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一种生物酶酶解茶梗制备茶酒的方法.pdf

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一种 生物酶 酶解茶梗 制备 方法
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摘要
申请专利号:

CN201910027777

申请日:

20190111

公开号:

CN109468187A

公开日:

20190315

当前法律状态:

实质审查的生效

有效性:

审中

法?#19978;?#24773;: 实质审查的生效
IPC分类号: C12G3/02;C12R1/865 主分类号: C12G3/02;C12R1/865
申请人: 中国农业科学院茶叶研究所
发明人: 邹纯;尹军峰;许勇泉;陈建新;汪芳;傅燕青;高颖;陈根生
地址: 310008 浙江省杭州市西湖区梅灵南路9号
优先权:
专利代理机?#26775;?/td> 33213 代理人: 沈渊琪
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法律状态
申请(专利)号:

CN201910027777

授权公告号:

法律状态公告日:

20190409

法律状态类型:

实质审查的生效

摘要

一种生物酶酶解茶梗制备茶酒的方法,属于生物工程技术领域。其包括以下步骤:茶梗经粉碎、酶解、与茶鲜叶混合得到茶梗培养基;酿酒酵母T3接种茶梗培养基,发酵得到茶酒。本发明先通过?#23435;?#32032;酶、果胶酶、单宁酶对茶梗进行水解反应,提高可溶性糖含量、?#26723;?#37231;型儿茶素含量;再利用茶鲜叶中所含的生物酶对其进行酶促氧化,?#26723;?#33510;涩味并促进香气物质及茶黄素转化;然后通过酿酒酵母发酵,快速获得发酵型茶酒。通过本发明提供的方法可将来源广泛、价格低廉、难以利用的茶梗转化为茶黄素含量较高且风味宜人的茶酒。

权利要求书

1.一种生物酶酶解茶梗制备茶酒的方法,其特征在于包括以下步骤: 1)将茶梗?#37238;?#36895;粉碎机进行粉碎,并用50~100?#21487;?#32593;?#20613;?#33590;梗粉末; 2)将上述茶梗粉末与水按1~2:10的质量比进行混合,在80~100℃下保温1~2 h,然后冷却至50℃; 3)加入茶梗粉末质量0.1~0.2%的?#23435;?#32032;酶、0.05~0.1%的果胶酶以及0.01~0.1%的单宁酶,在50℃下酶解2~4 h,然后冷却至35℃; 4)取茶梗粉末质量10~20%的茶鲜叶,与水按1:3的比例进行混合,然后低温快速匀浆,制备?#19978;?#21494;悬浮物;将制备好的鲜叶悬浮物加入到步骤3的酶解液中,于35℃下保温1~2 h; 5)将步骤4获得的酶解液,置于80~100℃下保温0.5~1 h,获得茶梗培养基; 6)取低温保存的酿酒酵母T3,酿酒酵母T3的保藏编号为CCTCC NO:M 2017624,按0.1%接种量接于PDA培养基中,在26~30℃下静置培养34~38 h; 7)在步骤5)得到的茶梗培养基中按4~10%的接种量接入酿酒酵母T3的种子培养液,在密闭的发酵罐中于20~26℃下静置培养5~7天,得到茶酒。 2.如权利要求1所述的一种生物酶酶解茶梗制备茶酒的方法,其特征在于所述的步骤2)中加入茶梗粉末质量0.12~0.18%的?#23435;?#32032;酶、0.06~0.0.08%的果胶酶以及0.04~0.08%的单宁酶。 3.如权利要求1所述的一种生物酶酶解茶梗制备茶酒的方法,其特征在于所述的步骤7)中茶梗培养基中按6~8%的接种量接入酿酒酵母T3的种子培养液。

说明书


一种生物酶酶解茶梗制备茶酒的方法
技术领域


本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种生物酶酶解茶梗制备茶酒的方法。


背景技术


茶梗是茶叶生产和加工过程中形成的主要副产物,约占茶叶质量的20%。由于茶梗
质地坚韧,难以直接冲泡饮用,通常将其作为固体废物焚烧处理或作为茶园肥料。茶梗中富
含?#23435;?#32032;、茶多酚、多糖、氨基酸等多种营养成分,若能将其转化为附加?#21040;?#39640;的茶叶深加
工产品,既可以提高茶叶副产物的利用?#30465;?#20135;生较好的经济效益,又能避免环境污染。


现有技术中也公开了一些利用茶梗进行深度加工的技术方案,如公开号为CN
108835304 A的发明专利公开了一种瞬时弹射蒸汽爆破法生产茶梗红茶的方法,其具体包
括(1)茶梗预处理:采摘新鲜茶梗,萎凋至含水量50-60%,然后喷施1%的蒸汽爆破保护剂,
采用瞬时弹射爆破法对茶梗进行蒸汽爆破处理,得茶梗爆破物,备用;(2)茶叶预处理:采摘
?#21512;?#23395;一芽二叶、一芽一叶或者单芽的鲜叶,萎凋至含水量60-65%,然后揉捻,揉捻适?#26009;?br>胞破坏率达85%以上,叶片成条率90%以上,条索紧卷,茶汁充 分外溢,粘附于叶表面,局
部揉捻叶泛红为?#26775;?#24471;茶叶揉捻物备用;(3)发酵:按照体积比10-15:85-90的比例,将茶叶
揉捻物与茶梗爆破物混合均匀,发酵;(4)烘干,即得茶梗红茶;所述的蒸汽爆破保护剂,按
照重量百分比计,包括VC3-5%、阿拉伯胶2-3%,海藻糖1-2%,葡萄糖氧化酶1-3%、蔗糖酯
3-5%、柠檬酸0 .1%、可溶性淀粉 3-5%,余量水。


该发明是通过对茶梗物理加工处理最终的得到红茶产品。该发明中茶梗采用物理
方法进?#24615;?#22788;理,不能有效地将茶梗中的可溶性糖等有效成分的溶出,最终得到的红茶产
品中有效成分含量低,茶梗利用率低。


目前认为,通过微生物发酵将茶梗制备成发酵产品是一种提高其利用率的有效途
径。然而,茶梗中存在可溶性糖含?#31185;?#20302;、酯型儿茶素含量较高等问题,直接用茶梗发酵导
致发酵速度慢、发酵程度低、产品苦涩味较重等问题。


发明内容


针对现有技术存在的问题,本发明的目的在于设计提供一种生物酶酶解茶梗制备
茶酒的方法的技术方?#28014;?br>

所述的一种生物酶酶解茶梗制备茶酒的方法,其特征在于包括以下步骤:


1)将茶梗?#37238;?#36895;粉碎机进行粉碎,并用50~100?#21487;?#32593;?#20613;?#33590;梗粉末;


2)将上述茶梗粉末与水按1~2:10的质量比进行混合,在80~100℃下保温1~2 h,然
后冷却至50℃;


3)加入茶梗粉末质量0.1~0.2%的?#23435;?#32032;酶、0.05~0.1%的果胶酶以及0.01~0.1%的
单宁酶,在50℃下酶解2~4 h,然后冷却至35℃;


4)取茶梗粉末质量10~20%的茶鲜叶,与水按1:3的比例进行混合,然后低温快速匀浆,
制备?#19978;?#21494;悬浮物;将制备好的鲜叶悬浮物加入到步骤3的酶解液中,于35℃下保温1~2
h;


5)将步骤4获得的酶解液,置于80~100℃下保温0.5~1 h,获得茶梗培养基;


6)取低温保存的酿酒酵母T3,酿酒酵母T3的保藏编号为CCTCC NO:M 2017624,按0.1%
接种量接于PDA培养基中,在26~30℃下静置培养34~38 h;


7)在步骤5)得到的茶梗培养基中按4~10%的接种量接入酿酒酵母T3的种子培养液,在
密闭的发酵罐中于20~26℃下静置培养5~7天,得到茶酒。


所述的一种生物酶酶解茶梗制备茶酒的方法,其特征在于所述的步骤2)中加入茶
梗粉末质量0.12~0.18%的?#23435;?#32032;酶、0.06~0.0.08%的果胶酶以及0.04~0.08%的单宁酶。


所述的一种生物酶酶解茶梗制备茶酒的方法,其特征在于所述的步骤7)中茶梗培
养基中按6~8%的接种量接入酿酒酵母T3的种子培养液。


本发明中涉及的酿酒酵母T3为现有菌株,已在公开号为 CN 107699506 A的发明
专利中公开。


本发明先通过?#23435;?#32032;酶、果胶酶、单宁酶对茶梗进行水解反应,提高可溶性糖含
量、?#26723;?#37231;型儿茶素含量;再利用茶鲜叶中所含的生物酶对其进行酶促氧化,?#26723;?#33510;涩味并
促进香气物质及茶黄素转化;然后通过酿酒酵母发酵,快速获得发酵型茶酒。通过本发明提
供的方法可将来源广泛、价格低廉、难以利用的茶梗转化为茶黄素含量较高且风味宜人的
茶酒。


?#37237;?#35828;明


图1为实施例2中HPLC对儿茶素、茶黄素等含量检测色谱图;


图2为实施例3中HPLC对儿茶素、茶黄素等含量检测色谱图。


具体实施方式


为了使本发明更容易理解,下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。而这些实施
例仅为了说明本发明而不用于限制本发明的范围。


实施例 1


茶酒中儿茶素、茶黄素含量的检测:


将茶酒样品离心后取上清液,用0.22μm微孔滤膜过滤,滤液待测。应用HPLC高效?#21512;?#33394;
谱仪LC-20AD(岛津公司生产),VWD检测器进行检测。色谱柱为ZORBAXSB-C18ODS,5μm,4.6mm
×150mm。流动相为:A相将90mL乙腈、20mL冰?#23452;帷?mL EDTA-2Na混合,用水定容至1L;B相为
将800mL乙腈、20mL冰?#23452;帷?mL EDTA-2Na混合,用水定容至1L。色谱条件为:流速1mL/min,
柱温35℃,检测波长278nm,进样量:5μL,梯度洗脱(100%A相保持10min→15min内由100%A相
变为68%A相、32%B相→68%A相、32%B相保持10min→100%A相)。


实施例 2


以铁观音茶梗为原料制备茶酒,主要生产过程包括茶梗培养基的制备和微生物发酵生
产茶酒。


铁观音茶梗培养基的制备如下:


将铁观音茶梗?#37238;?#36895;粉碎机进行粉碎,并用50?#21487;?#32593;?#20613;?#33590;梗粉末;取茶梗粉末1kg与
10L水进行混合,在100℃下保温2 h,然后冷却至50℃;在上述茶梗提取液中加入1 g的?#23435;?br>素酶、0.5 g的果胶酶以及0.1 g的单宁酶,在50℃下酶解4 h,然后冷却至35℃;取200 g的
茶鲜叶,与600 mL水混合,然后低温快速匀浆,制备?#19978;?#21494;悬浮物,并加入到上述酶解液中,
于35℃下保温2 h;然后置于100℃下保温1 h,获得铁观音茶梗培养基。


进一步以酿酒酵母T3(保藏编号CCTCC NO:M 2017624)发酵铁观音茶梗培养基生
产茶酒:


首先,取低温保存的酿酒酵母T3,按0.1%接种量接于PDA培养基中,在26℃下静置培养
38 h。然后,在铁观音茶梗培养基中按4%的接种量接入酿酒酵母T3的种子培养液,在密闭的
发酵罐中于26℃下静置培养5天,获得茶酒。所获茶酒具有典型的铁观音香气,酒香明显,口
?#34892;?#35843;。通过HPLC对儿茶素、茶黄素含量进行检测,色谱?#25216;?#22270;1。主要?#20998;食?#20998;含量如表1
所示。


表1






实施例 3


以绿茶茶梗为原料制备茶酒,主要生产过程包括茶梗培养基的制备和微生物发酵生产
茶酒。


绿茶茶梗培养基的制备如下:


将绿茶茶梗?#37238;?#36895;粉碎机进行粉碎,并用100?#21487;?#32593;?#20613;?#33590;梗粉末;取茶梗粉末2kg与
10L水进行混合,在80℃下保温1h,然后冷却至50℃;上述茶梗提取液中加入4g?#23435;?#32032;酶、2g
的果胶酶以及2g的单宁酶,在50℃下酶解2 h,然后冷却至35℃;取200g的茶鲜叶,与600 mL
水混合,然后低温快速匀浆,制备?#19978;?#21494;悬浮物,并加入到上述酶解液中,于35℃下保温1
h;然后置于80℃下保温0.5 h,获得绿茶茶梗培养基。


进一步以酿酒酵母T3(保藏编号CCTCC NO:M 2017624)发酵绿茶茶梗培养基生产
茶酒:


首先,取低温保存的酿酒酵母T3,按0.1%接种量接于PDA培养基中,在30℃下静置培养
34 h。然后,在绿茶茶梗培养基中按10%的接种量接入酿酒酵母T3的种子培养液,在密闭的
发酵罐中于20℃下静置培养7天,获得茶酒。所获茶酒茶香凸出,?#28304;?#37202;香,口感醇和,具有
一定果味。通过HPLC对儿茶素、茶黄素含量进行检测,色谱?#25216;?#22270;2。主要?#20998;食?#20998;含量如表
2所示。


表2






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