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谷芽活性提取物及其在防晒化妆品中的应用.pdf

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谷芽 活性 提取物 及其 防晒 化妆品 中的 应用
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摘要
申请专利号:

CN201910046952

申请日:

20190118

公开号:

CN109602673A

公开日:

20190412

当前法律状态:

公开

有效性:

审中

法?#19978;?#24773;: 公开
IPC分类号: A61K8/9794;A61Q17/04 主分类号: A61K8/9794;A61Q17/04
申请人: 崔星海
发明人: 崔星海
地址: 110101 辽宁省沈阳市苏家屯区翠柏路15号3-2-1
优先权:
专利代理机构: 代理人:
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法律状态
申请(专利)号:

CN201910046952

授权公告号:

法律状态公告日:

20190412

法律状态类型:

公开

摘要

本发明提供了一种谷芽活性提取物及其在防晒化妆品中的应用,属于化妆品领域。该谷芽活性提取物的制备方法包括:将谷芽粉末与细胞壁降解酶混合孵育,得到酶解物;再将酶解物与乙醇溶液混合,进行加热回流提取,将所得提取物用水溶解后,依次用氯仿、乙酸乙酯和乙醇进行萃取,得到乙酸乙酯萃取物;用反相硅胶色谱法对乙酸乙酯萃取物进行分离,洗脱剂采用甲醇?水混合体系,收集浓度为65?75%的甲醇溶?#21512;?#33073;部分,浓缩干燥。这种谷芽活性提取物具有紫外线损伤修复的功效,且该提取物?#19988;?#33647;食同源的谷芽为原料制备得到,长期使用无毒副作用,?#26194;?#27867;应用中防晒化妆品中。

权利要求书

1.一种谷芽活性提取物,其特征在于,其通过下述方法制备: 将谷芽粉末与细胞壁降解酶混合孵育,得到酶解物; 再将所述酶解物与乙醇溶液混合,进行加热回流提取,将所得提取物用水溶解后,依次用氯仿、乙酸乙酯和乙醇进行萃取,得到乙酸乙酯萃取物; 用反相硅胶色谱法?#36816;?#36848;乙酸乙酯萃取物进行分离,洗脱剂采用甲醇-水混合体系,收集浓度为65-75%的甲醇溶?#21512;?#33073;部分,浓缩干燥。 2.根据权利要求1所述的谷芽活性提取物,其特征在于,所述细胞壁降解酶包括?#23435;?#32032;酶和?#23616;?#32032;酶。 3.根据权利要求1所述的谷芽活性提取物,其特征在于,将所述谷芽粉末与所述细胞壁降解酶混合孵育的温度为30-40℃、孵育时间为7-10 h。 4.根据权利要求1所述的谷芽活性提取物,其特征在于,所述乙醇溶液的浓度为70-90%。 5.根据权利要求1所述的谷芽活性提取物,其特征在于,所述加热回流提取的温度为70-80℃、时间为1-3h。 6.根据权利要求1所述的谷芽活性提取物,其特征在于,所述甲醇-水混合体系中甲醇的体积浓度依次为5-15%、25-35%、45-55%、65-75%和85-95%。 7.根据权利要求1所述的谷芽活性提取物,其特征在于,采用所述反相硅胶色谱法?#36816;?#36848;乙酸乙酯萃取物进行分离的步骤中,所述色谱填料的用量为所述乙酸乙酯萃取物的22-26倍。 8.根据权利要求1所述的谷芽活性提取物,其特征在于,在用所述反相硅胶色谱法?#36816;?#36848;乙酸乙酯萃取物进行分离的步骤前,还包括用孔径为0.2-0.3μm的滤膜过滤乙酸乙酯萃取液的步骤。 9.一种如权利要求1-8?#25105;?#39033;所述的谷芽活性提取物在制备防晒化妆品中的应用。 10.一种防晒化妆品,其特征在于,其包括如权利要求1-8?#25105;?#39033;所述的谷芽活性提取物。

说明书


谷芽活性提取物及其在防晒化妆品中的应用
技术领域


本发明涉及化妆品领域,具体而言,涉及一种谷芽活性提取物及其在防晒化妆品
中的应用。


背景技术


紫外线,其不仅能够破坏最外层的皮肤,还能够导致真皮细胞坏死和代谢紊乱。当
皮肤受到紫外线过度暴晒后,会损伤表皮细胞;活化酪胺酸酶,加速色素合成;破坏皮肤的
保湿功能,使皮肤变?#37238;?#29157;;使真皮层中的弹力?#23435;?#21463;损,产生细纹。在强烈照射下,还会造
成肌肤发炎、灼伤。有异常情形时,则会变成色素性的皮肤癌?#21462;?#22240;此,皮肤防晒至关重要。


目前,市面上的防晒剂大体可以分为两类:物理性的紫外线屏蔽剂和化学性的紫
外线吸收剂。近年来,随着市面上各种化学合成类的化妆品屡次出现中毒事件,人们在选择
化妆品的时候越来越崇尚一些纯天然的植物类别的化妆品。中草药因其具有药效温和、不
良作用小而得到消费者的广泛认同。然而,我国的中草药种类?#20493;啵?#33647;性多变,且每味药材
中均含有多种的化学成分,这就对寻找开发一种高效防晒且副作用小的化妆品造成极大的
困?#36873;?br>

鉴于此,特提出本专利。


发明内容


本发明的目的在于提供一种谷芽活性提取物及其应用,这种谷芽活性提取物能够
对UV照射造成的皮肤细胞损?#31169;?#34892;修复,?#39029;?#26399;使用对人体无副作用,可用于多种防晒化
妆品的制备中,应用前景广阔。


为了实现本发明的上述目的,特采用以下技术方案:


第一方面,本发明提供一种谷芽活性提取物,其通过下述方法制备:


将谷芽粉末与细胞壁降解酶混合孵育,得到酶解物;


再将酶解物与乙醇溶液混合,进行加热回流提取,将所得提取物用水溶解后,依次用氯
仿、乙酸乙酯和乙醇进行萃取,得到乙酸乙酯萃取物;


用反相硅胶色谱法对乙酸乙酯萃取物进行分离,洗脱剂采用甲醇-水混合体系,收集浓
度为65-75%的甲醇溶?#21512;?#33073;部分,浓缩干燥。


进一步地,在本发明较佳的实施例中,上述细胞壁降解酶包括?#23435;?#32032;酶和?#23616;?#32032;
酶。


进一步地,在本发明较佳的实施例中,上述将谷芽粉末与细胞壁降解酶混合孵育
的温度为30-40℃、孵育时间为7-10 h。


进一步地,在本发明较佳的实施例中,上述乙醇溶液的浓度为70-90%。


进一步地,在本发明较佳的实施例中,上述加热回流提取的温度为70-80℃、时间
为1-3h。


进一步地,在本发明较佳的实施例中,上述甲醇-水混合体系中甲醇的体积浓度依
次为5-15%、25-35%、45-55%、65-75%和85-95%。


进一步地,在本发明较佳的实施例中,上述采用反相硅胶色谱法对乙酸乙酯萃取
物进行分离的步骤中,色谱填料的用量为乙酸乙酯萃取物的22-26倍。


进一步地,在本发明较佳的实施例中,上述在用反相硅胶色谱法对乙酸乙酯萃取
物进行分离的步骤前,还包括用孔径为0.2-0.3μm的滤膜过滤乙酸乙酯萃取液的步骤。


第二方面,本发明还提供一种上述谷芽活性提取物在制备防晒化妆品中的应用。


第三方面,本发明还提供一种防晒化妆品,其包括上述谷芽活性提取物。


与现有技术相比,本发明的有益效果为:


本发明提供的这种谷芽活性提取物,首先采用细胞壁降解酶水解谷芽细胞壁中富含的
?#23435;?#32032;和?#23616;?#32032;,破坏谷芽的细胞壁,使得位于谷芽细胞内的活性物质快速溶出,提高谷芽
活性成分的溶出?#30465;?#20877;采用加热回流提取法?#36816;?#24471;酶解物进行提取,并用不同极性的溶剂
进行分段萃取,以使有效活性成分的含量增大。最后,采用反相硅胶色谱法对乙酸乙酯萃取
物进行分离,进一步提高谷芽活性提取物的纯?#21462;?br>

发明人研究发现,谷芽活性提取物具有紫外线损伤修复的功效,且该提取物?#19988;?br>药食同源的谷芽为原料制备得到,长期使用无毒副作用,?#26194;?#27867;应用中防晒化妆品中,例如
防晒面霜、防?#35895;?#28082;?#21462;?br>

具体实施方式


下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详?#35813;?#36848;,但是本领域技术人员将会
理解,下列实施例仅用于说明本发明,而不应视为限制本发明的?#27573;А?#23454;施例中未注明具体
条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为
可以通过市售购买获得的常规产品。


本实施方式提供一种谷芽活性提取物,该提取物以谷芽为原料制备得到。


谷芽,为禾本科植物粟
Setaria italica(L.)Beauv.的成熟果实经发芽干燥的炮
制加工品,是一味传统中药。将粟谷用水浸泡后,保持适宜的温湿度,待须根长至约6mm时,
晒干或低温干燥。其味甘性温,归脾胃经,具有消食和中、健脾开胃的功效。常用于治疗食积
不消、腹胀口臭、脾胃虚弱等病症。


该谷芽活性提取物的制备方法如下:


步骤S1:将谷芽粉末与细胞壁降解酶混合孵育,得到酶解物;


其中,细胞壁降解酶包括?#23435;?#32032;酶和?#23616;?#32032;酶。优选地,?#23435;?#32032;酶和?#23616;?#32032;酶的质量比
为2-4:1,或者质量比为3:1。


进一步地,上述谷芽粉末与细胞壁降解酶混合孵育的温度为30-40℃,或者温度为
32-38℃,或者为34-36℃;谷芽粉末与细胞壁降解酶混合孵育的时间为7-10 h,或者为8-
9h。


步骤S2:再将酶解物与乙醇溶液混合,进行加热回流提取,将所得提取物用水溶解
后,依次用氯仿、乙酸乙酯和乙醇进行萃取,得到乙酸乙酯萃取物;


进一步地,上述乙醇溶液的浓度为70-90%,或者为75-85%,或者为80%。优选地,酶解物
与乙醇溶液混合的料液比为1:5-8,或者为1:6-7。


进一步地,上述加热回流提取的温度为70-80℃,或者为73-77℃;提取时间为1-
3h,或者为2-3h;提取次数为1-3次。


优选地,该制备方法还包括:用孔径为0.2-0.3μm的滤膜对萃取后所得的乙酸乙酯
萃取液进行过滤。


步骤S3:用反相硅胶色谱法对乙酸乙酯萃取物进行分离,洗脱剂采用甲醇-水混合
体系,收集浓度为65-75%的甲醇溶?#21512;?#33073;部分,浓缩干燥,记得谷芽活性提取物。


优选地,上述洗脱剂为体积浓度依次为5-15%、25-35%、45-55%、65-75%和85-95%的
甲醇-水溶?#28023;?#27599;个体积浓度的甲醇-水溶?#21512;?#33073;1-2个柱体积。


进一步地,上述采用反相硅胶色谱法对乙酸乙酯萃取物进行分离的步骤中,色谱
填料的用量为乙酸乙酯萃取物的22-26倍,或者为23-25倍。


发明人研究发现,通过上述方法制备得到的谷芽活性提取物,能够对UV照射造成
的皮肤细胞损?#31169;?#34892;修复,?#39029;?#26399;使用对人体无副作用,可用于多种防晒化妆品的制备中,


以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详?#35813;?#36848;:


实施例1


本实施例提供一种谷芽活性提取物,其通过下述方法制备:


a.将谷芽粉末与?#23435;?#32032;酶和?#23616;?#32032;酶混合,于37℃?#36335;?#32946;8h,得到酶解?#28023;?#20943;压浓缩
后,得到酶解物;


b.将酶解物与80%的乙醇溶液混合,于75℃下进行加热回流提取2次,每次2h。将所得提
取物用水溶解后,依次用氯仿、乙酸乙酯和乙醇进行萃取,用孔径为0.22μm的滤膜过滤所得
到的乙酸乙酯萃取?#28023;?#20943;压浓缩后,得到乙酸乙酯萃取物;


c.将乙酸乙酯萃取物上样至反相硅胶色谱柱中,其中色谱填料的用量为乙酸乙酯萃取
物的24倍,以体积浓度依次为10%、20%、40%、70%和90%的甲醇-水溶液进行洗脱,每个体积浓
度洗脱1.5个柱体积,收集体积浓度为70%的甲醇溶?#21512;?#33073;部分,浓缩干燥,即得谷芽活性提
取物。


实施例2


本实施例提供一种谷芽活性提取物,其通过下述方法制备:


a.将谷芽粉末与?#23435;?#32032;酶和?#23616;?#32032;酶混合,于40℃?#36335;?#32946;7h,得到酶解?#28023;?#20943;压浓缩
后,得到酶解物;


b.将酶解物与90%的乙醇溶液混合,于70℃下进行加热回流提取2次,每次3h。将所得提
取物用水溶解后,依次用氯仿、乙酸乙酯和乙醇进行萃取,用孔径为0.2μm的滤膜过滤所得
到的乙酸乙酯萃取?#28023;?#20943;压浓缩后,得到乙酸乙酯萃取物;


c.将乙酸乙酯萃取物上样至反相硅胶色谱柱中,其中色谱填料的用量为乙酸乙酯萃取
物的22倍,以体积浓度依次为5%、25%、45%、65%和85%的甲醇-水溶液进行洗脱,每个体积浓
度洗脱2个柱体积,收集体积浓度为65%的甲醇溶?#21512;?#33073;部分,浓缩干燥,即得谷芽活性提取
物。


实施例3


本实施例提供一种谷芽活性提取物,其通过下述方法制备:


a.将谷芽粉末与?#23435;?#32032;酶和?#23616;?#32032;酶混合,于30℃?#36335;?#32946;10h,得到酶解?#28023;?#20943;压浓缩
后,得到酶解物;


b.将酶解物与70%的乙醇溶液混合,于80℃下进行加热回流提取3次,每次1h。将所得提
取物用水溶解后,依次用氯仿、乙酸乙酯和乙醇进行萃取,用孔径为0.3μm的滤膜过滤所得
到的乙酸乙酯萃取?#28023;?#20943;压浓缩后,得到乙酸乙酯萃取物;


c.将乙酸乙酯萃取物上样至反相硅胶色谱柱中,其中色谱填料的用量为乙酸乙酯萃取
物的26倍,以体积浓度依次为15%、35%、55%、75%和95%的甲醇-水溶液进行洗脱,每个体积浓
度洗脱1个柱体积,收集体积浓度为75%的甲醇溶?#21512;?#33073;部分,浓缩干燥,即得谷芽活性提取
物。


实验例


实施例1-3中提供的谷芽活性提取物对皮肤细胞UV损伤的影响


一、实验方法:


1)样品制备:分别取0.1g的实施例1-3中提供的谷芽活性提取物以及乙酸乙酯提取物,
用5mL水溶解,稀释后得到10μg/mL的样品溶液。


2)复苏皮肤细胞,待皮肤细胞生长至对数期后,进行细胞同步化处理。


3)将同步化后的细胞接种于细胞板中,对照组加入正常培养基,实验组加入由实
施例1-3中提供的谷芽活性提取物以及乙酸乙酯提取物所?#26723;?#30340;样品溶?#28023;?#24182;置于紫外线
照射装置下,进行培养孵育。


4)14天后,在细胞板的每个孔中加入试剂盒中的测试?#28023;?#38663;荡后测定荧光值,?#23380;?br>三个复孔取平均值。同时,以正常细胞100%为基准,计算荧光单位ATP的百分含量,得到防护
?#30465;?br>

二、实验结果


实验结果如表1所示。


表1.实施例1-3中所得样品对皮肤细胞UV损伤的防护率






由表1可知,相较于谷芽的乙酸乙酯萃取物,谷芽活性提取物对皮肤细胞的防护率约为
72%左右,说明该谷芽活性提取物皮肤细胞的有UV防护作用,且对已经损伤的皮肤细胞有一
定的修复作用。由此提示,该谷芽活性提取物可作为活性物质用于多种防晒化妆品中。


尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明,然而应意识到,在不背离本发明的
精神和?#27573;?#30340;情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此,这意味着在所附权利要求中
包括属于本发明?#27573;?#20869;的所有这些变化和修改。


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