物(游离态或盐或溶剂化物的形式),该文件通过引用将并入本文,优选其实施例中的化合物,以及WO04/16601中式I的化合物(游离态或盐或溶剂化物的形式),和WO04/033412中的化合物。合适的支气管扩张药包括抗胆碱能或抗?#24040;?#30897;化合物,尤其是异丙托溴铵、氧托溴铵、噻托溴铵盐和CHF4226(Chiesi)以及格隆溴铵,以及在WO01/04118、WO02/51841、WO02/53564、WO03/00840、WO03/87094、WO04/05285、WO02/00652、WO03/53966、EP424021、US5171744、US3714357、WO03/33495和WO04/018422中描述的那些。
合适的抗组胺药物包括盐酸西替利嗪、醋氨?#21360;?#23500;马酸氯马斯汀、异丙嗪、氯雷他定、地氯雷他定、?#33014;?#25289;明和盐酸非索非那定、阿伐斯汀、阿司咪唑、氮?#20811;?#27712;、依巴斯汀、依匹斯汀、咪唑斯汀和特非那定以及在WO03/099807、WO04/026841和JP2004107299中所公开的那些药物。
本发明的化合物与抗炎药的其他有用的组合是与以下药物的组合:趋化因子受体的拮抗剂,例如,CCR-1、CCR-2、CCR-3、CCR-4、CCR-5、CCR-6、CCR-7、CCR-8、CCR-9和CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4、CXCR5,尤其是诸如Schering-Plough拮抗剂SC-351125、SCH-55700和SCH-D的CCR-5拮抗剂,诸如TAK-770的Takeda拮抗剂,和在US6166037(尤其是权利要求18和19)、WO00/66558(尤其是权利要求8)、WO00/66559(尤其是权利要求9)、WO04/018425和WO04/026873中所述的CCR-5拮抗剂。
抗微管或抗有丝分裂剂包括在细胞周期的M期或有丝分裂期对肿瘤细胞的微管具有活性的时相特异性药物。抗微管剂的实例包括但不限于二萜类化合物和长春花生物碱。来自天然来源的二萜类化合物是在细胞周期的G2/M期起作用的时相特异性抗癌剂。据认为,二萜类化合物通过与这种蛋白质结合来稳定微管的β-微管蛋白亚单位。之后蛋白质的解装配似乎受到抑制,有丝分裂受阻,之后细胞死亡。二萜类化合物的实例包括但不限于?#20185;?#37255;及其类似物多烯?#20185;即肌W仙?#37255;,5β,20-?#36153;?-1,2α,4,7β,10β,13α-六羟基?#20185;?11-烯-9-酮4,10-二乙酸酯2-苯甲酸酯与(2R,3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸的13-酯,是从太平洋?#20185;际鞫桃?#32418;?#32929;?Taxus brevifolia)中分离的天然二萜产物,并且可作为可注射溶液在市场上购买到。它是萜烯的?#20185;?#28919;家族的成员。其活性的一?#21482;?#21046;涉及?#20185;?#37255;结合微管蛋?#29366;?#32780;抑制肿瘤细胞生长的能力。在美国?#20185;即家?#34987;批准用于难治性卵巢癌的临床治疗和乳腺癌的治疗。它也是皮肤癌和头颈癌肿瘤治疗的潜在候选药物。该化合物还显示出治疗多囊性肾病、肺癌和疟疾的潜能。用?#20185;?#37255;治疗受试者会导致与阈值浓度(50nM)以上的持续给药(Kearns,C.M.等人,Seminars in Oncology,3(6)第16-23页,1995)有关的骨髓抑制(多细胞谱系,Ignoff,R.J.等人,Cancer Chemotherapy Pocket Guide,1998)。多烯?#20185;?#37255;,(2R,3S)-N-羧基-3-苯基异丝氨酸N-叔丁基酯与5β,20-?#36153;?1,2α,4,7β,10β,13α-六羟基?#20185;?1-1-烯-9-酮4-乙酸酯2-苯甲酸酯的13-酯,三水合物,作为注射溶液可在市场上购买到。多烯?#20185;即际?#29992;于乳腺癌的治疗。多烯?#20185;即际?#25152;述?#20185;?#37255;的半合成衍生物,使用?#20248;分拮仙际?#38024;叶中提取的天然前体10-脱乙酰基-浆果赤霉素III制备。多烯?#20185;?#37255;的剂量限制性毒性是中性粒细胞减少。
可结合使用其他可调节凋亡的化合物(例如,BCL-2抑制剂)。
长春花生物碱类包括来自长春花植物的时相特异性抗肿瘤剂。长春花生物碱通过特异性结合微管蛋白而在细胞周期的M期(有丝分裂)起作用。结果,被结合的微管蛋白分子无法聚合成微管。据认为有丝分裂在分裂中期受阻,之后细胞死亡。长春花生物碱的实例包括但不限于长春碱、长春新碱和长春瑞滨。长春碱,长春花碱硫酸盐,作为注射溶液可在市场上购买到。虽然它有可能用作各种实体瘤的二线治疗,但其主要是用于治疗?#21644;?#30284;?#36879;?#31181;淋巴瘤,包括霍奇金病、淋巴细胞和组织细胞淋巴瘤。骨髓抑制是长春碱的剂量限制性副作用。长春新碱,22-氧代-长春碱硫酸盐,作为可注射溶液可在市场上购买到。长春新碱适用于急性白血病的治疗,还发现可用于霍奇金和非霍奇金恶性淋巴瘤的治?#21697;?#26696;中。脱发和神经?#20302;?#25928;应是长春新碱最常见 的副作用,并在较小程度上发生骨髓抑制和胃肠道粘膜炎效应。长春瑞?#37232;?',4'-二?#20122;?4'-脱氧-C'-去甲长春花碱[R-(R*,R*)-2,3-二羟基丁二酸酯(1:2)(盐)],作为酒石酸长春瑞滨可注射溶液可在市场上购买到,?#21069;?#21512;成的长春花生物碱。长春瑞宾可作为单一药剂或与其他化学治疗剂如?#24034;?#32852;合使用,用于治疗各种实体瘤,特别是非小细胞肺癌、晚期乳腺癌和激素难治性前列腺癌。骨髓抑制是长春瑞滨最常见的剂量限制性副作用。
铂配位络合物包括与DNA相互作用的非时相特异性抗癌剂。铂络合物进入肿瘤细胞,经历水合作用并与DNA形成链内和?#37255;?#20132;联,导致对肿瘤不利的生物效应。铂配位络合物的实例包括但不限于,?#24034;?#21644;卡铂。?#24034;?#39034;式-二胺二?#28820;?#20316;为可注射溶液可在市场上购买到。?#24034;?#20027;要用于转移?#36733;和?#30284;和卵巢癌以及晚期膀胱癌的治疗。?#24034;?#30340;主要剂量限制性副作用是肾毒性和耳毒性,肾毒性可通过水化和利尿作用得到控制。卡铂,[1,1-环丁烷-二?#20154;?#37231;(2-)-O,O']二氨基合铂,作为可注射溶液可在市场上购买到。卡铂主要用于晚期卵巢癌的一线和二线治疗。骨髓抑制是卡铂的剂量限制性毒性。
烷化剂包括非时相特异性抗癌剂和强亲电子剂。通常,烷化剂经由烷基化通过DNA分子的亲核部分如磷酸基、氨基、巯基、羟基、羧基和咪唑基与DNA形成?#24067;?#38190;。这种烷基化破坏核酸的功能而导致细胞死亡。烷化剂的实例包括但不限于,诸如环磷酰胺、美法仑和苯丁酸氮芥的氮芥;诸如白消安的烷基磺酸盐;诸如卡莫司汀的亚硝基脲类;和诸如达卡巴嗪的三氮烯类。环磷酰胺,2-[双(2-氯?#19968;?氨基]四氢-2H-1,3,2-氧氮磷环2-氧化物一水合物,作为可注射溶液或片剂可在市场上购买到。环磷酰胺适用于作为单一药剂或与其他化学治疗剂联合用于恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤和白血病的治疗。脱发、恶心、呕吐和白细胞减少是环磷酰胺最常见的剂量限制性副作用。美法仑,4-[双(2-氯?#19968;?氨基]-L-苯丙氨酸,作为可注射溶液或片剂可在市场上购买到。美法仑适用于多发性骨髓瘤和不可切除的卵巢上皮癌的姑息治疗。骨髓抑制是美法仑最常见的剂量限制性副作用。苯丁酸 氮芥,4-[双(2-氯?#19968;?氨基]苯丁酸,作为片剂可在市场上购买到。苯丁酸氮芥适用于慢性淋巴性白血病和诸如淋巴肉瘤、巨滤泡性淋巴瘤和霍奇金病的恶性淋巴瘤的姑息治疗。骨髓抑制是苯丁酸氮芥最常见的剂量限制性副作用。白消安,1,4-丁二醇二甲磺酸酯,作为片剂可在市场上购买到。白消安适用于慢?#36816;?#24615;白血病的姑息治疗。骨髓抑制?#21069;?#28040;安最常见的剂量限制性副作用。卡莫司汀,1,3-[双(2-氯?#19968;?-1-亚硝基脲,作为以单一小瓶的冻干物质可在市场上购买到。卡莫司汀作为单一药剂或与其他药剂联合,适用于脑瘤、多发性骨髓瘤、霍奇金病和非霍奇金淋巴瘤的姑息治疗。延迟性骨髓抑制是卡莫司汀最常见的剂量限制性副作用。达卡巴?#28023;?-(3,3-二甲基-1-三氮烯基)-咪唑-4-甲酰胺,作为以单一小瓶物质可在市场上购买到。达卡巴嗪适用于转移性恶性黑素瘤的治疗以及与其他药剂联合用于霍奇金病的二线治疗。恶心、呕吐和厌食是达卡巴嗪最常见的剂量限制性副作用。
抗生素抗肿瘤剂包括非时相特异性药剂,其结合或?#24230;隓NA中。通常,此作用会导致稳定的DNA复合物或链断裂,这破坏了核酸的正常功能而导致细胞死亡。抗生素抗肿瘤剂的实例包括,但不限于,诸如放线菌素D的放线菌素、诸如柔红霉素和多柔比星的蒽环类药物(anthracyclins)和博来霉素。放线菌素D也称为更生霉素,作为以可注射形式可在市场上购买到。放线菌素D适用于维耳姆斯瘤和横纹肌肉瘤的治疗。恶心、呕吐和厌食是放线菌素D最常见的剂量限制性副作用。柔红霉素,(8S-顺式-)-8-乙酰基-10-[(3-氨基-2,3,6-三脱氧-α-L-?#27492;?己吡喃糖基)氧基]-7,8,9,10-四氢-6,8,11-三羟基-1-甲氧基-5,12并四苯二酮盐酸盐,作为以脂质体注射形式或作为注射剂可在市场上购买到。柔红霉素适用于急性非淋巴细胞性白血病和晚期HIV相关的卡波西肉瘤的治疗中的缓解诱?#32908;?#39592;髓抑制是柔红霉素最常见的剂量限制性副作用。多柔比星,(8S,10S)-10-[(3-氨基-2,3,6-三脱氧-α-L-?#27492;?己吡喃糖基)氧基]-8-乙醇酰基-7,8,9,10-四氢-6,8,11-三羟基-1-甲氧基-5,12并四苯二酮盐酸盐,作为或ADRIAMYCIN以可注射形式可在市场上购买到。多柔比星主要适用于急性淋巴细胞白血病和急?#36816;?#27597;细胞白血病的治疗,但在某些实体瘤和淋巴瘤的治疗中也是有用的成分。骨髓抑制是多柔比?#20146;?#24120;见的剂量限制性副作用。博来霉素,从?#31181;?#38142;霉菌(Streptomyces verticillus)菌株中分离的细胞毒性?#35831;?#31867;抗生素的混合物,作为可从市场上购买到。博来霉素作为单一药剂或与其他药剂联合适用于鳞状细胞癌、淋巴瘤、?#21644;?#30284;的姑息治疗。肺毒性和皮肤毒性是博来霉素最常见的剂量限制性副作用。
拓扑异构酶II抑制剂包括但不限于表鬼?#35782;?#32032;。表鬼?#35782;?#32032;为来自曼陀罗植物的时相特异性抗肿瘤剂。表鬼?#35782;?#32032;通常通过与拓扑异构酶II和DNA形成三元复合物,导致DNA链断裂,而影响细胞周期S和G2期的细胞。链断裂累积,随后细胞死亡。表鬼?#35782;?#32032;的实例包括但不限于依托泊苷和替尼泊苷。依托泊苷,4'-去甲基-表鬼?#35782;?#32032;9[4,6-0-(R)-亚?#19968;?β-D-吡喃葡萄糖苷],作为以可注射溶液或胶囊形式可在市场上购买到,通常称为VP-16。依托泊苷作为单一药剂或与其他化学治疗剂联合适用于?#21644;?#30284;和非小细胞肺癌的治疗。骨髓抑制?#19988;?#25176;泊苷最常见的副作用。白细胞减少的发生率往往比血小板减少更?#29616;亍?#26367;尼泊苷,4'-去甲基-表鬼?#35782;?#32032;9[4,6-0-(R)-噻吩亚甲基-β-D-吡喃葡萄糖苷],作为以可注射溶液的形式可在市场上购买到,通常称为VM-26。替尼泊苷作为单一药剂或与其他化学治疗剂联合适用于儿童急性白血病的治疗。骨髓抑制是替尼泊苷最常见的剂量限制性副作用。替尼泊苷可引起白细胞减少和血小板减少。其他拓扑异构酶II抑制剂包括表柔比?#24688;?#20234;达比?#24688;⒛文?#26580;比?#24688;?#31859;?#20241;?#37260;和洛索蒽醌。
抗代谢物肿瘤剂包括通过抑制DNA的合成或通过抑制嘌呤或嘧啶碱基的合成从而限制DNA合成而在细胞周期的S期(DNA合成)起作用的时相特异性抗肿瘤剂。结果,S期不再继续,随后细胞死亡。抗代谢物抗肿瘤剂的实例包括但不限于氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、阿糖胞苷、巯基嘌呤、硫鸟嘌呤和吉西他滨。5-氟尿嘧啶,5-氟-2,4-(1H,3H)嘧啶二酮,作为氟尿嘧啶可在市场上购买到。5-氟尿嘧啶的施用导致胸苷酸合成的 抑制,其也掺入RNA和DNA中。其结果通常是细胞死亡。5-氟尿嘧啶作为单一药剂或与其他化学治疗剂联合适用于乳腺癌、结肠癌、直肠癌、胃癌和胰腺癌的治疗。骨髓抑制及粘膜?#36164;?-氟尿嘧啶的剂量限制性副作用。其他氟嘧啶类似物包括5-氟脱氧尿苷(氟尿苷)和5-氟脱氧尿苷单磷酸。阿糖胞苷,4-氨基-1-β-D-阿拉伯呋喃糖基-2(1H)-嘧啶酮,作为可在市场上购买到,通常称为Ara-C。据信,通过向生长中的DNA?#33576;?#31471;掺入阿糖胞苷来抑制DNA链?#30001;歟?#38463;糖胞苷在S期表现出细胞时相特异性。阿糖胞苷作为单一药剂或与其他化学治疗剂联合适用于急性白血病的治疗。其他胞苷类似物包括5-氮杂胞苷和2',2'-二氟脱氧胞苷(吉西他滨)。阿糖胞苷引起白细胞减少、血小板减少和粘膜炎。巯基嘌?#21097;?,7-二氢-6H-嘌呤-6-硫酮一水合物,作为可在市场上购买到。巯基嘌呤通过经由尚未阐明的机制抑制DNA合成而在S期表现出细胞时相特异性。巯基嘌?#39318;?#20026;单一药剂或与其他化学治疗剂联合适用于急性白血病的治疗。骨髓抑制和胃肠道粘膜?#36164;?#39640;剂量巯基嘌呤的预期副作用。一种有用的巯基嘌呤类似物是硫唑嘌呤。硫鸟嘌?#21097;?-氨基-1,7-二氢-6H-嘌呤-6-硫酮,作为可在市场上购买到。硫鸟嘌呤通过经由尚未阐明的机制抑制DNA合成而在S期表现出细胞时相特异性。硫鸟嘌?#39318;?#20026;单一药剂或与其他化学治疗剂联合适用于急性白血病的治疗。包括白细胞减少、血小板减少和贫血在内的骨髓抑制是硫鸟嘌呤施用最常见的剂量限制性副作用。然而,胃肠道副作用?#19981;?#20986;?#37073;?#32780;且可能是剂量限制性的。其他的嘌呤类似物包括喷司他丁、赤羟基壬基腺嘌呤、磷酸氟达拉滨和克拉屈滨。吉西他?#37232;?'-脱氧-2',2'-二氟胞苷单盐酸盐(β-异构体),作为可在市场上购买到。吉西他滨通过阻滞细胞跨过G1/S界限的进展而在S期表现出细胞时相特异性。吉西他滨与?#24034;?#32852;合适用于局?#23458;?#26399;非小细胞肺癌的治疗,单独地适用于局?#23458;?#26399;胰腺癌的治疗。包括白细胞减少、血小板减少和贫血在内的骨髓抑制是吉西他滨施用的最常见的剂量限制性副作用。甲氨蝶?#21097;琋-[4-[[(2,4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]甲基氨基]苯甲酰基]-L-谷氨酸,作为甲氨蝶呤钠可在市场上购买到。甲氨蝶呤通过抑制嘌呤核苷酸和胸 苷酸合成所需的二氢?#31471;?#36824;原酶来抑制DNA的合成、修复和/或复制,而在S期特异性表现出细胞时相效应。甲氨蝶?#39318;?#20026;单一药剂或与其他化学治疗剂联合适用于绒毛膜癌、脑膜白血病、非霍奇金淋巴瘤以及乳腺癌、头癌、颈癌、卵巢癌和膀胱癌的治疗。骨髓抑制(白细胞减少、血小板减少和贫血)和粘膜?#36164;?#30002;氨蝶呤给药的预期副作用。
拓扑异构酶I抑制剂包括诸如喜树碱和喜树碱衍生物的喜树碱类。喜树碱的细胞毒性活性被认为与其拓扑异构酶I抑制活性相关。喜树碱类的实例包括但不限于伊立替康和托泊替康。盐酸伊立替康,(4S)-4,11-二?#19968;?4-羟基-9-[(4-哌啶并哌啶基)羰基氧基]-1H-吡喃并[3',4',6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-3,14(4H,12H)-二酮盐酸盐,作为以可注射溶液形式可在市场上购买到。伊立替康是喜树碱的衍生物,它与它的活?#28304;?#35874;物SN-38一起与拓扑异构酶I-DNA复合物结合。据信由于由拓扑异构酶I:DNA:伊立替康或SN-38的三元复合物与复制酶的相互作用造成的不可修补的双链断裂而出现细胞毒性。伊立替康适用于结肠或直肠转移癌的治疗。盐酸伊立替康的剂量限制性副作用是骨髓抑制,包括中性粒细胞减少和胃肠效应,包括腹泻。盐酸拓扑替康,(S)-10-[(二甲基氨基)甲基]-4-?#19968;?4,9-二羟基-1H-吡喃并[3',4',6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-3,14-(4H,12H)-二酮一盐酸盐,作为可注射溶液可在市场上购买到。托泊替康是喜树碱的衍生物,其与拓扑异构酶I-DNA复合物结合,并阻止由拓扑异构酶I响应于DNA分子的扭转应变而引起的单链断裂的再连接。托泊替康适用于卵巢和小细胞肺癌的转移癌的二线治疗。盐酸托泊替康的剂量限制性副作用是骨髓抑制,主要是中性粒细胞减少。
激素和激素类似物是用于治疗癌症的有用化合物,其中该激素与癌症的生长和/或缺乏生长之间存在关系。用于癌症治疗的激素和激素类似物的实例包括但不限于,肾上腺皮质类固醇,如泼尼松和泼尼?#38378;?#20854;可用于儿童中的恶性淋巴瘤和急性白血病的治疗;氨鲁米特和其他芳香酶抑制剂,如氨鲁米特、罗谷亚胺、吡鲁米特、曲洛司坦、睾内酯、酮康唑、伏罗唑、法倔唑、阿那曲唑、来曲唑、福美司坦、阿他美坦和 依西美坦,它们用于肾上腺皮质癌和含有雌激素受体的激素?#35272;?#24615;乳腺癌的治疗;?#22411;?#22914;醋酸甲地?#22411;?#23427;们用于激素?#35272;?#22411;乳腺癌和子宫内膜癌的治疗;雌激素、雄激素和抗雄激素,如氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、醋酸环丙?#22411;?#21644;5α-还原酶,如非那雄胺和?#20154;?#38596;胺,它们用于前列腺癌和良性前列腺肥大的治疗;抗雌激素,如氟维司群、他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬、iodoxyfene,以及选择?#28304;?#28608;素受体调节剂(SERMS),如在美国专利5,681,835、5,877,219和6,207,716中所述的那些,它们用于激素?#35272;?#24615;乳腺癌和其他易感癌症的治疗;以及促性腺素?#22836;?#28608;素(GnRH)及其类似物,其刺激促黄体生成激素(LH)和/或促?#38597;?#28608;素(FSH)的?#22836;牛?#29992;于前列腺癌的治疗,例如LHRH激动剂和拮抗剂,如阿巴瑞克、戈舍瑞林、醋酸戈舍瑞林和亮丙瑞林(luprolide)。SH2/SH3域阻滞剂是破坏包括PI3-K p85亚基、Src家族激酶、衔接分子(Shc、Crk、Nck、Grb2)和Ras-GAP在内的多种酶或衔接蛋白中的SH2或SH3域结合的药剂。在Smithgall,T.E.(1995),Journal of Pharmacological and Toxicological Methods.34(3)125-32中?#33268;?#20102;SH2/SH3域作为抗癌药物的靶标。丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂,包括MAP激酶级联阻滞剂,其包括Raf激酶(rafk)、丝裂原或胞外调节激酶(MEK)和胞外调节激酶(ERK)的阻滞剂;以及蛋白激酶C家族成员阻滞剂,包括PKC(α、?#38534;ⅵ謾ⅵ擰ⅵ獺ⅵ恕ⅵ傘ⅵ?的阻滞剂。IkB激酶家族(IKKa、IKKb)、PKB家族激酶、Akt激酶家族成员和TGFβ受体激酶。这样的丝氨酸/苏氨酸激酶及其抑制剂描述于Yamamoto,T.,Taya,S.,Kaibuchi,K.,(1999),Journal of Biochemistry.126(5)799-803;Brodt,P,Samani,A.和Navab,R.(2000),Biochemical Pharmacology,60.1101-1107;Massague,J.,Weis-Garcia,F.(1996)Cancer Surveys.27:41-64;Philip,P.A.和Harris,A.L.(1995),Cancer Treatment and Research.78:3-27,Lackey,K.等人Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters,(10),2000,223-226;美国专利6,268,391;和Martinez-Iacaci,L.,等人,Int.J.Cancer(2000),88(1),44-52中。
也有利地与本发明的化合物一起使用的是肌醇信号抑制剂,例如 磷脂酶C阻滞剂和肌醇类似物。此类信号抑制剂描述于Powis,G.和Kozikowski A.,(1994)New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy,Paul Workman和David Kerr编,CRC press1994,London。
另一组抑制剂是诸如Ras癌基因抑制剂的信号转导途径抑制剂。此类抑制剂包括法尼基转移酶、香叶基-香叶基转移酶和CAAX蛋白酶的抑制剂,以及反义寡核苷酸、核酶和免疫?#21697;ā?#27492;类抑制剂已经显示阻滞含有野生型突变ras的细胞中的ras活化,从而起到抗增殖剂的作用。Ras癌基因抑制在Scharovsky,O.G.,Rozados,V.R.,Gervasoni,S.I.Matar,P.(2000),Journal of Biomedical Science.7(4)292-8;Ashby,M.N.(1998),Current Opinion in Lipidology.9(2)99-102;和BioChim.Biophys.Acta,(19899)1423(3):19-30中?#33268;邸?
本发明进一步涉及与其他肿瘤治?#21697;?#27861;联合使?#37238;?#21270;合物或药物组合物的方法,所述其他肿瘤治?#21697;?#27861;包括?#36136;酢?#30005;离辐射、光动力?#21697;ǎ?#25110;例如含有皮质类固?#32908;?#28608;素或用作放射增敏剂的植入物。
一种这样的方法可以是例如在哺乳动物中抑制异常细胞生长或治疗高增生性病症的放射治疗。用于施用放射治疗的?#38469;?#22312;本领域中?#19988;?#30693;的,并且这些?#38469;?#21487;在本文所述的联合治疗中使用。本发明的化合物在这种联合治疗中的给药可如本文所述来确定。
放射治疗可通过以下几?#22336;?#27861;之一或方法的组合施用,包括但不限于外?#21604;?#27835;疗、内辐射治疗、植入辐射、立体定向放射?#36136;酢?#20840;身放射治疗、放疗和永久或临时的间质内近距离放射治疗。如本文所用的术语“近距离放射治疗”是指由插入体内肿瘤或其他增生组织疾病部位处或附近的空间限定的放射性物质所提供的放射治疗。本术语旨在包括但不限于暴露于放射性同位素(例如At-211、I-131、I-125、Y-90、Re-186、Re-188、Sm-153、Bi-212、P-32,和Lu的放射性同位素)。用作本发明的细胞调节物的合适的辐射源包括固体和液体两者。作为非限制性的实例,辐射源可以是放射性核素,如I-125、I-131、Yb-169、作为固体源的Ir-192,作为固体源的I-125,或其他发射光子、β粒子、?#26757;?#23556;或其他治疗射线的放射性核素。放射性物质?#37096;?#20197;是由任何放射性核素的溶 液形成的流体,例如I-125或I-131的溶?#28023;?#25110;可使用含有固体放射性核素(如Au-198,Y-90)小?#24085;?#30340;合适的流体浆产生放射性流体。此外,放射性核素可包含在凝胶或放射性微球中。
不受任何理论所限制,本发明的化合物可使得异常细胞对辐射治疗更敏感,以杀死和/或抑制这样的细胞的生长。因此,本发明进一步涉及?#20849;?#20083;动物中的异常细胞对辐射治疗致敏的方法,其包括向哺乳动物施用一定量的本发明的抑制剂或其药学上可接受的盐、酯、前药、溶剂化物、水合物或衍生物,所述量对于使异常细胞对辐射治疗致敏是有效的。在此方法中的化合物、盐或溶剂化物的量可以根据本文所述的用于确定这类化合物的有效量的方法来确定。
光动力?#21697;?#21253;括使用某些被称为光敏化合物的化学品来治疗或预防癌症的?#21697;ā?#20809;动力?#21697;?#30340;实例包括用诸如维速达尔(VISUDYNE)和卟?#38405;纺?#30340;化合物进行治疗。抑制血管生成的类固?#21450;?#25324;阻止或抑制血管发生的化合物,例如阿奈可他、曲安西龙、氢化可的松、11α-表氢化皮质?#32908;?#21487;托多松、17α-羟?#22411;?#30382;质酮、脱氧皮质酮、?#21644;?#38604;酮和地塞米松。
包含皮质类固醇的植入物包括例如氟轻松和地塞米松的化合物。其他化学治疗化合物包括但不限于植物生物碱、激素化合物和拮抗剂;生物?#20174;?#35843;节剂,优选淋巴因子或干扰素?#29615;?#20041;寡核苷酸或寡核苷酸衍生物;shRNA或siRNA;或混杂化合物或具有其他或未知作用机理的化合物。
本发明的化合物或药物组合物可与一定量的一?#21482;?#22810;种选自抗血管生成剂、信号转导抑制剂和抗增殖剂的物质联合使用。
诸如MMP-2(基质金属蛋白酶2)抑制剂、MMP-9(基质金属蛋白酶9)抑制剂和COX-11(环加氧酶11)抑制剂的抗血管生成剂可以与本发明的抑制剂和本文所述的药物组合物联合使用。有用的COX-II抑制剂的实例包括CELEBREXTM(alecoxib)、伐地昔布和罗非昔布。有用的基质金属蛋白酶抑制剂的实例描述于WO96/33172(公布于1996年10月24日)、WO96/27583(公布于1996年3月7日)、?#20998;?#19987;利申请97304971.1 (提交于1997年7月8日)、?#20998;?#19987;利申请99308617.2(提交于1999年10月29日)、WO98/07697(公布于1998年2月26日)、WO98/03516(公布于1998年1月29日)、WO98/34918(公布于1998年8月13日)、WO98/34915(公布于1998年8月13日)、WO98/33768(公布于1998年8月6日)、WO98/30566(公布于1998年7月16日)、?#20998;?#19987;利公开606,046(公布于1994年7月13日)、?#20998;?#19987;利公开931、788(公布于1999年7月28日)、WO90/05719(公布于1990年5月31日)、WO99/52910(公布于1999年10月21日)、WO99/52889(公布于1999年10月21日)、WO99/29667(公布于1999年6月17日)、PCT国际专利申请PCT/IB98/01113(提交于1998年7月21日)、?#20998;?#19987;利申请99302232.1(提交于1999年3月25日)、英国专利申请9912961.1(提交于1999年6月3日)、美国临时申请60/148,464(提交于1999年8月12日)、美国专利5,863,949(于1999年1月26日授权)、美国专利5,861,510(于1999年1月19日授权)和?#20998;?#19987;利公开780,386(公布于1997年6月25日)中,所有这些都通过引用整体并入本文。在一些实施方案中,MMP-2和MMP-9抑制剂没有或具有很小的MMP-1抑制活性,或相对于其他基质金属蛋白酶(即MAP-1、MMP-3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、MMP-8、MMP-10、MMP-11、MMP-12和MMP-13)选择性地抑制MMP-2和/或AMP-9。用于本发明的一些具体的MMP抑制剂的实例是AG-3340、RO32-3555和RS13-0830。
本发明还涉及治疗哺乳动物的心血管疾病的方法和药物组合物,其包括一定量的本发明的抑制剂,或其药学上可接受的盐、酯、前药、溶剂化物、水合物或衍生物,或其同位素标记的衍生物,和一定量的一?#21482;?#22810;种用于治疗心血管疾病的治疗剂。
用于心血管疾病应用的示例性药剂有:诸如前列环素和水杨酸盐的抗血栓形成剂,诸如链激酶、尿激酶、组织纤溶酶原激活物(TPA)和茴香酰化纤溶酶原链激酶激活剂复合物(APSAC)的血栓溶解剂,诸如乙酰水杨酸(ASA)和氯吡格雷(Clopidogrel)的抗血小板剂,诸如硝酸盐、钙?#33009;?#36890;道阻滞剂的血管扩张剂,诸如秋水仙素和烷化剂的抗增殖剂,嵌 入剂,诸如白细胞介素、转化生长因子-β和血小板衍生生长因子同源物的生长调节因子,抗生长因子的单克隆抗体,甾体和非甾体抗炎剂,和可以调节血管?#24085;Α?#21151;能、动脉硬化和对?#31245;?#21518;血管或器官损伤的愈合?#20174;?#30340;其他药剂。抗生素?#37096;?#20197;包括在本发明包含的组合或包衣内。此外,包衣可以用来在血管壁内病灶处实?#31181;?#30103;递送。通过将活性剂引入可膨胀的聚合物中,聚合物膨胀时将?#22836;?#27963;性剂。
可以与本文所述的化合物一起施用的药物包括任何合适的可以通过吸入有效递送的药物,例如,诸如可待因、二氢吗?#21462;?#40614;?#21069;貳?#33452;太尼或吗啡的镇痛药;诸如地尔硫的心绞痛制剂;诸如色甘酸盐、酮替芬或奈多罗米的抗变态?#20174;?#33647;;诸如头孢菌素类、青霉素类、链霉素、?#21069;?#31867;、四环素类或喷他脒的抗感染药;诸如美?#23610;?#26519;的抗组胺药物;诸如倍氯米松、氟尼缩松、布地奈?#38534;?#26367;泼尼旦、曲安奈德或氟替卡松的抗炎药;诸如那可丁的止咳药;支气管扩张剂,如麻黄素、肾上腺素、非诺特罗、福莫特罗、异丙肾上腺素、异丙喘宁、去氧肾上腺素、苯丙?#21450;貳?#21537;布特罗、瑞普特罗、利米特罗、沙丁胺?#32908;?#27801;美特罗、特布他林、异他林、妥洛特罗、异丙喘宁或(-)-4-氨基-3,5-二氯-α-[[[6-[2-(2-吡啶基)乙氧基]己基]-氨基]甲基]苯?#29366;迹?#35832;如阿米洛利的利尿剂;诸如异丙托品、阿托品或氧托品的抗胆碱能药;诸如可的松、氢化可的松或泼尼?#38378;?#30340;激素;诸如氨茶碱、胆茶碱、赖氨酸茶碱或茶碱的黄嘌呤类;以及诸如胰?#26680;?#21644;胰高血糖素的治疗性蛋白质和肽类。本领域?#38469;?#20154;员将清楚,在?#23454;?#30340;情况下,药物可以以盐形式(例如作为碱金属盐或?#36153;危?#25110;作为酸加成盐)或作为酯(例如,?#22270;?#28919;基酯)或溶剂化物(例如水合物)使用,以优化药物的活性和/或稳定性。
其他用于联合?#21697;?#30340;示例性治疗剂包括但不限于如上所述的药剂、放射治疗、激素拮抗剂、激素及其?#22836;?#22240;子、甲状腺和抗甲状腺药物、雌激素和孕激素、雄激素、促肾上腺皮质激素;肾上腺皮质类固醇及其合成类似物;肾上腺皮质激素的合成和作用的抑制剂、胰?#26680;亍?#21475;服降血?#19988;?#21450;内分泌胰腺药理学,影响钙化和骨转换的药剂:钙、磷酸盐、甲状旁腺激素、维生素D、降钙素、维生素(如水溶性维生素、复合 维生素B、抗坏血酸、脂溶性维生素、维生素A、K和E)、生长因子、细胞因子、趋化因子、?#24040;?#30897;受体激动剂和拮抗剂;抗胆碱酯酶剂;作用于神经肌肉接点和/或自主神经节的药剂;儿茶酚胺,拟交感神经药,和肾上腺素能受体激动剂或拮抗剂;和5-羟色胺(5-HT、血清素)受体激动剂和拮抗剂。
治疗剂还可包括用于疼痛和炎症的药剂,如组胺和组胺拮抗剂、缓激肽和缓激肽拮抗剂、5-羟色胺(血清素)、由膜磷脂的选择?#36816;?#35299;产物的生物转化所产生的脂质物质、类花生酸、前列腺素、血栓烷、白三烯、阿司匹林、非甾体抗炎剂、解?#26085;?#30171;剂、抑制前列腺素和血栓烷的合成的药剂、可诱导型环加氧酶的选择性抑制剂、可诱导型环加氧酶-2的选择性抑制剂、自体有效物质、旁分泌激素、促生长素抑制素、胃泌素、介导体液和细胞免疫应答涉及的相互作用的细胞因子、脂质衍生的自体有效物质、类花生酸、β-肾上腺素能激动剂、异丙托铵、糖皮质激素、甲基黄嘌呤、钠通道阻滞剂、阿片受体激动剂、钙通道阻滞剂、膜稳定剂和白三烯抑制剂。
本文预期的其他治疗剂包括利尿剂、血管加压素、影响肾?#36816;?#30340;保持的药剂、凝乳酶、血管紧张素、用于治疗心肌缺血的药剂、抗高血压剂、血管紧张素转化酶抑制剂、β-肾上腺素能受体拮抗剂、用于治疗高胆固醇血症的药剂、用于治疗血脂异常的药剂。
预期的其他治疗剂包括用于控制胃液酸度的药物、用于治疗消化性溃疡的药剂、用于治疗胃食管反流病的药剂、胃动力药、止吐药、用于肠易激综合征的药剂、用于腹泻的药剂、用于便秘的药剂、用于炎性肠病的药剂、用于胆道疾病的药剂、用于胰腺疾病的药剂。用于治疗原虫感染的治疗剂、用于治疗疟疾、阿?#35013;?#30149;、?#20540;?#34411;病、滴虫病、?#20923;?#30149;和/或利什曼病的药物、和/或用于蠕虫病的化学治疗的药物。其他治疗剂包括抗菌剂、?#21069;?#31867;药、甲氧苄啶-?#21069;芳?#22081;唑喹?#20302;?#31867;药物、及用于尿路感染的药剂、青霉素类、头孢菌素类及其他、β-内酰胺类抗生素、含有氨基糖苷的药剂、蛋白质合成抑制剂、在结核病、鸟复合分枝?#21496;?#30149;和麻风病的化学治疗中使用的药物、抗真菌剂、抗病毒剂,包括非逆 转?#30142;?#27602;剂和抗逆转?#30142;?#27602;剂。
可与本发明化合物联合的治疗性抗体的实例包括但不限于抗受体酪氨酸激酶抗体(西妥昔单抗、帕尼单抗、曲妥珠单抗)、抗CD20抗体(利妥昔单抗、?#24418;?#33707;单抗),以及诸如阿仑珠单抗、贝伐珠单抗和吉妥珠单抗的其他抗体。
此外,本发明的方法也预期用于免疫调节的治疗剂,如免疫调节剂、免疫抑制剂、耐受原和免疫刺激剂。此外,还有作用于血液和造血器官的治疗剂、血液生成剂、生长因子、矿物质和维生素、抗凝剂、溶解血栓剂和抗血小板药物。
可与本发明化合物联合的进一步的治疗剂可见于Goodman和Gilman的“The Pharmacological Basis of Therapeutics”第十版,Hardman,Limbird和Gilman编,或the Physician’s Desk Reference,这两者均通过引用整体并入本文。
以?#28388;?#25552;供的实施例和制备进一步说明和例示了本发明的化合物和制备这样的化合物的方法。应当理解,本发明的?#27573;?#32477;不受限于下面的实施例和制备的?#27573;А?#38500;非另有说明,在下面的实施例中,具有单个?#20013;?#20013;心的分子作为外消旋混合物存在。除非另有说明,具有两个或多个?#20013;?#20013;心的那些分子作为非对映体的外消旋混合物存在。单一对映体/非对映体可通过本领域?#38469;?#20154;?#24065;?#30693;的方法获得。
实施例
实施例1:p110α/p85α、p110β/p85α、p110δ/p85α和p110γ的表达和抑制试验:
用于测定PI3-K活性的商品化试剂盒或?#20302;?#26159;可得到的。市售试剂盒或?#20302;?#21487;用于筛选PI3K的抑制剂和/或激动剂,包括但不限于PI3-激酶α、?#38534;ⅵ?#21644;γ。一个示范性的?#20302;?#26159;来自Upstate的PI3-激酶(人)HTRFTM试验。该试验可以根据生产商建议的程序进?#23567;?#31616;单地说,该试验为间接测定通过PI3-K活性形成的PIP3产物的时间分辨FRET试验。激酶?#20174;?#22312;微量滴定板(例如384孔微量滴定板)中进?#23567;?#24635;?#20174;?#20307; 积约为每孔20ul。在第一步中,每个孔接收2ul在20%二甲亚砜中的测试化合物,得到2%的DMSO终浓度。接着,将约14.5ul的激酶/PIP2混合物(于1X?#20174;?#32531;冲液中稀释)添加到每个孔中以达到0.25-0.3ug/ml激酶和10μM PIP2的终浓度。将该板密封并在室温下温育15分?#21360;?#21521;每个孔中加入3.5ul的ATP(于1X?#20174;?#32531;冲液中稀释)达到10μM ATP的终浓度以启动?#20174;Α?#23558;该板密封并在室温下温育1小时。通过向每个孔中添加5ul终止液终止?#20174;Γ?#28982;后向每个孔中加入5ul的检测混合液。将该板密封并在室温下温育1小时,然后在?#23454;?#30340;读板仪上读取。对数据进行分析,并用GraphPad Prism5生成IC50值。对于PI3Kα、?#38534;ⅵ?#21644;γ,提供达到IC50的抑制剂nM浓度。PI3Kα在比?#38534;ⅵ?#21644;?#37238;?#20302;的浓度下抑制提供了在这组激酶内的特异性的证据。类似的试验,以及本领域已知的其他试验,可用于测定其他激酶的抑制百分比,包括但不限于PI3K II类激酶、磷酸肌醇4激酶(PI4K)和磷酸肌醇5激酶(PI5K)。
实施例2:Abl的表达和抑制试验
一?#21482;?#22810;种本发明化合物针对Abl激酶的交叉活性或其缺乏可根据本领域中已知的任何程序或下面公开的方法进行测定。例如,本文所述的化合物可以一式三份在含有25mM HEPES,pH7.4、10mM MgCl2、200μM ATP(2.5μCi的γ-32P-ATP)和0.5mg/mL BSA的试验中针对重组全长Abl或Abl(T315I)(Upstate)进行测定。优化的Abl肽底物EAIYAAPFAKKK用作磷酸受体(200μM)。通过点样至磷酸?#23435;?#32032;片终止?#20174;Γ?#35813;片用0.5%的磷酸洗涤(约6次,每次5-10分钟)。将片?#31245;錚?#19988;通过磷光?#19978;?#23450;量转移的放射性。
实施例3:Hck的表达和抑制试验
一?#21482;?#22810;种本发明化合物针对Hck激酶的交叉活性或其缺乏可根据本领域中已知的任何程序或下面公开的方法进行测定。本文所述的化合物可以一式三份在含有25mM HEPES,pH7.4、10mM MgCl2、200μM ATP(2.5μCi的γ-32P-ATP)和0.5mg/mL BSA的试验中针对重组全长Hck进行测定。优化的Src家族激酶肽底物EIYGEFKKK用作磷酸受体(200μM)。通过点样至磷酸?#23435;?#32032;片终止?#20174;Γ?#35813;片用0.5%的磷酸洗涤 (约6次,每次5-10分钟)。将片进行?#31245;錚?#19988;通过磷光?#19978;?#23450;量转移的放射性。
实施例4:胰?#26680;?#21463;体(IR)的表达和抑制试验
一?#21482;?#22810;种本发明化合物针对IR受体激酶的交叉活性或其缺乏可根据本领域中已知的任何程序或下面公开的方法进行测定。本文所述的化合物可以一式三份在含有25mM HEPES,pH7.4、10mM MgCl2、10mM MnCl2、200μM ATP(2.5μCi的γ-32P-ATP)和0.5mg/mL BSA的试验中针对重组胰?#26680;?#21463;体激酶域(Upstate)进行测定。聚E-Y(Sigma;2mg/mL)用作底物。通过点样?#26009;?#21270;?#23435;?#32032;终止?#20174;Γ?#35813;硝化?#23435;?#32032;用1M NaCl/1%磷酸洗涤(约6次,每次5-10分钟)。将片?#31245;錚?#19988;通过磷光?#19978;?#23450;量转移的放射性。
实施例5:Src的表达和抑制试验
一?#21482;?#22810;种本发明化合物针对Src激酶的交叉活性或其缺乏可根据本领域中已知的任何程序或下面公开的方法进行测定。本文所述的化合物可以一式三份在含有25mM HEPES,pH7.4、10mM MgCl2、200μMATP(2.5μCi的γ-32P-ATP)和0.5mg/mL BSA的试验中针对重组全长Src或Src(T338I)进行测定。优化的Src家族激酶肽底物EIYGEFKKK用作磷酸受体(200μM)。通过点样至磷酸?#23435;?#32032;片终止?#20174;Γ?#35813;片用0.5%的磷酸洗涤(约6次,每次5-10分钟)。将片?#31245;錚?#19988;通过磷光?#19978;?#23450;量转移的放射性。
实施例6:DNA-PK(DNAK)的表达和抑制试验
一?#21482;?#22810;种本发明化合物针对DNAK激酶的交叉活性或其缺乏可根据本领域中已知的任何程序进行测定。DNA-PK可从Promega购买且根据制造商的说明使用DNA-PK测定?#20302;?Promega)进行测定。
实施例7:mTOR的表达和抑制试验
一?#21482;?#22810;种本发明化合物针对mTOR的交叉活性或其缺乏可根据本领域中已知的任何程序或下面公开的方法进行测定。本文所述的化合物可以在含有50mM HEPES,pH7.5、1mM EGTA、10mM MgCl2、2.5mM,0.01%吐?#38534;?0μM ATP(2.5μCi的γ-32P-ATP)和3μg/mL BSA的 试验中针对重组mTOR(Invitrogen)进行测试。大鼠重组PHAS-1/4EBP1(Calbiochem;2mg/mL)用作底物。通过点样?#26009;?#21270;?#23435;?#32032;终止?#20174;Γ?#35813;硝化?#23435;?#32032;用1M NaCl/1%磷酸洗涤(约6次,每次5-10分钟)。将片?#31245;錚?#19988;通过磷光?#19978;?#23450;量转移的放射性。
其他用于测定mTOR活性的试剂盒或?#20302;?#21487;商业获得。例如,可以使用Invitrogen的LanthaScreenTM激酶试验?#37255;?#27979;本文所公开的mTOR的抑制剂。该试验为测定GFP标记的4EBP1被mTOR激酶磷酸化的时间分辨FRET平台。该激酶?#20174;?#22312;白色384孔微量滴定板中进?#23567;?#24635;?#20174;?#20307;积约为每孔20ul且?#20174;?#32531;冲液组合物为50mM HEPES pH7.5、0.01%聚山梨酯20、1mM EGTA、10mM MnCl2和2mM DTT。在第一步中,每个孔接收在20%二甲亚砜中的2ul测试化合物,得到2%的DMSO终浓度。接着,将在?#20174;?#32531;冲液中稀释的8ul mTOR添加到每个孔中以达到60ng/ml的终浓度。向每个孔中加入10ul的ATP/GFP-4EBP1混合物(于?#20174;?#32531;冲液中稀释)达到10μM ATP和0.5μM GFP-4EBP1的终浓度以启动?#20174;Α?#23558;该板密封并在室温下温育1小时。通过添?#29992;?#23380;10ul的Tb-抗-pT464EBP1抗体/EDTA混合物(于TR-FRET缓冲液中稀释)达到1.3nM抗体和6.7mM EDTA的终浓度来终止?#20174;Α?#23558;该板密封并在室温下温育1小时,然后在为LanthaScreenTM TR-FRET设立的读板仪上读取。对数据进行分析,并用GraphPad Prism5生成IC50值。
实施例8:血管内皮生长因子受体的表达和抑制试验
一?#21482;?#22810;种本发明化合物针对VEGF受体的交叉活性或其缺乏可根据本领域中已知的任何程序或下面公开的方法进行测定。本文所述的化合物可以在含有25mM HEPES,pH7.4、10mM MgCl2、0.1%BME、10μM ATP(2.5μCi的γ-32P-ATP)和3μg/mL BSA的试验中针对重组KDR受体激酶域(Invitrogen)进行测试。聚E-Y(Sigma;2mg/mL)用作底物。通过点样?#26009;?#21270;?#23435;?#32032;终止?#20174;Γ?#35813;硝化?#23435;?#32032;用1M NaCl/1%磷酸洗涤(约6次,每次5-10分钟)。将片?#31245;錚?#19988;通过磷光?#19978;?#23450;量转移的放射性。
实施例9:肝配蛋?#36164;?#20307;B4(EphB4)的表达和抑制试验
一?#21482;?#22810;种本发明化合物针对EphB4的交叉活性或其缺乏可根据本领域中已知的任何程序或下面公开的方法进行测定。本文所述的化合物可以在含有25mM HEPES,pH7.4、10mM MgCl2、0.1%BME、10μM ATP(2.5μCi的γ-32P-ATP)和3μg/mL BSA的试验中针对重组肝配蛋?#36164;?#20307;B4激酶域(Invitrogen)进行测试。聚E-Y(Sigma;2mg/mL)用作底物。通过点样?#26009;?#21270;?#23435;?#32032;终止?#20174;Γ?#35813;硝化?#23435;?#32032;用1M NaCl/1%磷酸洗涤(约6次,每次5-10分钟)。将片?#31245;錚?#19988;通过磷光?#19978;?#23450;量转移的放射性。
实施例10:表皮生长因子受体(EGFR)的表达和抑制试验
一?#21482;?#22810;种本发明化合物针对EGFR激酶的交叉活性或其缺乏可根据本领域中已知的任何程序或下面公开的方法进行测定。本文所述的化合物可以在含有25mM HEPES,pH7.4、10mM MgCl2、0.1%BME、10μM ATP(2.5μCi的γ-32P-ATP)和3μg/mL BSA的试验中针对重组EGF受体激酶域(Invitrogen)进行测试。聚E-Y(Sigma;2mg/mL)用作底物。通过点样?#26009;?#21270;?#23435;?#32032;终止?#20174;Γ?#35813;硝化?#23435;?#32032;用1M NaCl/1%磷酸洗涤(约6次,每次5-10分钟)。将片?#31245;錚?#19988;通过磷光?#19978;?#23450;量转移的放射性。
实施例11:KIT测定的表达和抑制试验
一?#21482;?#22810;种本发明化合物针对KIT激酶的交叉活性或其缺乏可根据本领域中已知的任何程序或下面公开的方法进行测定。本文所述的化合物可以在含有25mM HEPES,pH7.4、10mM MgCl2、1mM DTT、10mM MnCl2、10μM ATP(2.5μCi的γ-32P-ATP)和3μg/mL BSA的试验中针对重组KIT激酶域(Invitrogen)进行测试。聚E-Y(Sigma;2mg/mL)用作底物。通过点样?#26009;?#21270;?#23435;?#32032;终止?#20174;Γ?#35813;硝化?#23435;?#32032;用1M NaCl/1%磷酸洗涤(约6次,每次5-10分钟)。将片?#31245;錚?#19988;通过磷光?#19978;?#23450;量转移的放射性。
实施例12:RET的表达和抑制试验
一?#21482;?#22810;种本发明化合物针对RET激酶的交叉活性或其缺乏可根 据本领域中已知的任何程序或下面公开的方法进行测定。本文所述的化合物可以在含有25mM HEPES,pH7.4、10mM MgCl2、2.5mM DTT、10μM ATP(2.5μCi的γ-32P-ATP)和3μg/mL BSA的试验中针对重组RET激酶域(Invitrogen)进行测试。优化的Abl肽底物EAIYAAPFAKKK用作磷酸受体(200μM)。通过点样至磷酸?#23435;?#32032;片终止?#20174;Γ?#35813;片用0.5%磷酸洗涤(约6次,每次5-10分钟)。将片?#31245;錚?#19988;通过磷光?#19978;?#23450;量转移的放射性。
实施例13:血小板衍生生长因子受体(PDGFR)的表达和抑制试验
一?#21482;?#22810;种本发明化合物针对PDGFR激酶的交叉活性或其缺乏可根据本领域中已知的任何程序或下面公开的方法进行测定。本文所述的化合物可以在含有25mM HEPES,pH7.4、10mM MgCl2、2.5mM DTT、10μM ATP(2.5μCi的γ-32P-ATP)和3μg/mL BSA的试验中针对重组PDG受体激酶域(Invitrogen)进行测试。优化的Abl肽底物EAIYAAPFAKKK用作磷酸受体(200μM)。通过点样至磷酸?#23435;?#32032;片终止?#20174;Γ?#35813;片用0.5%磷酸洗涤(约6次,每次5-10分钟)。将片?#31245;錚?#19988;通过磷光?#19978;?#23450;量转移的放射性。
实施例14:FMS相关酪氨酸激酶3(FLT-3)的表达和抑制试验
一?#21482;?#22810;种本发明化合物针对FLT-3激酶的交叉活性或其缺乏可根据本领域中已知的任何程序或下面公开的方法进?#23633;?#27979;定。本文所述的化合物可以在含有25mM HEPES,pH7.4、10mM MgCl2、2.5mM DTT、10μM ATP(2.5μCi的γ-32P-ATP)和3μg/mL BSA的试验中针对重组FLT-3激酶域(Invitrogen)进行测试。优化的Abl肽底物EAIYAAPFAKKK用作磷酸受体(200μM)。通过点样至磷酸?#23435;?#32032;片终止?#20174;Γ?#35813;片用0.5%磷酸洗涤(约6次,每次5-10分钟)。将片?#31245;錚?#19988;通过磷光?#19978;?#23450;量转移的放射性。
实施例15:TEK受体酪氨酸激酶(TIE2)的表达和抑制试验
一?#21482;?#22810;种本发明化合物针对TIE2激酶的交叉活性或其缺乏可根据本领域中已知的任何程序或下面公开的方法进行测定。本文所述的化合物可以在含有25mM HEPES,pH7.4、10mM MgCl2、2mM DTT、 10mM MnCl2、10μM ATP(2.5μCi的γ-32P-ATP)和3μg/mL BSA的试验中针对重组TIE2激酶域(Invitrogen)进行测试。聚E-Y(Sigma;2mg/mL)用作底物。通过点样?#26009;?#21270;?#23435;?#32032;终止?#20174;Γ?#35813;硝化?#23435;?#32032;用1MNaCl/1%磷酸洗涤(约6次,每次5-10分钟)。将片?#31245;錚?#19988;通过磷光?#19978;?#23450;量转移的放射性。
实施例16:B细胞活化和增殖试验
根据本领域中已知的标准程序来确定一?#21482;?#22810;种本发明化合物抑制B细胞活化和增殖的能力。例如,建立用来测定活细胞的代谢活性的体外细胞增殖试验。在96孔微量滴定板中利用Alamar蓝还原进行该试验。Balb/C脾脏B细胞经Ficoll-PaqueTM PLUS梯度纯化,接着使用MACS B细胞分离试剂盒(Miletenyi)进行磁性细胞分选。将细胞以50,000个细胞/孔以90ul接种在B细胞?#22028;?#22522;(RPMI+10%FBS+Penn/Strep+50μM bME+5mM HEPES)中。将本文所公开的化合物在B细胞?#22028;?#22522;中稀?#20572;?#24182;以10ul体积加入。将板在37℃和5%CO2(0.2%DMSO终浓度)下温育30分?#21360;?#28982;后加入50μl B细胞刺激混合物,?#27809;?#21512;物在B细胞?#22028;?#22522;中包含10ug/ml LPS或5ug/ml F(ab’)2驴抗小鼠IgM及2ng/ml重组小鼠IL-4。将板在37℃和5%CO2下温育72小时。向每个孔中加入15μL体积的Alamar蓝试剂并将板在37℃和5%CO2下温育5小时。在560Ex/590Em读取Alamar蓝荧光,并使用GraphPad Prism5计算IC50或EC50值。
实施例17:肿瘤细胞系增殖试验
根据本领域中已知的标准程序来确定一?#21482;?#22810;种本发明化合物抑制肿瘤细胞系增殖的能力。例如,可进行体外细胞增殖试验来测定活细胞的代谢活性。在96孔微量滴定板中利用Alamar蓝还原进行该试验。从ATCC获得人肿瘤细胞系(例如MCF7、U-87MG、MDA-MB-468、PC-3),在T75摇瓶中生长达?#20132;?#21512;,用0.25%胰蛋白酶进行胰蛋白酶化,用肿瘤细胞?#22028;?#22522;(DMEM+10%FBS)洗涤一次,并以5,000个细胞/孔以90ul接种于肿瘤细胞?#22028;?#22522;中。将本文所公开的化合物在肿瘤细胞?#22028;?#22522;中稀?#20572;?#24182;以10ul体积加入。将板在37℃和5%CO2下温育72小时。 向每个孔中加入10μL体积的Alamar蓝试剂并将板在37℃和5%CO2下温育3小时。在560Ex/590Em读取Alamar蓝荧光,并使用GraphPadPrism5计算IC50值。预期结果将显示,在测试条件下,本发明的一些化合物是肿瘤细胞系增殖的强抑制剂。
实施例18:体内抗肿瘤活性
可以在一组人和鼠肿瘤模型中评估本文所述的化合物。
?#20185;?#37255;难治性肿瘤模型
1.临床来源的卵巢癌模型
由一名卵巢癌患者的肿瘤活检组织建立这个肿瘤模型。肿瘤活检组织取自?#27809;?#32773;。
使用每2天x5时间表将本文所述的化合物施用于荷有分阶段肿瘤的裸鼠上。
2.A2780Tax人卵巢癌异种移植(突变的微管蛋白)。
2780Tax为抗?#20185;?#37255;抗性人卵巢癌模型。其源自敏感的亲代A2780系,通过细胞与?#20185;?#37255;和维拉帕米(MDR逆转剂)共温育而得到。已显示其抗性机制为非-MDR相关的且归因于编码β微管蛋白的基因的突变。
可将本文所述的化合物按每2天x5时间表施用于荷有分阶段肿瘤的小鼠上。
3.HCT116/VM46人结肠癌异种移植(多重抗药性)。
HCT116/VM46是由敏感的HCT116亲代系发展来的MDR抗性结肠癌。在裸鼠中体内生长的HCT116/VM46对?#20185;?#37255;一贯地表现出了高抗性。
可将本文所述的化合物按每2天x5时间表施用于荷有分阶段肿瘤的小鼠上。
5.M5076鼠肉瘤模型
M5076是固有的体内?#20185;?#37255;难治性小鼠?#23435;?#32905;瘤。
可将本文所述的化合物按每2天x5时间表施用于荷有分阶段肿瘤的小鼠上。
在多药抗药性人结肠癌异种移植HCT/VM46或其他任何本领域中 已知的模型(包括本文所述的模型)中,一?#21482;?#22810;种本发明化合物可与其他治疗剂在体内联合使用。
预期结果将显示,在所测试的条件下,一?#21482;?#22810;种本发明化合物为体内肿瘤生长的强抑制剂。
实施例19:微粒体稳定性试验
根据本领域中已知的标准程序确定一?#21482;?#22810;种本发明化合物的稳定性。例如,通过体外试验来建立一?#21482;?#22810;种本发明化合物的稳定性。尤其是,建立体外微粒体稳定性试验,该试验测定一?#21482;?#22810;种本发明化合物当与小鼠、大鼠或人的肝微粒体?#20174;?#26102;的稳定性。微粒体与化合物的?#20174;?#22312;1.5ml Eppendorf管中进?#23567;C抗?#21547;有0.1μL的10.0mg/ml NADPH;75μL的20.0mg/ml小鼠、大鼠或人肝微粒体;0.4μL的0.2M磷酸盐缓冲?#28023;?#21644;425μL的ddH2O。阴性对照(无NADPH)管含有75μL的20.0mg/ml小鼠、大鼠或人肝微粒体;0.4μL的0.2M磷酸盐缓冲?#28023;?#21644;525μL的ddH2O。通过加入1.0μL的10.0mM的测试化合物启动?#20174;Α7从?#31649;在37℃下温育。在?#20174;?#30340;0、5、10、15、30和60分钟时,收集100μL样品到新的含有300μL冷?#29366;?#30340;Eppendorf管中。以15,000rpm离心样品以除去蛋白质。将离心样品的上清液转移到新的管中。通过?#21512;?#33394;谱/质谱法(LC-MS)测定上清液中与微粒体?#20174;?#21518;稳定化合物的浓度。
实施例20:血浆稳定性试验
根据本领域中已知的标准程序来确定一?#21482;?#22810;种本发明化合物在血浆中的稳定性。参见例如Rapid Commun.Mass Spectrom.,10:1019-1026。以下程序是使用人血浆的HPLC-MS/MS测定?#28784;部?#20197;使用其他物?#37073;?#21253;括猴、狗、大鼠和小鼠。将冷冻的肝素化的人血浆于冷水浴中解?#24034;?#20110;使用前在4℃下以2000rpm旋转10分?#21360;?#23558;本发明化合物从400μM储备溶液加入到预?#21365;?#27974;的等分试样中,以产生400μL(或800μL,对于半衰期测定)的最终测定体积,其含有5μM测试化合物和0.5%的DMSO。?#20174;?#29289;在振荡下于37℃温育0分钟和60分钟,或者对于半衰期测定,在37℃下温育0、15、30、45和60分?#21360;?#36890;过将50μL 的温育混合物转移至200μL冰冷的乙腈中并震荡混合5分钟来终止?#20174;Α?#23558;样品在4℃下以6000×g离心15分钟并将120μL上清液转移到干净的管中。然后将样品蒸发至干,并提交进行HPLC-MS/MS分析。
需要时,一?#21482;?#22810;种对照或参考化合物(5μM)可以与测试化合物同时测试:一?#21482;?#21512;物丙氧卡因具有低血浆稳定性,而另一?#21482;?#21512;物丙胺太林具有?#26800;?#30340;血浆稳定性。
将样品在乙腈/?#29366;?水(1/1/2,v/v/v)中重配并通过(RP)HPLC-MS/MS使用选定的?#20174;?#30417;测(SRM)进行分析。HPLC条件包括带有自动进样器的二元LC泵、混合模式的C12,2×20mm柱和梯度程序。由HPLC-MS/MS记录对应于分析物的峰面积。60分钟后剩余的母体化合物相对于在时间为零时剩余量的比?#21097;?#20197;百分比表示,报告为血浆稳定性。在半衰期测定的情况下,由剩余化合物(%)对时间的对数曲线的初始线性?#27573;?#30340;斜率来估计半衰期,假定其为一级动力学。
实施例21:化学稳定性
根据本领域中已知的标准程序来确定一?#21482;?#22810;种本发明化合物的化学稳定性。以下详述了确定本发明化合物的化学稳定性的示例性程序。用于化学稳定性测定的默认缓冲液为pH7.4的磷酸盐缓冲盐水(PBS),?#37096;?#20197;使用其他合适的缓冲液。将本发明化合物从100μM储备溶液加入到PBS的等分试样中(一式两份),以产生400μL的最终测定体积,其含有5μM测试化合物和1%的DMSO(对于半衰期测定,制备700μL的总样品体积)。?#20174;?#29289;在振荡下于37℃温育0分钟和24小时;对于半衰期测定,将样品温育0、2、4、6和24小时。通过立即将100μL的温育混合物加入至100μL的乙腈中并涡旋5分钟,终止?#20174;Α?#28982;后将样品存储于-20℃下,直到通过HPLC-MS/MS进行分析。需要时,诸如苯丁酸氮芥(5μM)的对照化合物或参考化合物与?#34892;?#36259;的本发明化合物同时测试,因为在24小时过程内该化合物会大量地水解。通过(RP)HPLC-MS/MS使用选定的?#20174;?#30417;测(SRM)分析样品。HPLC条件包括带有自动进样器的二元LC泵、混合模式的C12,2×20mm柱和梯度程序。通过HPLC-MS/MS记录对应于分析物的峰面积。24小时后剩余的 母体化合物相对于在时间为零时剩余量的比?#21097;?#20197;百分比表示,报告为化学稳定性。在半衰期测定的情况下,由剩余化合物(%)对时间的对数曲线的初始线性?#27573;?#30340;斜率来估计半衰期,假定其为一级动力学。
实施例22:Akt激酶试验
含有Akt/mTOR途径组分的细胞,包括但不限于L6成肌细胞、B-ALL细胞、B细胞、T细胞、白血病细胞、骨髓细胞、P190转导的细胞、费城染色体阳性细胞(Ph+)和小鼠胚胎?#19978;宋?#32454;胞,通常生长于细胞生长?#22028;?#22522;(诸如补充有胎牛血清和/或抗生素的DMEM)中并生长至汇合。
为了比较一?#21482;?#22810;种本文公开的化合物对Akt活化的效果,在用胰?#26680;?例如100nM)刺激约1分?#21448;?#32422;1小时之前,将所述细胞血清饥饿过夜,并与一?#21482;?#22810;种本文公开的化合物或约0.1%的DMSO温育约1分?#21448;?#32422;1小时。通过将细胞刮入冰冷的含有诸如十二烷基硫酸钠的去污剂和蛋白酶抑制剂(例如PMSF)的裂解缓冲液中来裂解细胞。在裂解缓冲液与细胞接触后,短暂地超声处理该溶?#28023;?#36890;过离心澄清,再经由SDS-PAGE解析,转移到硝酸?#23435;?#32032;或PVDF,并使用针对磷酸-AktS473、磷酸-Akt T308、Akt和β-肌动蛋白的抗体(Cell Signaling Technologies)进行免疫印迹。
实施例23:血液中的激酶信号传导
使用phosflow法(Methods Enzymol.2007;434:131-54)测定血?#21512;?#32990;中的PI3K/Akt/mTor信号传?#32908;?#36825;?#22336;?#27861;的优点在于其本质上为单细胞分析,因此可以检测细胞的异质性,而不是群体平均水平。这允许并行地区分在由其他标记定义的不同群体中的信号传导状态。Phosflow也是高度定量的。为?#24605;?#27979;本文所公开的一?#21482;?#22810;?#21482;?#21512;物的影响,用抗-CD3刺激未分级分离的脾细胞或外周血单核细胞以启动T细胞受体信号传?#32908;?#28982;后将细胞固定并对表面标记和胞内磷蛋白进行染色。预期在测试的条件下,本文所公开的抑制剂抑制抗-CD3介导的Akt-S473和S6的磷酸化,而雷帕霉素抑制S6的磷酸化并增强Akt的磷酸化。
类似地,全血的等分试样与载体(例如,0.1%DMSO)或各种浓度 的激酶抑制剂温育15分钟,之后加入刺激物以使用抗?#26159;?#38142;抗体(Fab’2片段)交联T细胞受体(TCR)(具有第二抗体的抗-CD3)或B细胞受体(BCR)。在约5分钟和15分钟后,固定样品(例如使用冷的4%多聚甲醛)并用于phosflow。使用针对本领域中已知的细胞表面标记的抗体,使用表面染色来区别T和B细胞。然后通过将固定的细胞与特异性针对这些蛋白质的磷酸化同种型的标记抗体一起温育,来测定诸如Akt和S6的激酶底物的磷酸化水平。然后用流式细胞术分析细胞群体。
预期结果将显示,在测试的条件下,一?#21482;?#22810;种本发明化合物是血?#21512;?#32990;中PI3K、mTOR和Akt信号传导中的一个或多个的一个或多个成员的强力的和选择性的抑制剂。
实施例24:集落形成试验
用p190BCR-Abl逆转?#30142;?#27602;新?#39318;?#21270;的鼠骨髓细胞(以下称作p190转导的细胞)在各种药物组合的存在下接种于在约30%血清中含有重组人IL-7的M3630甲基?#23435;?#32032;?#22028;?#22522;中约7天,并在显微镜下通过目视检查计数形成的集落数。
或者,在初始诊断或复发后,从费城染色体阳性(Ph+)和阴性(Ph-)的患者中获得人外周血单核细胞。分离活细胞并富集CD19+CD34+B细胞祖细胞。液体?#22028;?#36807;夜后,将细胞接种于methocult GF+H4435(Stem Cell Tehcnologies),该?#22028;?#22522;中补充有细胞因子(IL-3、IL-6、IL-7、G-CSF、GM-CSF、CF、Flt3配体和促红细胞生成素)?#36879;?#31181;浓度的已知化学治疗剂与本发明的任一化合物的组合。在12-14天后通过显微镜检查计数集落。可以使用此方法来测试加成或协同活性的证据。
预期结果将显示,在所测试的条件下,一?#21482;?#22810;种本发明化合物是p190转导的细胞集落形成的强力的和选择性的抑制剂。
实施例25:激酶抑制剂对白血病细胞的体内效果
雌性受体小鼠以相隔约4小时的各约5Gy的两个剂量受到γ源的?#28388;?#24615;辐射。在第二次辐射剂量后约1小时,给小鼠静脉注射约1×106个白血病细胞(例如,Ph+人或鼠细胞,或p190转导的骨髓细胞)。这些细胞与辐射防护剂量的来自3-5周龄的供体小鼠的约5×106个正常骨髓 细胞一起施用。在水中给予受体小鼠抗生素并每天监测。对约14天后生病的小鼠施行安乐死,并收获淋巴器官用于分析。在白血病细胞注射后?#38469;?#22825;开始激酶抑制剂治疗,并每天持续直到小鼠生病或最多移植后约35天。通过经口强饲给予抑制剂。
大约在第10天(治疗前)和安乐死时(治疗后)收集外周血细胞,使其与标记的抗-hCD4抗体接触,并通过流式细胞术计数。可以用此方法证明,在所测试的条件下,与单独使用已知的化学治疗剂(例如格列卫)治疗相比,本文公开的一?#21482;?#22810;?#21482;?#21512;物与已知的化学治疗剂联合的协同效应显著?#26723;?#20102;白血病血细胞计数。
实施例26:狼疮疾病模型小鼠的治疗
在B细胞中缺乏对抗PI3K信号传导的抑制性受体FcγRIIb的小鼠具有发展狼疮的高外?#26376;省cγRIIb敲除小鼠(R2KO,Jackson Labs)被认为是人类疾病的有效模型,因为一些狼疮患者表现出?#26723;?#30340;FcγRIIb表达或功能(S.Bolland和J.V.Ravtech2000.Immunity12:277-285)。
R2KO小鼠在约4-6个月的年龄内发展狼疮样疾病,伴有抗核抗体、肾小球肾炎和蛋白尿。对于这些实验,将雷帕霉素类似物RAD001(可从LC Laboratories获得)用作基准化合物并通过口服给药。在B6.Sle1z.Sle3z模型中已显示此化合物改善狼疮的症状(T.Wu等人,J.Clin Invest.117:2186-2196)。
诸如R2KO、BXSB或MLR/Lpr等狼疮疾病模型小鼠在约2个月龄时得到治疗,持续?#21058;?#20010;月。给予小鼠如下剂量:载体,约10mg/kg的RAD001,或约1mg/kg到约500mg/kg的本文所公开的化合物。在大约整个试验期间,获得血样和尿样,并测定抗核抗体(在血清稀释液中)或蛋白质浓度(尿液中)。也通过ELISA检测血清的抗-ssDNA和抗ds-DNA抗体。在第60天对动物施行安乐死,并收获组织用于测量脾的重量和肾脏疾病。在用H&E染色的肾切片中对肾小球肾炎进行了评?#39304;?#20351;用相同的终点,在终止治疗后,对其他动物进行为期?#21058;?#20010;月的研究。
本领域中建立的这一模型可以用来测试本文所公开的激酶抑制剂能够抑制或延缓狼疮疾病模型小鼠的狼疮症状的发作。
实施例27:鼠骨髓移植试验
雌性受体小鼠受到γ射线源的?#28388;?#24615;辐射。在辐射剂量后约1小时,给小鼠注射约1×106个来自早期传代的p190转导的?#22028;?#29289;的白血病细胞(例如,如在Cancer Genet Cytogenet.2005年8月;161(1):51-6中所述)。将这些细胞与辐射防护剂量的来自3-5周龄的供体小鼠的约5×106个正常骨髓细胞一起施用。在水中给予受体小鼠抗生素并每天监测。对约14天后生病的小鼠施行安乐死,并收获淋巴器官用于流式细胞术和/或磁性富集。在大约第十天开始治疗,并每天持续直到小鼠生病或最多移植后的约35天后。通过经口服强饲(p.o.)给予药物。在预试验中,确定了非治愈性的但却延迟白血病发作大约一周或更少时间的化学治疗剂的剂量;对照用载体处理或用先前证明在此模型中延迟但不能治愈白血病发生的化学治疗剂(例如每日两次约70mg/kg的伊马替尼)进行治疗。在第一阶段使用表达eGFP的p190细胞,且尸检分析仅限于通过流式细胞术计算在骨髓、脾脏和淋巴结(LN)中的白血病细胞的百分比。在第二阶段中,使用表达无尾形式的人CD4的p190细胞,而且尸检分析包括来自脾脏的hCD4+细胞的磁性分选及随后对关键信号传导终点pAkt-T308和S473;PS6和p4EBP-1的免疫印迹分析。作为免疫印迹检测的对照,在裂解之前,在本发明抑制剂的激酶抑制剂的存在和缺乏下温育分选的细胞。任选地,无需事先分选,使用“phosflow”在hCD4-门控的细胞中检测p Akt-S473和pS6-S235/236。如果例如药物治疗的小鼠在35天的时间点上没有发展为临床白血病,则这些信号传导研究是特别有用的。生成存活率的Kaplan-Meier图,并根据本领域中已知的方法进?#22411;?#35745;分析。对来自p190细胞的结果进?#26800;?#29420;和累积分析。
在开始治疗前的第10天开?#36857;?#27599;周从所有小鼠中获得外周血样(100-200μl)。使用血浆测定药物浓度,并分析细胞的白血病标记(eGFP或hCD4)和如本文所述的信号传导生物标?#24688;?
这一本领域中已知的普通试验可以用于检测可用来抑制白血病细胞增殖的本文所公开的化合物的有效治疗剂量。
实施例28:大鼠发展中的II型胶原诱导的关节?#36164;?#39564;
为?#25628;?#31350;本发明的化合物对自身免疫性疾病关节炎的影响,使用胶原诱导的发展中关节炎模型。雌性Lewis大鼠在第0天给予胶原注射。将牛II型胶原在0.01N乙酸中制备为4mg/ml的溶液。将等体积的胶原?#36879;?#27663;不完全佐剂通过手工混合乳化,直到乳化材料的小珠在水中保?#21046;?#24418;状。在每个注射时间,每只啮齿动物在分布于背上的三个皮下点接受300μl的混合物注射。
口服化合物给药从第0天开?#36857;?#36733;体(5%NMP、85%PEG400、10%Solutol)或在载体中的本发明的化合物或对照(例如甲氨蝶呤)每天相隔12个小时施用,持续直到第16天。在第0、3、6、9-17天?#28304;?#40736;进行称重并在第9-17天进行踝的卡尺测量。在第17天测量最终体重,然后对动物施行安乐死。在安乐死后,抽取血液并移除后爪和膝盖。进一步处理血液以用于药代动力学实验和抗II型胶原抗体ELISA试验。对后爪进行称重,然后与膝盖一起保存于10%福尔马?#31181;小?#38543;后处理爪子和膝盖用于显微镜检查。对肝脏、脾脏和胸腺进行称重。准备坐骨神经用于组织病理学分析。
将膝和踝关节固定1-2天并脱钙4-5天。踝关节纵向切成两半,且膝盖沿额状面切成两半。将关节处理、包埋、切片并用甲苯胺?#24230;?#33394;。根据以下标准进行关节评分:
膝和踝的炎症
0=正常
1=在滑膜/关节周围组织中的炎性细胞的最小浸润
2=轻度浸润
3=中度浸润伴中?#20154;?#32959;
4=明显浸润伴明?#36816;?#32959;
5=重度浸润伴重?#20154;?#32959;
踝关节血管翳
0=正常
1=在软骨和软骨下骨中血管翳的最小浸润
2=轻度浸润(<1/4的胫骨或跗骨,在边缘区)
3=中度浸润(1/4到1/3胫骨或小跗骨在边缘区受影响)
4=明显浸润(1/2-3/4的胫骨或跗骨在边缘区受影响)
5=重度浸润(>3/4的胫骨或跗骨在边缘区受影响,整体结构?#29616;?#21464;形)
膝关节血管翳
0=正常
1=在软骨和软骨下骨中血管翳的最小浸润
2=轻度浸润(?#30001;?#33267;胫骨或股骨的表面或软骨下区域的多达1/4)
3=中度浸润(?#30001;?#33267;胫骨或股骨的表面或软骨下区域的>1/4但<1/2)
4=明显浸润(?#30001;?#33267;胫骨或股骨表面的1/2至3/4)
5=重度浸润(?#21754;?gt;3/4的表面)
软骨损伤(踝,重点在小跗骨上)
0=正常
1?#38454;?#23567;=甲苯胺?#24230;?#33394;的最小到轻度丧失,没有明显的软骨细胞丧失或胶原破坏
2=轻度=甲苯胺?#24230;?#33394;的轻度丧失,具有局灶性的轻度(表面)软骨细胞丧失和/或胶原破坏
3=中度=甲苯胺?#24230;?#33394;的中度丧失,具有多灶性的中度(深度到中间区)软骨细胞丧失和/或胶原破坏,较小的跗骨在1/2-3/4深度上受影响
4=明显=甲苯胺?#24230;?#33394;的明显丧失,具有多灶性的明显(深度到深区)软骨细胞丧失和/或胶原破坏,1条或更多条小跗骨有全厚度的软骨丧失
5=重度=甲苯胺?#24230;?#33394;的重度?#33268;?#24615;丧失,具有多灶性的重度(深度到潮痕(tide mark))软骨细胞丧失和/或胶原破坏
软骨损伤(膝,重点在股骨髁上)
0=正常
1?#38454;?#23567;=甲苯胺?#24230;?#33394;的最小到轻度丧失,没有明显的软骨细胞丧失或胶原破坏
2=轻度=甲苯胺?#24230;?#33394;的轻度丧失,具有局灶性的轻度(表面)软骨 细胞丧失和/或胶原破坏
3=?#26800;齲?#30002;苯胺?#24230;?#33394;的中度丧失,具有多灶性到?#33268;?#24615;的中度(深度到中间区)软骨细胞丧失和/或胶原破坏
4=明显=甲苯胺?#24230;?#33394;的明显丧失,具有多灶性到?#33268;?#24615;的明显(深度到深区)软骨细胞丧失和/或胶原破坏,或单一股骨表面全部或接近全部丧失
5=重度=甲苯胺?#24230;?#33394;的重度的?#33268;?#24615;丧失,在股骨和/或胫骨上均具有多灶性的重度(深度到潮痕)软骨细胞丧失和/或胶原破坏
骨吸收(踝)
0=正常
1?#38454;?#23567;=小吸收区域,在?#22836;?#22823;倍率下不明显,极少有破骨细胞
2=轻度=更多的吸收区域,在?#22836;?#22823;倍率下不明显,破骨细胞更多,<1/4的胫骨和跗骨在边缘区再吸收
3=中度=髓小梁和皮?#20351;?#30340;明显吸收,在皮质层中没有全层厚度的缺损,一些髓小梁丧失,在?#22836;?#22823;倍率下病变明显,破骨细胞更多,1/4到1/3的胫骨或跗骨在边缘区受影响
4=明显=皮?#20351;?#20013;的全层厚度缺损,经常伴有剩余皮?#26102;?#38754;的轮廓变形,明显的髓?#20351;?#20007;失,大量破骨细胞,1/2-3/4的胫骨或跗骨在边缘区受影响
5=重度=皮?#20351;?#20013;的全层厚度缺损,经常伴有剩余皮?#26102;?#38754;的轮廓变形,明显的髓?#20351;?#20007;失,大量破骨细胞,>3/4的胫骨或跗骨在边缘区受影响,总体结构?#29616;?#21464;形
骨吸收(膝)
0=正常
1?#38454;?#23567;=小吸收区域,在?#22836;?#22823;倍率下不明显,极少有破骨细胞
2=轻度=更多的吸收区域,累及1/4胫骨或股骨表面(内侧或外侧)的软骨下骨的明确丧失
3=中度=累及胫骨或股骨表面(内侧或外侧)的>1/4但<1/2的软骨下骨的明显吸收
4=明显=累及胫骨或股骨表面(内侧或外侧)的≥1/2但<3/4的软骨下骨的明显吸收
5=?#29616;兀接?#20110;累及胫骨或股骨表面(内侧或外侧)的>3/4的破坏,整个关节的变形
使用Student t-检验或其他?#23454;?#30340;检验(事后检验ANOVA),以设置在5%的显着?#36816;?#24179;的显著性,评估身体/爪?#21448;?#37327;、爪子AUC参数和组织病理学参数的统计分析。爪?#21448;?#37327;和AUC的抑制百分比使用下面的公式进?#23633;?#31639;:
%抑制=A-B/A×100
A=疾病对照平均值–正常平均值
B=经治疗的平均值–正常平均值
预期结果将显示,相对于仅有载体的对照或甲氨蝶?#35782;?#29031;,本发明的化合物表现出关节炎诱导的?#23383;本端?#26102;间增加的显著?#26723;停?#20197;及在如上所述的炎症、血管翳、软骨损伤和骨吸收中的至少一类或多类中踝组织病理学的减轻。预期结果将显示一?#21482;?#22810;种本发明的化合物可用于治疗和减轻关节炎疾病的症状。
进一步预期结果将显示,针?#36816;?#36873;定的测试化合物,在10、20和60mg/kg剂量水平时血清抗II型胶原水平下降,这提示一?#21482;?#22810;种本发明的化合物可能不仅可用于治疗和减轻关节炎疾病的症状,还可用于抑制自身免疫?#20174;?#26412;身。
实施例29:大鼠确立的II型胶原诱导的关节?#36164;?#39564;
为了针对在大鼠中10天确立的II型胶原诱导的关节炎,研究本发明的化合物抑制其炎症、软骨破坏和骨吸收的剂量响应效果,每日一次或每天两次经口施用化合物,共6天。
在第0天,麻醉雌性Lewis大鼠并给予如前所述制备和施用的胶原注射剂。在第6天,麻醉动物并给予第二剂胶原注射剂。在第9天,进行正常(疾病前)的?#20063;?#21644;左侧踝关节的卡尺测量。在第10-11天,通常会出现关节炎,并将大鼠随机分到治疗组中。在踝关节肿胀明显确定并有双侧发病的迹象后进行随机分组。
在选定动物加入研究后,由口服途径开始治疗。每日两次或每天一次(分别为BID或QD)给予动物载体、对照(Enbrel)或化合物剂量。在第1-6天使用2.5ml/kg(BID)或5ml/kg(QD)体积的口服溶液进行给药。在关节炎建立后的第1-7天?#28304;?#40736;进行称重并每天进行踝的卡尺测量。在第7天测得最终体重并对动物施行安乐死。
预期结果将显示,在测试的条件下,对于选择的测试化合物,平均?#23383;本端?#26102;间的增加减少。
实施例30:佐剂诱导的关节?#36164;?#39564;
大鼠的鞘内导管插入术
将鞘内(IT)导管植入异氟烷麻醉的Lewis大鼠(200-250g)内。在6天的恢复期后,除了那些似乎具有感觉或运动异常的动物(一般少于总数的5%)以外,所有动物都用于实验。对于IT给药,通过导管注入10μl药物或盐水,接着注入10μl的等渗盐水。
佐剂性关节炎和药物治疗
植入导管(n=6/组)后数天,在第0天用0.1ml完全弗?#29486;?#21058;(CFA)在?#21754;?#37096;免疫Lewis大鼠。药物(例如,一?#21482;?#22810;种本发明的化合物,或载体)治疗通常在第8天开?#36857;?#24182;每天持续直到第20天。关节炎的临床体征一般在第10天开?#36857;?#24182;每两天通过排水器官充满度测量法确定爪的肿?#27712;?
预期结果将显示,一?#21482;?#22810;种本发明的化合物可用于一个或多个本文所述的疾病或病状的治疗。
实施例31:啮齿动物药代动力学分析
为?#25628;?#31350;本发明的化合物的药代动力学,根据下表对一组4-10周龄的小鼠进行分组:

将本发明的化合物溶解于?#23454;?#30340;载体(例如,5%的1-甲基-2-?#37327;?#28919;酮、85%的聚乙二醇400、10%的Solutor)中,并每天以12小时的间隔口服给药。在最终化合物施用后2小时,所有动物都在CO2中安乐死。立即收集血?#28023;?#24182;保存在冰上用于血浆分离。通过在5000rpm离心10分钟分离血浆。冰冻收获的血浆用于药代动力学检测。
预期结果将证明本发明的化合物的药代动力学参数,如吸收、分布、代谢、?#21028;?#21644;毒性。
实施例32:Basotest试验
使用Orpegen Pharma Basotest试剂盒进行basotest试验。肝素化的全血与测试化合物或溶剂在37℃下预温育20分?#21360;?#28982;后血液与试验试剂盒刺激缓冲液(以引发细胞的?#20174;?接着与变应原(尘螨提取物或草提取物)温育20分?#21360;?#36890;过在冰上温育血样终止脱粒过程。然后用抗-IgE-PE标记细胞以检测嗜碱性粒细胞,以及用抗-gp53-FITC标记细胞以检测gp53(在活化的嗜碱性粒细胞上表达的糖蛋白)。染色后,通过加入裂解溶液裂解红细胞。洗涤细胞,并用流式细胞术进行分析。在该试验中评估时,测试化合物在亚微摩尔?#27573;?#20869;抑制变应原诱导的嗜碱性粒细胞的活化。预期结果将表明,在测试的条件下,一?#21482;?#22810;种本发明的化合物能够抑制变应原诱导的嗜碱性粒细胞的活化。
实施例33:使用本发明的化合物抑制肿瘤生长
细胞系
?#29992;?#22269;典型?#22028;?#29289;保藏中心(ATCC,Manassas,VA)获得目标细 胞系(A549、U87、ZR-75-1和786-O)。在早期传代(例如传代3)中增?#24034;?#20302;?#21348;?#23384;细胞。一份用于进一步增殖以获得足以进行一次TGI研究的细胞(在大约传代9)。
动物
由Harlan提供雌性无胸腺裸鼠。收到时的小鼠为4~6周龄。在处理前,所有小鼠?#38469;?#24212;约一天到两周。小鼠?#24188;?#22312;微?#36879;?#31163;笼中并保持在无特定病原体条件下。用辐照过的鼠?#26438;?#20859;小鼠并提供可自由获得的高压灭菌水。
肿瘤异种移植模型
在小鼠右胁皮下接种0.01至0.5ml的肿瘤细胞(约1.0×105至1.0×108个细胞/小鼠)。接种后5~10天,使用卡尺测量肿瘤并计算肿瘤重量,例如使用动物研?#25239;?#29702;软件如Study Director V.1.6.70(Study Log)进?#23633;?#31639;。使用Study Director将肿瘤大小约120mg的小鼠成对匹配到所需组(第1天)。当小鼠成对匹配时记录体重。每周一?#20102;?#27425;进行肿瘤体积和体重的测量并每天至少一次进行总体观察。在第1天,如所指示的通过口服强饲或静脉内施用本发明的化合物和参考化合物以及载体对照。在实验的最后一天,在最后剂量后1-4小时处死小鼠并收集其肿瘤。切除肿瘤并切成两部分。三分之一的肿瘤在福尔马?#31181;?#22266;定并包埋在石蜡块中,剩余的三分之二的肿瘤快速冷?#24034;?#20648;存于-80℃。
数据和统计分析
利用以下公式计算平均肿瘤生长抑制(TGI):

相对于第1天的起始大小退化的肿瘤从计算中移除。对相对于第1天的肿瘤重量表现出退化的肿瘤,使用下面的公式计算个体肿瘤收缩(TS)。计算并报告各组的平均肿瘤收缩。

可以使?#37238;?#27169;型显示在所测试的条件下,本发明的化合物是否可以抑制肿瘤细胞的生长,如肾癌细胞的生长、乳腺癌细胞的生长、肺癌 细胞的生长或胶质母细胞瘤细胞的生长。
实施例34:PI3K途径的抑制?#36884;?#26377;PI3Kα突变的肿瘤细胞的增殖
在PI3Kα中含有一个或多个突变的细胞,包括但不限于乳腺癌细胞(例如MDA-MB-361、T47D、SKOV-3),以及在PTEN中含有一个或多个突变的细胞,包括但不限于前列腺癌细胞(例如PC3),通常在细胞生长?#22028;?#22522;中,如补充了胎牛血清和/或抗生素的DMEM中生长,并生长至汇合。然后用不同浓度的测试化合物处理细胞约2小时,随后在细胞裂解缓冲液中裂解。对裂解液进行SDS-PAGE,接着通过蛋白质免疫印迹分析?#37255;?#27979;下游信号传导标记,包括但不限于pAKT(S473)、pAKT(T308)、pS6和p4E-BP1。?#37096;?#20197;在本发明化合物如化合物A(表2的化合物54)的各种剂量下测量细胞的增殖程度(及增殖抑制)。β-肌动蛋白可用作管?#19994;?#30333;来确定合适的加载。图9示出了Western印迹,其显示相对于PC3细胞,在MDA-MB-361细胞中,化合物A?#36816;?#27688;酸473处Akt磷酸化的抑制,表明相对于在PTEN途径中有突变的细胞而言,本发明的化合物能优先抑制在PI3Kα途径中有突变的细胞的肿瘤增殖。相对于针对PC3细胞的~10,000nM的IC50,对于MDA-MB-361细胞,化合物A以~1000nM的IC50抑制pAKT。类似地,相对于针对PC3细胞的>10,000nM的IC50,对于MDA-MB-361细胞,化合物A以~1900的IC50抑制细胞增殖。
显示在PI3Kα活性升高的细胞系中化合物A对PI3K途径的抑制的Western印迹在图8中示出。MDA-MB-361(PIK3CA-E545K)、MDA-MB-453(PIK3CA-H1047R)和SK-Br3(Her2)细胞?#37238;?#31181;浓度的化合物A处理2h且随后裂解。细胞裂解物经历SDS-PAGE,随后如上所述进行Western印迹分析以检测下游途径标记物。左列示出了来?#28304;?#26377;PIK3CA突变的MDA-MB-361乳腺癌细胞的数据。中间列示出了来?#28304;?#26377;PIK3CA突变的MDA-MB-453乳腺癌细胞的数据。右列示出了来?#28304;?#26377;HER2突变的SKBr3乳腺癌细胞的数据。
化合物A?#28304;?#26377;PI3Kα突变的肿瘤细胞增殖的影响在图10中示出。将细胞以每孔5000-10,000个细胞接种于96孔平?#35013;?#30340;90ul生长培 养基中。加入预稀释的化合物(在10倍最终浓度下)或DMSO(对照)。制备化合物以使剂量?#27573;?#32463;由3倍连续稀释从30μM直至14nM的最终浓度(8点曲线)。最终DMSO浓?#20219;?.3%。细胞在37℃于CO2?#22028;?#31665;?#20449;嘌?2h。72h后,使用CellTiter-Glo发光试剂(Promega,PR-G7573)测定增殖。以100μL/孔加入CellTiter-Glo试剂,这与各孔中存在的?#22028;?#22522;体积相?#21462;?#22312;定轨振荡器上混合内容物30分钟以裂解细胞。在PerkinElmer EnVision读板仪上读取发光。使用S型剂量响应非线性回归拟合在GraphPad Prism中产生曲线和IC50值。抑制%计算为:1–(细胞+抑制剂)–背景信号)/(细胞+DMSO)–背景信号)×100。
实施例35:血管生成的体外抑制
使用管生成试验,例如通过使用管形成试验试剂盒(例如可从Invitrogen商业购得),评估在测试化合物的存在下血管生成的抑制。以使用诸如人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的内皮细胞系在体外测量血管生成的能力。在存在或不存在化合物的情况下,根据试剂盒说明书进行试验。简言之,将凝胶基质应用于细胞?#22028;?#29289;表面,将细胞与生长因子一起添加到基质?#21754;?#30340;表面,一些样品也接受抑制剂化合物,细胞在37℃和5%CO2下温育对于对照样品(无化合物添加)而言足以形成管结构的时间(如过夜),用细胞渗透性染料(例如钙黄绿素)染色细胞,并且将细胞可视化以确定管形成的程度。相对于未受抑制的对照细胞,管形成的任何下降都表示血管生成的抑制。基于测试剂量和相应的管形成抑制的程度,计算管形成的IC50值。可以使用本领域中已知的许多方法,如区分死细胞和活细胞的染色方法(例如,可从Invitrogen商购的Image-iT DEAD Green生存力染色),来测定细胞生存力的IC50值。
实施例36:在乳腺癌异种小鼠模型中的体内效力
将通过人乳腺癌细胞MDA-MB-361(PI3Kα/HER2癌)植入产生的荷瘤(~150mm3)裸鼠分为未经处理的对照(仅载体)组和治疗组。治疗组中的小鼠进一步分成接受60mg/kg(60mpk)的PI3Kα抑制剂(化合物A)、60mg/kg的EGFR抑制剂(拉帕替尼)、3mg/kg的第二EGFR抑制剂(曲妥珠单抗)或化合物A与拉帕替尼或曲妥珠单抗的组合的小鼠。治疗组 中的小鼠每日通过经口灌入(oral lavage)接受限定剂量21天,在?#20284;?#38388;,如上所述(例如每2-5天)计算肿瘤体积。临床前乳腺癌模型中化合物A与EGFR抑制剂联合治疗对肿瘤体积的协同效应在图2中示出。
这些结果进一步得到图3的支持,该?#38469;?#20986;了针对激酶活性的各种标记物的水平以及针对凋亡标记物的Western印迹结果。在存在或不存在拉帕替尼的情况下,用不同浓度的化合物A或全-I类PI3K抑制剂GDC-0941处理MDA-MB-361细胞2小时。然后将细胞裂解并如上所述进行Western印迹分析。图4示出了化合物A或I类PI3K抑制剂与EGFR抑制剂拉帕替尼联合治疗在相同的临床前乳腺癌模型中2小时和24小时后的协同效应。较长时间的治疗似乎能增强该协同效应(尤其参见S6磷酸化作用和PARP切割)。
图6示出了一幅图,显示使用70mg/kg全-PI3K抑制剂和60mg/kg化合物A时乳腺癌模型的肿瘤重量的减少(左图),和与60mg/kg化合物A相比,70mg/kg全-PI3K抑制剂使小鼠脾脏中MZB细胞的存在减少(右图)。在最终剂量后2小时收集脾脏,处理并用?#23454;?#30340;抗体染色(边缘区B细胞:B220+;CD23-;CD21hi),且使用Guava Cytosoft5.2软件在GUAVA EasyCyte FACS机器上对染色进行分析。该数据表明,与全-PI3K抑制剂相比,为选择性PI3Kα抑制剂的化合物如化合物A对边缘区B细胞的定位/生存力没有影响。
实施例37:TNP-Ficoll T细胞?#19988;览?#30340;B细胞激活试验
为测试本发明化合物在抑制T细胞?#19988;览?#24615;抗体产生中的效应,如本文所述使用TNP-Ficoll B细胞激活试验。将本发明的化合物溶解在?#23454;?#30340;载体(例如5%1-甲基-2-?#37327;?#28919;酮、85%聚乙二醇400、10%Solutor)中。在进行TNP-Ficoll处理之前约1小时,向4-10周龄的小鼠经口施用化合物。为?#25628;?#31350;化合物对B细胞激活的影响,根据下表对